Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - 2001), страница 13

!Е |Ье Гоге!Вп РНА )а япаП (< ! 00 Ьр) апд |Е |Ье |паегпоп пеПЬег д!я гирыЬе геасПп8 Ггаше пог аЕГесла йе ягисгиге оГ йе а-Ега8шепл, а-сошр!ешеп|апоп п|ау пос Ье аедои|1у аГГесгед. Ехашр!ез оЕ гЬ!з рЬепогпепоп Ьаче Ъееп досишепсед, Ьи| |Ьеу аге чегу гаге апд оЕ я8гППсапсе оп1у го |Ье !пчеаП8а|ог лчЬо епсоипсега |Ьь ргоЫеп|.

° )ч)ос аП ччЬ!ге со!оп!еа саггу гесо|пЬ|пап| р1аяпЫя Ми|а|юп ог 1оаа оЕ !ас аел)иепсеа и|ау риг8е |Ье р1аяпЫ оГ |ь аЬ|1иу |о ехргеаа |Ье а-Ега8шепг. Ноъчечег, Пиа ь по| а ргоЫе|п ш ргас|ке Ьесаые йе Еге|!иепсу оЕ !ас пш|апь !п |Ье р1аяпЫ рори1адоп ь иялаПу Гаг 1олчег |Ьап йе пшпЬег оЕ гесошЪ|папь Вепегалед !п а Пца|юп геас|юп.

ИепГ!Еуйщ КесогпЬ!пап1 Р!аяппЬ Ьу НуЬг!йхаЕ!оп 1п |Ье пи|1-1960я аЕ|ег Ху8аагд апд НаП (1963) Ьад аЬолчп йа| яп81е-аггапдед Р!члА сои1д Ье ишпоЬ|1|хед оп и!ггосеПи1оле 61|егя РепЬагй (!966) апд Я!1еар!е апд 8р!е8е1шап !!965) с1ешопа|га|ед |Ьа| пис1е!с асиЬ Пхе|1 ш |Ь!а лчау сои1д Ье дегесгед лч1|Ь ехали)яге лепя|!ч!гу Ьу ЬуЬг)д!гаг!оп |о гасПо1аЪе1ед ргоЬея ТЬе гпейод ци)сИу Ъесаше а ша!па|ау оЕ шо1еси1аг Ъю!- о8у апд лчаа иаед |п ап е|ьеппаПу ипсЬап8ед Еогш Гог ап еппге десаде.

1.28 СБаргет 6 Р!акиидк аий ТЬе!г сгке)и!иекк !и Мо!еси!аг С!оп!пч 1п гЬе гпЫ 1970к, гагбса1 ехсепяопк го гЬе гесЬп)опе сагпе гогот гкчп й16егепг сопдпепгк. 1п 5сос1апй, Ед 5опгЬегп !1975) кЬокчед гЬаг ЬуЬг!й)хаг!оп соп1й Ье пкес1 го с1егесг крес66с кес!пепсек т согпр1ех рорп1агюпк ог РХА !та8тепгк. 1п гЬ)к тегЬод, РМА !га8тепгк Вепегагей Ьу г68екгюп кч!гЬ гекгПсдоп епгутек гчеге керагагес1 Ьу е1есггорЬогеяк гЬгопВЬ а8агоке Ве1к апд г Ьеп ггапкгеггед оп!о пбгосеИп1оке 61гегк Еог ЬуЬг!й!хаг!оп кч!гЬ крее!6с ргоЬек, 1п гЬе кате уеаг, Сгппкгеш апй Но8пекк (1975) !и Саброгша адар!ей гЬе тегЬог1 го ксгееп 1аг8е пшпЪегк оуЬасгепа! со1оп!ек гог р!аяпЫк гЬаг саггу крее!6с кес)пепсек оГ уоге!8п РМА. Васгепа1 со1ошек Вгокч— 1п8 оп гЬе кпгуасек оу пбгосе1!п1оке 61гегк кчеге !укей !и ягп, апй гЬе ге1еакей йепагпгед к!п8!екггапйей РХА кчак 6хей го гЬе 6!гег апй ЬуЪг!й!гей го гагбо1аЬе1ед ппс1ек асЫ ргоЪек, еккеп6а!1у ак декспЬед Ьу РепЬагйг (1966).

А!гЬопВЬ пппог гпос66садопк Ьаче Ьееп 1пггойпсей очег гЬе уеагк, гЬе ргогосо! ог!8!па!!у йексггЬей Ъу Сгппкге)п апд Но8пекк Ьак ргочеп го Ье гегпаг1саЫу йыгаЫе.!г гета)пк гЬе пюкг сопппоп!у пкес1 гесЬтс!пе го !йепг!гу )псбчЫпа1 Ьасгег!а1 со1ошек саггу)п8 сояпЫк ог р!аяпЫк гЬаг сопка!и РМА кеопепсек оу )пгегекг. ТЬе!акг ргогосо1к т гЬгк сЬаргег йекспЪе тегЬодк нкес1 го ггапкуег Ьассепа! со1ошек !гого р1асек го 6!гегк (Ргогосо!к 28, 29, апд 30); го ге!еаке, йепагпге, апй иптоЬ|6ге гЬе Ьассепа1 апс1 р!аяпЫ РМА (Ргогосо! 31); апй го ЬуЪг)ебхе гЬе 6хей РХА кч!гЬ гасбо1аЬе1ес1 ргоЬек апд го гесочег 6огп а такгег р!аге гЬе со1оп!ек гЬаг ЬуЬг!й!ге крее!6са11у го гЬе ргоЬе (Ргогосо! 32).

ТЬеке гесЬпк!пек аге дек!Впей го Ье окей чйгЬ ргоЬек гЬаг аге оп ачега8е 1оп8ег гЬап 100 ппс1еогЫек т 1еп8гЬ. Рог тегЬойк !ог ксгееп!пц Ъассейа1 со1ошек ъч!гЬ кЬогсег гасбо!аЬе1ей о68оппс!еог!йек, кее СЬаргег 10. Хо таяег кчЬегЬег гЬе ргоЬек аге 1оп8 ог кЬогг, гЬе гесЬпн!пек йекспЬей Ьеге апй 1п СЬаргег 10 сап Ье цкед го ксгееп тапу Ьппдгедк оугЬопкапдк оГ со1оп!ек к!тп!гапеопк1у апс1 го !йепг!гу со1оп!ек гЬаг сапу гесогпЬ)пап! р1аяпЫя ТЬе кгпюгпге ог' гЬеке р1аяпЫк !к гЬеп чепбес1 Ьу гекгпсйоп апа!уяк апд 5оыгЬегп ЬуЪгЫгхагюп оК ппшргерагагюпк оГ р1аяпЫ РХА. Еои!к Раяеигк гЬеогу о~8егтк 6 пйси)оикфсйоп.

Р)егге РасЬег, рго1екког ог' РЬук!о1о8у аг Топ!пике, 1872 Тпсгодиспоп 1.29 А (ъ(ЕЪЧ РЕА5М|0 АКК|ЧЕ5 3)ъ( ТНЕ ЕАВОКАТОКУ 1и оиг )аЬогасопеь ас )еаас, гпоге р(аъгп(да агдче Ьу гпаП сЬап Ьу йе и ос(г о( оиг ои и ЬапсЬ. АП р|ачпкЬ, ъчЬе1Ьег ьиррПед Ьу а сопсгпегс)а) чепдог ог ап асадепдс ас)ела, пюч Ье ча! Ыасед аъ яюп аь йеу епсег йе |аЬога1огу, Ье(оге (Ьеу аге иьед |п ехрепгпепп. ТЬе (оПои4пц ргоседиге, и4исЬ ргосессь Ьой ьепдегь апд гес(р(епса, яЬои!д Ье иьед по гпассег Ьоъч ъчеП (Ье ьепдегь аге |споил апд сгиб(од, по гпаиег илЬе(Ьег (Ьеу и ос(г |и йе пехс!аЬогасогу ог оп йе ойег а|де ог Псе ъчог!сЕ 1.

5епг3 а ъчппеп |ессег о(%алба ас(гпоъч!еде|пП йас сЬе р!аагп(да/ьсга(пь Ьане аггйед, |п (Ье |ессег,!Ьс сЬе гпасепа! !и йе рас)ларе иа!пП сЬе паслен оп (Ье!аЬе!я Ехр1а!и йас йе р(аагп(дййа(па аге сиггеп1- |у Ье(пр на! Ыа1ег!. 2. РЬососору апу ъчпиеп пса(ела! ьепс чдй йе р(аагп)д. ТЬе опП(па! ъчпиеп гпасепа! яЬои!г| Ье Яогед |п а !оооо(г гесогд(пП с|е(а|Ь о( йе ьЬ|ргпеп(. Вас(еПа| 51гаспа ° Вас(ела! асса!пь (е!сЬег ил(гала(огпсед ог (гала(оггпед и4сЬ а р(аъгп)д) аге иаиару пъадеЛ аъ араг яаЬ си!Плгея Тгапа(ег а 3оорбл| о( йе ЯаЬ си|сиге !п1о 3 гп| о(!крлЫ псес|впс сопСа|п!пе арргорпаСе апПЫ- одев апд апу песеааалу ьирр|епъепСя 1псиЬасе йе!крлЫ си16лге аС йе арргорпа1е Сепсрега(иге (ог 18 — 24 Ьоигь ич|й н(цогоиа яЬаЫпП.

° 'ъуЬеп йе ПсрлЫ си16лгеь Ьаче Пгоъчп, ьсгеа6 (Ьепс оп(о араг р!асеь солса!и!пе арргорпасе апПЬюдсь апд апу песеааагу ялрр)егпеп(а. !псиЬасе йе р!асеа онеги)ф1 а1 (Ье арргорпасе сепсрега1иге. ° СЬес(г сЬа1 аП со)оп)еь оп (Ье р!асса аге Ыепдса| !и арреагапсе апд (оо(г апд япеП Пбе Е. сой. 51геа6 (пд(н)диа! со)оп!еь опсо сЬе арргорпасе ье!ест!че гпед)а со чеп(у йе Пепосуре о( йе асса(п. ЕьсаЫЫз агпаП-ьса)е (3 пс|) Пс(и(д сиПлгеь (гопс Ьо!а1ед со)оп|ее. 81Ье Ьассепа |саче Ьееп сгапа(оггпед и4й а р!аьгпк1, иве -2 гп| о( йе си)сигея со ргос|исе япаП-ьса!е ргерагабопв о( р(аагп(д 0г(А.

0(цеьс ьенега! арсрюса о( сЬе 0(ъА, еасЬ чдсЬ а д(6егепс геаспсдоп епхугпе, апд апа(ухе Ьу а8агоае де( е|ессгорЬогеяя Согпраге (Ье яаеь о( йе оЬьегчед ЬапсЬ ъи(Ь (Ье яаеа ргесйс(ед (гогп гоара ргоч!дед Ьу йе ьепдег ог риЫЬЬес| !и (Ье Псегасиге. Р!аапс!д 06!А ° П а р!ачпЫ агпчеь аь а 0(ъ(А ргеслрПасе (п 704 ейапо|, гесочег йе 0)4А Ьу сепспблеасюп апд дЬ- ял!не |1 |п ТЕ (рН 8.0) а1 а сопсеп1габоп о(100 ранги). ° 018еьс венега! а|крюЬ о(йе 0г(А еасЬ чд1Ь а д(((егепс геаспсдоп епаугпе апс1 апа!ухе Ьу арагоне де! е)ессгорЬогеч|я Согпраге сЬе яаеь о( сЬе оЬвегчес3 ЬапсЬ и4(Ь 1Ье яйеь ргесПссед сгогп плара ргоис3- ес| Ьу йе аепдег ог риЫЬЬес1 |п йе Псега(иге.

° Ас (Ье ьагпе Пгпе, иве ап а! крюс о((Ье р(аагп)д 0МА со (гала(огпс ап арргорпа1е асса!и о( Е. сой. ° Еь(аЬ|ЬЬ ьгпаП-ьса(е (3 пл!) 1крпд си((игез 6опс ьенега! |пс3ерепдеп1 сгапа(оппапся 0зе -2 гп! о1 йе сЫСигеа Со ргос|исе ьгпарьса(е ргерагадопь о( р!ачпдс3 06(А. 0(Пеас ап аПциоС о(йе 0МА ъий а пиплЬег о( геяпсдоп епхугпеь апс| апа!ухе йе р год исЬ Ьу аеагоае це! е! ессгорЬ ого(я Согп раге сЬе ясен о( йе оЬзепед ЬапсЬ ъий йе а(хек ргед(с(ед його псарь ргоис|ес| Ьу (Ье ьепдег ог риЫЬЬег3 )п СЬе 81ега1иге. ° 1( йе ЯплсСиге ос йе р!ачпЫ арреагь со Ье соггесс, егоъч а!агдаса!е си! Сиге (гого опе о( йе (галя (оппапЬ.

Ргераге а Ьа1сЬ ос р|аяпЫ 034А, неп(у гЬ (депс(су Ьу ьечега! геьспссюп епдопис(еаае сППея 1юпя апг1 йоге !1 |и а|крюЫп ТЕ а1 — 20"С. ° 3( ч!аЫе си!сигеа саппос Ье еьсаЫЬЬес! 6опь сЬе гпасепа! ргоидед, ог П 1Ье Пепеск псаг(гега о( йе Ьассепа до пос ьеегп со Ье соггесс, ог П йе ьсплссиге о( йе р(аъгпк1 ьеегпь со Ье (псоггесс, соп(асс сЬе аепдега (пспсед(аСе!у, СеП(пе (Ьегп ехагду и Ьа( Ьаа Ьееп доле апс| аале (ог аиППеас(опя ° 1(, ав Ь иаиаПу сЬе саъе, ечегу1Ыпа Ь аас|а(ассогу, (оПои Псе ргососо! оп всогаее о( Ьассепа! а1ге4пь апд р(аьгп(да (п АррепсПх 8 апг| р|асе а!ксиоЬ о( сЬе!|л)и(д си!илга о( Ьассепа !п1о (опе-сеггп Когте ас — 70лС.

!ЛООС)исйОП ~О РЕО1ОСО)5 7, 2, алд 3 Ргерагабоп о1 Р!аьпис1 0МА Ьу АПса1~пе Еуыь млй 505 д ЕКАРХЕ ЕЧ5!5, !Н СОМВ!РЛАТ!Он ъч!Тн ТНе ОЕтЕКСЕнт 505, Ьая Ъееп ияес( (ог и\оге 1Ьап 20 уеагя го Ьо1ате р!аяиЫ РХА Егош Е. сой (ВппЪоип апс( Ро1у !979). Ехрояиге оу Ьас1епа1 яиярепяопя го гЬе яггоп81у ашошс с)есег8епг аг Ь!ВЬ рН орепя йе сеП тчаП, с)епагигея сЬгогпояоша1 Р)х)А апс! рготешя, апс! ге!еаяея р!аяиЫ Р)х(А шго йе яирегпагапг. А1йои8Ь 1Ье аПсаПпе яо!игюп сошр!еге1у ЕПягиргя Ьаяе ра!г!п8, йе я!Таис!я оу с!ояес( слгси1аг р1аяпЫ РХА аге ипаЫе го яерагаге Егош еасЬ ойег Ьесаияе йеу аге сори!08)саПу шгегпятпей Ая !опц ая ЕЬе лисепягу апс1 11игагюп оу ехроялге го ОН Ь по! Еоо Вгеа1, ЕЬе пчо ягапсЬ оу р1аяиЫ Р)х)А гаП опсе а8а(п ш1о ге8!ятег ячЬеп 1Ье рН Ь гетигпес! 1о пеи1га1.