Курсовая работа: Моноклональные антитела

Введение……………………………………………………………………………….4

1. 1. Поликлональные и моноклональные антитела……………………….5
      
   2. Структура и функции антител…………………………………………….6
      1.3 Образование и отбор гибридных клеток………………………………..
   3. 1.4 Идентификация гибридных клеточных линий………………………….9
   4. 2. Получение моноклональных антител с помощью Е.соli……………………11

2.1 Методика получения функциональных антител ……………………11

2.2 Технология получения …………………………………………………..11

3. Продуцент моноклональных антител Е.соli……………………………………21

4. Культивирование……………………………………………………………………22

5. Выделение моноклональных антител…………………………………………..26

Заключение……………………………………………………………………………..27

Список использованной литературы……………………………………………….28

Около ста лет назад была предпринята попытка лечения детей, больных дифтерией, с помощью неочищенной антисыворотки, полученной от лошадей, которых инфицировали Corynebacterium diphtheriae, вызывающей дифтерию у человека. С. diphtheriae инфицирует горло и миндалины, выделяя экзотоксин, приводящий к гибели клеток человека. Проникая в кровоток, этот токсин поражает органы, удалённые от места первичной инфекции, и в отсутствие лечения болезнь может иметь летальный исход. Однако если больному в течение нескольких дней после начала инфекции ввести лошадиную сыворотку, содержащую антитела к этому экзотоксину, то у него возникнет пассивный иммунитет, который позволит избежать летального исхода.

К сожалению, риск, связанный с использованием таких антител, не позволяет широко применять этот метод терапии. Дело в том, что в организме больного часто вырабатываются собственные антитела на чужеродные белки, присутствующие в антисыворотке, и её повторное введение в случае сенсибилизации организма может привести к развитию анафилактического шока и гибели пациента. Основная задача сегодня состоит в том, чтобы разработать методы получения моноклональных антител человека, обладающих как специфическим иммунотерапевтическим действием, так и пониженной иммуногенностью.

Кроме лечебных целей моноклональные антитела применяются в иммунологическом анализе, который позволяет определить очень небольшие количества вещества путём вытеснения меченого радиоактивным изотопом антигена из комплекса со специфическим антителом при добавлении всё возрастающего количества немеченого испытуемого или стандартного антигена. Также моноклональные антитела используются в иммуногистохимии для изучения распределения антигенов в срезах тканей и диагностики опухолей.

Получен целый ряд моноклональных антител, которые можно использовать для наружения различных соединений и патогенных микроорганизмов. К последним относятся:

- полипептидные гормоны: хорионический гонадотропин, гормон роста, лютеинизирующий гормон, фолликулостимулирующий гомон, тиреотропный гормон, пролактин;

- маркеры опухоли: канцероэмбрионный антиген, специфичный антиген предстательной железы, рецептор интерлейкинов, рецептор фактора роста эпидермиса;

- цитокины: интерлейкины 1-8, колониестимулирующий фактор;

- лекарственные препараты: теофиллин, гентамицин, циклоспорин;

- различные соединения: тироксин, витамин В₁₂, ферритин, продукты распада фибрина, Таu-белок;

- инфекционные заболевания: хламидиоз, герпес, краснуха, гепатит В, СПИД.