66240 (687517), страница 10

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 10)

Раствор Концентрации сульфата меди, мг/мл

1. Исходный раствор 10

2. 9см³ (1)+ 1см³ воды 9

3. 8см³ (1) + 2см³ воды 8

4. 7см³ (1) + Зсм³ воды 7

5. 6см³ (1) +4см³ воды 6

6. 5 см³ (1) + 5 см³ воды 5

7. 4см³ (1) + 6см³ воды 4

8. Зсм³(1) + 7см³ воды 3

9. 2 см³ (1) +8 см³ воды 2

10.1 см³ (1) +9см³ воды 1

Содержимое пробирок перемешивают, отбирают 2 см³ испытуемого раствоpa, добавляют 1 см³ раствора аммиака и 2 см³ воды. Пробирки встряхивают и измеряют интенсивность образовавшейся окраски на ФЭКе при выбранном светофильтре, строят калибровочную кривую. Работа по построению кривой дублируется 2...3 раза. При этом используются те же растворы сульфата меди.

Определение способности пектина связывать ионы меди. В ряд пробирок вносят испытуемые растворы в количествах:

№ п/п	CuSO4 , 4, 0 %, мл	Пектин, 0,5% , мл	Вода, мл	Оптическая плотность А	Количество связанной меди, мг
1 2 3 4 5	1	0,0 0,5 1,0 2,0 3,0	4,0 3,5 3,0 2,0 1,0

Содержимое пробирок перемешивают. Образующиеся в них oсадки отделяют фильтрованием и измеряют на ФЭКе при выбранном светофильтре оптическую плотность каждого образца фильтрата, расчет содержания меди ведут по калибровочной кривой.

Способность крахмала связывать ионы меди. В ряд пробирок вносят испытуемые растворы в количествах:

Далее поступают, как в 1 опыте. Делают графические построения.

2. 5.Хроматографическое определение бензойной и сорбиновой кислот

Метод основан на извлечении бензойной кислоты (БК) и сорбиновой кислоты (СК) из пищевых продуктов перегонкой с паром или экстракцией органическим растворителем с последующим хроматографичеким разделением их в тонком слое сорбента, элюированием (извлечением вещества вымыванием подходящим растворителем - элюентом) и измерением оптической плотности полученных элюатов.

Реактивы и материалы: Стандартные растворы: раствор 1: отвешивают 100 мг бензойной кислоты, переносят в мерную колбу на 25 см³ и доводят до метки этилацетатом (концентрация полученного раствора 4 мг/см³); раствор 2: отвешивают 40 мг сорбиновой кислоты, переносят в мерную колбу на 100 см³ и доводят до метки этилацетатом (концентрация полученного раствора 0,4 мг/см³); раствор 3: смешивают равные объемы растворов 1 и 2. Концентрация БК в полученном растворе 2,0 мг/см³, СК — 0,2 мг/см³.

Na₂SO₄ безводный. H₂SO₄, 1 М и 0,5 М растворы. 1М NaOH. Этилацетат. Система растворителей: петролейный эфир : хлороформ : диэтиловый эфир : муравьиная кислота 20,0:8,0:2,8: 1,2. Реагенты для обнаружения сорбиновой и бензойной кислот в тонком слое: растворы хлорного железа, пероксида водорода, (K₂Cr₂O₇+H₂SO₄) и 2-тиобарбитуровой кислоты. Элюент для высокожидкостной хроматографии— изооктан:диэтиловый эфир:уксусная кислота в соотношении (100:12:0,1).

Ход работы. Выделение бензойной и сорбиновой кислот. Пробу пищевого продукта (за исключением напитков) массой около 10,00 г измельчают и гомогенизируют с добавкой 25 г Na₂SO₄ и 40 см³ 1 М раствора H₂SO₄. Полученную гомогенную массу переносят в колбу вместимостью 1 л, соединенную с парообразователем, и нагревают. В момент, когда жидкость в колбе начинает закипать, закрывают парообразователь пробкой и отгоняют БК и СК с паром, собирая около 80 см³ дистиллята в приемник, содержащий 10 см³ 1 М раствора NaOH. Дистиллят переносят в делительную воронку, насыщают Na₂SO₄ (на 10 см³ дистиллята добавляют 6 г Na₂SO₄), подкисляют 1 М раствором H₂SO₄ до рН 2,0...3,0 и экстрагируют этилацетатом трижды по 10 см³. Объединенный экстракт сушат, добавляя 2 г прокаленного безводного Na₂SO₄. Этот экстракт обозначают V₁. Экстракт упаривают на роторном испарителе (допускается упаривание в фарфоровой чашке на песчаной бане) до объема 1 см³.

При анализе напитков исключают стадию отгонки, 10 см³ напитка разбавляют вдвое 0,5 М H₂SO₄, добавляя 10 г Na₂SO₄, интенсивно перемешивают и экстрагируют БК и СК 3 раза по 5 см³ этилацетатом. Объединенный экстракт V₁ сушат 1 г безводного прокаленного Na₂SO₄. Экстракт упаривают на роторном испарителе или в фарфоровой чашке до конечного объема 1 см³. Хроматографическое разделение в тонком слое. Готовят смесь растворителей, включающую петролейный эфир, хлороформ, диэтиловый эфир и муравьиную кислоту в соотношении объемов 20,0:8,0:2,8:1,2 соответственно и заливают в камеру для тонкослойной хроматографии. Пластинку «Силуфол УФ 254» размечают мягким простым карандашом, определяя на линии старта 6 зон длиной 2...3 мм для нанесения исследуемых растворов. На разметки 1, 2, 5, 6 наносят по 1, 2, 4 и 8 мкл раствора 3, при этом количество БК в них составляет 2, 4, 8 и 16 мкг, а СК — 0,2; 0,4; 0,8 и 1,6 мкг соответственно. На разметки 3 и 4 наносят 3 и 10 мкл экстракта. Нанесение проб проводят микрошприцем, калиброванным капилляром, постоянно подсушивая поддувом воздухом с помощью фена. Пластинку опускают в камеру и хроматографируют до 15 см от линии старта. Затем пластинку вынимают, подсушивают и рассматривают в УФ-свете с волной 254 нм. Наличие в хроматограмме экстракта темных пятен, совпадающих значению R_f соответствующим стандартам, свидетельствует о приcутствии этих консервантов в анализируемом образце. Пятна в экстракте сравнивают с пятнами стандартов визуально и ориентировочно оценивают содержание бензойной и сорбиновой кислот в пробе. Темные пятна в экстракте и стандартах обводят карандашом в УФ-свете. Идентификация и подтверждение наличия бензойной и сорбиновой кислот. Для обнаружения бензойной кислоты высушенную пластинку разрезают между 3 и 4 стартовыми зонами. Одну часть опрыскивают раствором хлорного железа, а затем — пероксида водорода и нагревают 2 минуты при 80...100°С в сушильном шкафу. Появление буро - фиолетовой окраски пятен на хроматограмме экстракта, по цвету и R_f соответствующих пятнам в стандарте БК, подтверждает наличие БК в пробе. Для обнаружения сорбиновой кислоты вторую часть пластинки опрыскивают раствором К₂Сг₂О₇ в H₂SO₄, подсушивают, опрыскивают раствором 2-тиобарбитуровой кислоты и нагревают 5 мин. при 100 °С в сушильном шкафу. Появление малиновой окраски пятен на хроматограмме экстракта, по цвету и R_f соответствующих пятнам и стандарте СК, подтверждает ее наличие в пробе. Количественное определение бензойной и сорбиновой кислот при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии. Экстракт, содержащий выделенные бензойную и сорбиновую кислоты, и раствор стандарта 3 поочередно вводят в жидкостный хроматограф «Милихром» с колонкой 60x2 мм, (неподвижная фаза — «Силасорб 600», 5 мкм) при следующих условиях работы: состав элюента — изооктан:диэтиловый эфир:уксусная кислота в соотношении 100:12:0,1, расход элюента 200 мкл/мин, детектирование в УФ-спектре при 254 нм, объем видимой пробы 10 мкл, скорость ленты самописца JIKC — 4300 мм/ч. Нa хроматограмме экстракта идентифицируют пики БК и СК по времени удерживания стандартов: для БК — 3,4 мин, для СК — 4,4 мин.

Для подтверждения правильности идентификации аликвоты раствора 3 и экстракта вводят в тех же условиях повторно, регистрируя в максимумах хроматографических пиков спектр поглощения БК ( 250...270 нм) и СК (230...270 нм). БК имеет три максимума поглощения в указанном интервале спектра — 268, 270 и 272 нм, а СК — один —254 нм, что является дополнительным идентификационным признаком для подтверждения присутствия их в образце.

Измеряют высоту пиков стандартов БК и СК и рассчитывают их содержание в мг/кг или мг/дм³ по формуле (до второго десятичного знака) 4

где К — коэффициент, учитывающий потери при извлечении, равный при перегонке с паром и экстракции для БК — 1,2, для СК— 1,25; Р— коэффициент БК и СК в растворе стандарта (раствор 3), мг/см³; Н₀ — высота пика БК и СК на хроматограмме экстракта, мм; Н_ст — высота пика БК и СК на хроматограмме стандартов, мм; V_t — объем экстракта, см³; М— масса продукта, взятого на анализ, г.

Относительные допустимые расхождения результатов определения зависят от содержания консерванта в пробе анализируемого образца, они не должны превышать значения, указанные в таблице:

Содержание, мг/кг	Бензойная кислота	Сорбиновая кислота
До 300 Свыше 300	20 15	20 15

За конечный результат данных испытаний принимают среднее арифметическое двух параллельных определений. Окончательный результат округляют до первого десятичного знака. Относительные допустимые расхождения результатов определениях не должны превышать 15 %.

1. Определение уротропина в пищевых продуктах

Уротропин в среде изопропилового спирта взаимодействует с изопропаноловым раствором хлороводородной кислоты. Вследствие изменения концентрации определяемого вещества в процессе титрования происходит изменение электропроводности раствора: наиболее резкое — вблизи точки эквивалентности. В качестве катода используют вращающийся медный электрод, в качестве анода — медную пластинку.

Реактивы и материалы: пищевой продукт, колба на 25 мл, изопропиловый спирт абсолютный, НС1, амперометрическая титровальная установка.

Ход работы. Пробу пищевого продукта массой 15,00 г растирают и переносят в мерную колбу на 25 мл и доводят до метки изопропанолом. В стакан для титрования пипеткой отбирают 2 мл этого раствора, 15 мл изопропилового спирта и опускают электроды. Включают катодный мотор (частота вращения катода 600—900 об/мин). Устанавливают напряжение —2,0 В и титруют уротропин 1М изопропаноловым раствором хлористоводородной кислоты, приливая его из микробюретки порциями по 0,1—0,2 мл. После каждой прилитой порции фиксируют показания гальванометра. На основании результатов титрования строят кривую зависимости: показания гальванометра — объем титранта (мл). По кривой находят объем титранта, соответствующий точке эквивалентности. Содержание уротропина в процентах: ω% = N _HCI V _HCI Э_{уротропина} V_т.э. ∙ 100/(1000V_a a).

2.7 Определение содержания фенольных соединений в рыбных копченостях

При взаимодействии с 4-аминоантипирином в слабощелочном растворе в присутствии ферроцианида (III) калия фенолы и их производные дают красную окраску.

Ход работы. В ступку помещают 55 г исследуемого продукта и растирают его с дистиллированной водой, затем переносят в круглодонную колбу на 1 л. Остатки кашицы смывают дистиллированной водой с тем расчётом, чтобы общее количество воды в колбе составило 700-750 мл. Затем в колбу добавляют 5 мл 10%-ного раствора винной кислоты и отгоняют фенолы с водяным паром при нагревании колбы на кипящей насыщенной солевой бане. Дистиллят собирают в мерную колбу на 200 мл. Из него отбирают 100 мл в коническую колбу на 250 мл, нейтрализуют МgCO₃ до рН 7,2-7,3 и жидкость отгоняют. Отгонку производят при нагревании колбы на асбестовой сетке до тех пор, пока в колбе не останется сухой остаток; дистиллят собирают в мерную колбу на 100 мл, доводят до метки водой, пипеткой отбирают 50 мл в коническую колбу на 250 мл с пришлифованной пробкой, куда приливают также 0,3 мл раствора 4-аминоантипирина и 1 мл р-ра NH₃, содержимое колбы энергично перемешивают, приливают 1 мл раствора ферроцианида калия и вновь энергично взбалтывают. Затем замеряют оптическую плотность раствора на ФЭК-2 с зелёным светофильтром (λ = 500 нм). Нулевую точку прибора определяют с помощью контрольного раствора, состоящего из 500 мл дистиллированной воды с добавлением указанных реактивов.

Калибровочный график для количественного расчёта фенольных соединений строят по гваяколу. В стандартных растворах концентрация гваякола составляет 0,001; 0,002; 0,003;…; 0,007 мг/мл.

2.8 Определение содержания нитритов и нитратов в мясных продуктах

Характеристики

Список файлов курсовой работы