11009 (684973), страница 4

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 4)

Очень важно провести тщательный количественный учёт найденных паразитов, ибо только таким образом можно оценить эпизоотологическую ситуацию и патогенное воздействие паразитов на рыб. Гельминтов и ракообразных учитывают в абсолютных величинах, а простейших принято подсчитывать в 25 полях зрения микроскопа при увеличении 7х10, 7х40 в зависимости от величины паразита и выражать в средней на одно поле зрения микроскопа.

Если количество паразитов так велико, что собрать всех не представляется возможным, то собирают часть их (например, моногеней с одной половины жаберных дуг). Собранных паразитов отмывают в чистой воде и в дальнейшем изготовляют окрашенные препараты, по которым определяют видовую принадлежность. Для каждой группы паразитов существуют специфические способы фиксации и окраски, описанные в соответствующих лабораторных работах (Методы санитарно-эпидемиологической экспертизы…, 2001).

Порядок проведения работы следующий.

1. Осмотр, внешнее обследование рыбы. Для обследования берут живую или только что уснувшую рыбу, обездвиживают ее и осматривают. Прежде всего обращают внимание на окраску, форму тела, наличие на нем повреждений, опухолей, черных пятен, язв, белого налета на коже и жабрах, а также крупных паразитов – рачков, пиявок и др. После внешнего осмотра делают скальпелем соскоб с поверхности тела. Собранную слизь помещают в каплю воды на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и рассматривают сначала под малым, а затем под большим увеличением микроскопа. Здесь могут быть обнаружены простейшие: хилодонеллы, ихтиофтириусы, апиозомы, триходины, миксоспоридии, моногенеи. После взятия соскоба рыбу следует быстро (чтобы не слишком подсушить) взвесить и измерить. Обычно определяют длину тела рыбы от переднего конца головы до конца чешуйчатого покрова, т.е. промысловую длину (l) и до конца хвостового плавника, т.е. зоологическую длину (L). Позднее, пользуясь этими данными определяют темп роста и коэффициент упитанности по формуле

K=P*100/l^3,

где K – коэффициент упитанности, Р – масса рыбы, г; l – длина тела до конца чешуйчатого покрова, см.

2. Вскрытие полости тела и обследование внутренних органов. Вскрытие делают очень осторожно, чтобы не повредить внутренних органов.

Рыбу вскрывают на лабораторном стекле. При внимательном осмотре полости тела и внутренних органов могут быть обнаружены свободно лежащие или в капсулах личинки цестод, нематод, скребней, видимые невооруженным глазом.

Затем извлекают внутренние органы, осматривают плавательный пузырь, сердце и сердечную полость. Далее отпрепаровывают комплекс органов пищеварительной системы. Исследуют пищеварительный тракт, отыскивая личинок в капсулах на его поверхности или просвечивающих через серозные покровы (Diphyllobothrium dendriticum, Diphyllobothrium latum, Dioctophyme renale, Eustrongylides exicisus, Corynosoma strumosum, Corynosoma semerse, Bolbosoma caenoforme, личинки сем. Anisakidae).

Специальные методы исследования на выявление возбуделей вертежа (Myxosoma cerebralis), Ceratomyxa Shasta и возбудитель пролиферативной болезни почек (PKD) выбираются в зависимости от целей паразитологического контроля (вида паразита) (Мусселиус и др., 1983).

Количественные показатели паразитарной инвазии вычисляются следующим образом:

1. экстенсивность инвазии – доля зараженных рыб в выборке (%);

2. интенсивность – количество паразитов в одной зараженной рыбе (экз.);

3. средняя интенсивность инвазии – среднее число особей паразита на одну зараженную рыбу в выборке;

4. доверительный интервал – амплитуда возможных значений фактической зараженности рыбы паразитами в популяции вида рыб в зависимости от объёма исследованной выборки (%, д.и.);

5. пределы интенсивности – величина минимальной и максимальной интенсивности среди зараженных рыб в выборке (экз.);

индекс обилия – среднее число паразитов на каждую обследованную рыбу в выборке (Уильямсон, 1975).Глава 3. Результаты собственных исследований и их обсуждение

При паразитологическом обследовании молоди рыб из р. Большая проводили анализ паразитофауны кеты, нерки, кижуча, горбуши, гольца, чавычи.

Все найденные паразиты относятся к типичной фауне молоди лососей в пресноводный период жизни. Скатившись в море, лосось утрачивает почти всех своих пресноводных паразитов (Бауэр и др., 1977).

По итогам проведенных исследований было определено 17 видов паразитических организмов, в основном это были паразиты наружных покровов (эктопаразиты). Их выделили девять видов: простейшие Ichtiobodo necator, Apiosoma conicum, Trichodina truttae и T.nigra, Epistilis sp., Chilodonella piscicola, Cryptobia branchialis, моногенеи Tetraonchus alaskensis, Gyrodactilus birmani. К эндопаразитам, кроме одного вида простейших Myxobolus arcticus, относятся три вида нематод Sterliadochona ephemeridarum, Philonema oncorynchi, Contracaecum sp., два вида цестод Cyathocephalus truncatus, Eubothrium salvelini, одна трематода Crepidostomum farionis и скребень Neochinorhynchus rutili.

Всего было выявлено 8 видов простейших паразитов, только один из которых относится к эндопаразитам Myxobolus arcticus.

Эктопаразит Trichodina truttae встречается во всех проведенных выборках, у гольцов был самый высокий показатель из обследованных рыб 40.0% (д.и. 13.0–70.9%). Причиной этого, скорее всего, является более продолжительный период, проведенный гольцами в пресной воде. Среди тихоокеанских лососей самый высокий показатель экстенсивности у молоди чавычи в 2003 г. – 33.3% (д.и. 17.6 – 51.3%), самый низкий – у сеголеток горбуши – 3.33%(0.0–12.8%).

Паразитами, часто встречающимися у обследованных мальков, оказались Trichodina truttae, которая определена у всех шести видов и Ichtiobodo necator у трех (кижуча, горбуши и кеты). Экстенсивность заражения Ichtiobodo necator незначительная по двум годам и составляет от 3.33% (д.и. 0.0–12.8%) до максимальной у сеголеток кижуча в 2003 г. 6.67% (д.и. 0.0 – 24.6%). Другой вид триходин T. nigra был обнаружен у трех видов: у нерки и чавычи в 2004 г., у кижуча в 2003, 2004 гг. При этом самый высокий показатель экстенсивности стоит отметить у кижуча 40.0% (д.и. 23.2–58.2%).

Поражение инфузорией Epistylis sp. отмечалось незначительное – всего 3.33% (д.и. 0.0 – 12.8%) и обнаружено у сеголеток кижуча и чавычи. Другая инфузория Chilodonella piscicola была выявлена у сеголеток чавычи с низким показателем экстенсивности – всего 6.67% (д.и. 0.6–18.4%), такая же экстенсивность была у Cryptobia branchialis (6.67% (д.и. 0.0–24.6%)).

Myxobolus arcticus, поражающий мозг рыбы, является только тканевым паразитом и поражает только молодь до окостенения тканей черепа. Миксоспоридия M. arcticus была обнаружена только у двух видов, а именно чавычи и нерки в 2004 г. Стоит отметить низкий показатель экстенсивности: от 9.09% (д.и. 0.9–24.6%) до10.53% (д.и. 1.0–28.2%).

Обилием простейших паразитов в окружающей среде можно объяснить попадание их на оболочку икры в водоеме, а затем заражение мальков.

Среди обнаруженных паразитов пять видов (C.branchialis, C.piscicola, I.necator, T.truttae и A.conicum) относятся к группе патогенных и могут вызывать паразитозы. Для молоди они опасны тем, что разрушают поверхностный слой эпителия и вызывают кожную и жаберную эпителиальную гиперплазию, а у тяжело инвазированных рыб деструкцию клеток и сильное слизеотделение. Вследствие этого происходит нарушение жаберного и кожного дыхания (Бауер, 1963; Банина, Чернышова, 1977; Карманова, 1998). Эти виды простейших паразитов могут проникать на рыбоводные заводы с водой, поступающей из водоемов, и при искусственном выращивания лососей способны увеличивать свою численность и становиться причиной энзоотий (Бауер, 1987). Присутствие простейших паразитов на заводах может быть связанно с заносом их от производителей, особенно в отсутствие антипаразитарной обработки рыб, используемых для оплодотворения. Проникновение паразитов на заводы может происходить и тогда, когда набухание икры после оплодотворения проводится непосредственно в речной или озерной воде, причем, в диапазоне температуры воды, содержащим оптимальную для жизнедеятельности и развития простейших.

Так, в 2000 г., когда проводилось искусственное оплодотворение икры, отмечена температура воды в местах ее набухания – от 5,2 до 7˚С (данные по заводам), а оптимальная температура для размножения данного паразита в водоемах Камчатки 5–6,5˚С (Линева, 2000). В воде паразиты попадают на наружную оболочку икры, имея возможность паразитировать на ней. При снижении температуры образуют покоящиеся цисты, а при повышении восстанавливают свою жизнедеятельность и нападают на личинок и мальков.

С целью предупреждения заноса возбудителя болезни в прудовых хозяйствах на водоподающих каналах устанавливают сорорыбоуловители из металлической сетки, предохраняющие от захода сорной и дикой рыбы.

Практическое значение проведенных исследований состоит в том, чтобы изучить видовой состав паразитов молоди в естественных водоемах, условия заражения инвазионными болезнями. Получив такого рода информацию, на ЛРЗ разрабатываются меры профилактики, для предотвращения распространения паразитозов в искусственных условиях и массовой гибели молоди или привести к снижению устойчивости организма при скате в море.

В основном видовой состав паразитов представлен эктопаразитами, а именно простейшими и моногенеями, Заслуживает внимания довольно высокая экстенсивность Apiosoma conicum, которая варьирует от 6.67% (д.и. 0.6–18.4%) у нерки в 2003 г. до 90.0% (д.и. 64.5–100.0%) у годовиков гольца.

Большинство возбудителей болезней лососевых рыб, являясь постоянными составляющими биоценоза водоема, могут служить индикаторами его экологического состояния. На неблагополучие водоема может указывать появление у рыб неспецифических видов патогенных организмов; на токсичность воды в водоеме – отсутствие у рыб паразитов или появление у последних уродств. Анализ полученных данных должен основываться на определении основных количественных показателей заражённости рыб паразитами.

У лососевых рыб среди паразитарных агентов индикаторами являются: простейшие паразиты родов Apiosoma, Trichodina, Epistylis, моногенеи рода Gyrodactylus. Следует обращать внимание на рост их численности, аномальную локализацию, появление видов паразитов, несвойственных для определённого вида хозяина. На неблагополучие водоема может так же указывать появление у рыб атипичных спор миксоспоридий; их количество увеличивается под влиянием промышленных стоков (Ивашевский, 1998).

Все виды простейших были обнаружены с невысокой экстенсивностью у шести видов рыб, что говорит о более или менее благоприятной экологической обстановке в водоеме. Но настораживает то, что при таких показателях заражения на общем фоне выделяется A.conicum с экстенсивностью до 90% в 2003 г., хотя сравнивая оба года можно говорить, что показатели зараженности кардинально не менялись. Возможно, этот период времени оказался наиболее благоприятным для увеличения численности апиосом из-за влияния каких-либо антропогенных факторов.

Присутствие обнаруженных паразитов не оказало большого влияния на их здоровье в естественном водоеме, однако, выявленные простейшие способны осложнить процесс адаптации рыб к новой среде обитания при миграции к морю (Urawa, 1993). При небольшой степени заражения Т.truttae, T.nigra, I.necator не приносят молоди лосося особого вреда. Эти виды являются обычными для паразитофауны лососевых в р. Большая. При высоких показателях заражения рыбы теряют в весе и погибают.

Во всех выборках было обнаружено два вида моногеней: Gyrodactylus birmani и Tetraonchus alaskensis. Первый вид был выявлен только у сеголеток и двухлеток чавычи с экстенсивностью 16.7% (д.и. 6.6–32.2%) в 2003 г. и 5.26%(д.и. 0.0–19.8%). Индекс обилия составил в первом случае 0.17, во втором – 0.05. Второй вид встретился у трех видов лососей: сеголеток кижуча, кеты в 2004 г., а также у сеголеток и двухлеток чавычи в 2003–2004 гг. Во всех случаях экстенсивность составляла около 10%, только у сеголеток кеты – самый низкий показатель 3.33%(0.0–12.8%). Таким образом, невысокая зараженность моногенеями говорит о стабильной экологической ситуации. Возможный путь заражения молоди скорее всего от рыбы к рыбе, потому что жизненный цикл паразитов проходит без промежуточных хозяев. Большую роль при распространении заражения играют большая плотность молоди в водоеме, а также низкая упитанность, что снижает сопротивляемость организма. Выявленные виды не являются особо патогенными для рыб, оказывают негативное влияние только при высокой степени заражения.

Все указанные эктопаразиты заражают рыб в основном за счет своих свободноплавающих форм. Заражение же эндопаразитами происходит либо при употреблении в пищу промежуточных хозяев – в случае с гельминтами, либо с помощью трансмиссивного хозяина – в случае с миксоспроридиями. Раньше считалось, что заражение миксоспоридиями происходит в процессе пассивного заглатывания спор при питании рыб у дна, но в последние годы многие ученые оспаривают эту точку зрения. По крайней мере, уже для некоторых видов слизистых споровиков, поражающих лососевых рыб, установлено, что в их передаче участвуют олигохеты (Bartholomew et al., 1992; Kent et al., 1993b).

Наиболее широкий видовой и количественный состав паразитов отмечали у двухлеток чавычи и нерки. Это объясняется особенностями питания, при котором заражение паразитами происходит через промежуточных хозяев.

В связи со сменой кормовых объектов у годовиков и рыб более старших возрастов по численности начинают преобладать виды паразитов со сложным жизненным циклом, таких как некоторые цестоды, трематоды, нематоды и один вид скребней.

При обследовании нерки была выявлена закономерность в увеличении видовых и количественных показателей заражения с возрастом рыб. У сеголеток нерки обнаружены только триходина и апиосома с экстенсивностью не более 10.0%, у двухлеток видовой состав паразитофауны расширяется до шести видов. К простейшим добавляются M. arcticus 9.09%(д.и. 0.9–24.6%), T.nigra 18.18%(д.и. 5.3–37.0%), также обнаружены цестода E.salvelini и скребень.

Во втором случае на примере сеголеток и двухлеток чавычи можно проследить такую же закономерность возрастания количества видов паразитов при увеличении возраста. На первом году жизни сеголетки заражаются в основном эктопаразитами. Здесь их 6 видов: простейшие Epistilis sp., A.conicum, Ch.piscicola, T.truttae с экстенсивностью от 3.3%(д.и. 0.0 – 12.8%) у первого вида до 33.3%(д.и. 17.6–51.3%) у последнего. У чавычи старшей возрастной группы уже обнаруживается 10 видов, 4 из которых со сложным циклом развития.

Из 6 обследованных видов рыб нематода Sterliadochona ephemeridarum встретилась у четырех: двухлеток чавычи, годовиков гольца, сеголеток кижуча в 2003 г., кеты в 2004 г. Вероятно, заражение происходит при поедании мальками личинок и куколок насекомых сем. Ephemeridae. Невысокая экстенсивность заражения от 6.67% (д.и. 0.6–18.4%) у кеты до 20.0% (д.и. 4.2–43.7%) у кижуча говорит о непродолжительном периоде питания этими насекомыми и некоторой резистентности мальков. Общность в составе паразитов у молоди тихоокеанских и гольцов определяется сходством питания отдельными представителями планктона и бентоса.

Цестода Cyathocephalus truncatus была обнаружена только у двухлеток чавычи с экстенсивностью 5.26% (д.и. 0.0–19.8%). Промежуточным хозяином этого паразита является ракообразное Gammarus lacustris (Wisniewski, 1933).

Характеристики

Список файлов ВКР