Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 4
Текст из файла (страница 4)
1.153, Ехсегрс 6ош "Раскопа! КесоПессюкь оГ Еуаогуше апс( Непип8" сп Еушгуте (ей Оааетшасс Е.р., Сап6еЫ К Р. апс1 ВеусЬо1с 5.), рр. хш-хчш', соруп8Ьс Ос!974 ЬуАсаг(етитс Ргекя герппсес1 Ьу ретш!ааюп оГйе риЫьЬес р. 6.2, "СеП (3ЫЛ" Йош №сч 5е!есгеП Роевк Ьу Ееа Мипау (1998 Ети((у апт( 5пеПВгоче, Р.О. Вох 177, Рось Рошс ЫЯ~ 1335, Асьсга1са) ь кертис(исес( тчЬЬ реппьяоп оГ йе аийог апс( йе риЫьЬес р.
8.2, Ехсегрс (тоти К1ерре ес а1. (й Мо!. Вто!. 56: 341 (1971!) ь герппсей тч!сЬ регпиаяоп, Ьотп Аеас(апис Ргея ай, Ьопс)оп, 1.тК, р. 8 3, Ехсетрс Гготп Ми1рь К В. (5ст. Аш. 262т 56 ! 1990] ) ь герт!псес( Ьу реппьяоп оГ Каку В. МиПгя соруп8Ы ©1990. ЛП пВЬЬ кеаегчей р. 8.106, Ехсегрс 6опт Сеогуе Ветап! Вйаис Мап оГ сйе Сепсису, р. 839, Ьу Атей(йа1с( 11епт(егаоп (1956 АРР1есоп-Сепсигу-Сгойя Ыетч Ъот(с). р. 9.2, Ехсетрс Гтош Тйе Сигу Арет Иугтпетс йу а Всо!оВВс Гог йе Уоиие Ьу А1Ьегс 5гепс-буок8у! (1970 РЬт!оюрЫса1 Ес(скаку, Ыесч Уок1с.) р. 10.10, Ехсегрс Ьотп 1псгос1исПоп, 1974, со йе РкепсЬ ейсюп оГ Стаей Ьу !.С. ВаПаЫ (1973 Со!шпЬса). р. 11.36, Ехсегрс Гтош Тйе В1ас(с С!оиг) Ос!957, 1958, гепесчес( 1985, 1986 Ьу Ргес( Ноу1е (Ьу реппьяоп оГ 11агрекСоПша РиЫьйега 1пс.).
р. 12.2, Ехсетрс Ггопс Игйат МаВ Рикки(т: А Рявопа! Сг(етч оГ5с(епк(Рс () всочегу ©1988 Ьу Ргапсь Ст(с)с (Ваяс Воо1ся Ьу реппьяоп оГ Регаеиа Воо)са Огоир), р. 12.93, Ехсегрс Ггопт "ТЬе МагЬш.8 Яасеь" сп 5НГР РЕ)гЕВт А СоПесПоп оГ 56огс 5сот(еа Ьу Лпс(теа Ваггеп (1996 Чт.Чг. Ыогсоп Ес Со., 1пс., Ыесч Ъог)с), тьес1 Ьу регпигьюп оГ сЬе риЫьЬег. р. 13.10, Ехсетрс Ггопс Тйе Еокг И'ог!с(к оГ2001 Ьу АгсЬиг С. С1аг)се, иаес( Ьу репшаяоп о( 5сокА! СЬ(са)с ба!еп Ысекату АПепсу. р.
1428 Ехсекрс 6ош Тйе 1 ип8иа8е оГ беиек Ьу 5сече !оссеа (1995 (3оиЫедау !1)5); НакрегСоПтпа (ЕсК) ), иаес( Ьу реппВяоп оГ сЬе аисЬог ассс( сЬе риЫьЬег. р. 15.13, Ехсетрс Ггош Нйкогу оГ Яекгеги Рй(!окорйу, р. 512, Ьу Вепгапс1 КияеП (1979 АПеп апт) Ошч(п, Еопт)осс). р.
16.6, ЕхсетрС 6огп "ТЬе ВеЬачют о( йе Наи4пчеес(а" ш ВН)Р РЕЪ'ЕКт А СоПес6оо о( 5Ьотт 5Сопеа Ьу Апс)геа Ваггеп (1996 ЧГЧт. Ыогтоп Ес Со., 1пс., Ыесч Уог)с), иаес( Ьч регпиаяоп оГ йе риЫВЬег, р. 17.3, Ггогп Еа 5стеисе ет !Ъурокйеке Ьу Непп' Рошсак (1902 Иапипапоп, 26 ше Касспе 75006 Рат!а Ркапсе). р. 18.5, Ркош Решгек (1660) Ьу В!аье 1'асса!. Ве)оге тит(ех' Ехсегрс 6огп юЕ(П1е Ст(с)6(сс8" сп РО1Л( ( П 1АКТЕТ5, соруп8Ы 1942 Ьу Т.5. Е)юс апс( тепесчес( 1970 Ьу Папке Сга!ет!е Е1ют, герппсес( Ьу регпияюп оГ Нашоигс, !пс.
Еис( оГ сиВехт "Чтйесс 1 Еоо1с ас йе РППЬс оГ йе 1.еачеа," 6опс ТНЕ 5Е1.ЕСТЕР РОЕМ5 ОР МАК1ХА Т5'тгЕТАЕСгА Ьу Маппа Тачесаеча, !капа!асес( Ьу Иаше Ре!пасе!сс, спрут!8Ьс Ос!971, 1981 Ьу Иаше Ре!стасе!п. Екает( Ьу репи ьяоп оГ !Эиссотс, а сПч(яосс оГ Реп8шп Риспапс 1пс. Ешг ра8.т Ехсегрс 6отп "Еая Со1сет'* тп РОУК ОЕтАКТЕТ5, соруп8Ы Ос!940 Ьу '1В. Е!юс апд гессесчес( 1968 Ьу Еяпе Сга!ет(е Е1юс, герт(псес( Ьу реппьяоп оГ Нагсоигс, 1пс. СЬар1ег 15 !!ЧТКООЕ!Ст!О!х! РКОТОСОЕ5 1 Ехргеаа!оп о1 С!опес! Сепеа !и Е. соВ ЕГа!пц !РТС-!пг!ис!Ые Ргогпо1ега 15.14 2 Ехргеаь!оп о1С!опес! Сепеа !и Е.
со0 1!япВ 1Ье Васгег!орЬаце Т7 Ргогпогег 3 Ехргееаюп о1С!опег! Сепеа !п Е. соВ Оа!па 1Ье Вас1ег!орЬаце Х р, Ргогпогег 15.25 4 Ехргеаа!оп оЕ 5есге1ег! Роге!Вп Ргоге!пь С Впц 1Ье А!Еа!!пе РЬоьрЬа1аае Ргогпа1ег ! 5.30 (рЬоА! апг! 5!апа! 5ег!вепсе ° Аг!йг!опа! Ргогосо!: 50Ьсе80!аг Еоса!!лаВоп о1 РЬоА Еоа!оп Рго1е!па 15.35 5 РопВсагюп о1 Еоа!оп Рго1е!па Ьу АЬВп!1у СЬгогпа1оВгарЬу оп С!и1а1Ь!опе Ацагоае 15.36 6 Рипйса1юп о1 Ма!1оае-Ыпйпц Еиа!оп Рго1е!па Ьу АЕВпру СЬгогпагоцгарЬу оп 15.40 Агпу!оье Кеа!п 7 Рог!Всаг!оп о1Н!а1!г!!пе-1ацВег! Рго1е!пя Ьу !пппоЬ|!!аег! Ы!2 АЬяогрВоп СЬ гогпагоцгарЬу ° А!1егпаг!хе Рго1осоЬ Е!00оп о1 Ро!уЬ!ьг!г!!пе-1аВеег! Рго1е!иь Тгогп Ме1а! АЕВп!1у 15.47 Со!испив Е!а!ие Оесгеаа!пе рН ° АгЫ!1юпа! Рго1осоЬ Кедепегаг!оп о1 ЫТА-Ы!2 -АВагоье 1 5.48 8 Рог!1!са1!оп о1 Ехргеааег! Рго1е!пя 1гогп !пс!иь!оп Войеа 15.49 ° Аг!В!1!оиа! Рго1осоЬ Ке1о!йпц 5о!иЬ|!!аег! Рго1е!пь Кесо~гегег! Вогп !пс!иа!оп 15.53 Войея 15.20 1 5.44 !!х!ГОЙМАТ!ОЬ! РАЬ!ЕЕ5 Ехргеаа|оп о1 С!опег! Сепеа Е, соВ Ехргеьа!оп 5уьгегиа Еасоф Гыа!опь 15.55 15.56 15.57 СЬао1гор!с Ацепга ! 5.60 Ехргеяяоп от С~опед Сепев !и ЕясттепсЬа сой !5.2 СЬартег 15т Ехртекк|оп о~С!опет! Сепек т ЕксЬеттсЬ!а со|т вслокт от тнв члкт тоно от кноччтвоов лвоот |т5 овнвт|с5, Ь!осЬегп!к!ту, апс| пю1еси!аг Ь!о1оПу, ЕксЬег|сйта соП ь йе куктеш оЕ Пгкт сЬо|се Еог ехргекк!оп оГ тпапу Ьесего1овоик рготе!пк: бенет!с тпап!ри1атюпк аге ктга|ПЬ|Гоччагс|, си1|игек оГ Е.
со1г аге еая!у ап6 |пехрепяче!у Пточчп, апд шапу Гоге|Пи рготетпк аге чтеП-то1егатет| апт| шау Ье ехргеккет| ат Ь|ПЫече1к. Етит!п5 тЬе рак! 20 уеагк, кечега1 Ьипс|геб гесошЬтпапт рготетпк Ьаче Ьееп ехргеккед тп Е. соП па|пав опе ог апойег оЕ йе честог куктешк т|експЬес! ш тЬ|к сЬартег. Нотчечег, Е, сой ь пот а!тчаук йе Ьокт оГ сЬо!се. рог ехашр1е, рготетпк кчЬоке Гий Ь|о!оП|са! аст|ч|ту гесрпгек рокигапк!атюпа! шосййса6оп !е.д., 51усоку1ат|оп ог с1еачаце ат крее!Пс ятек) шау Ьект Ъе ехргеккет! |п а еи)сагуот!с Ьокт.
1| ь |ЬегеГоге ппрогтапт Ье|оге ешЬаг)с!пд оп ап ехргеккюп рго)ест то аккекк тЬе йпа1 Поа! апс| то детегпипе тчЬ|сЬ Ьокт-честог куктегп птау Ье шок! арргорпасе. ТЬеке куктепь аге геч|еъче6 тп йе тпЕоппа6оп рапе1 оп ЕХРРЕ55!ОН ОГ СЕОв!ЕО ОЕ!к!Е5 ат йе епд оГ йь сЬартег. СНООЫМС АМ ЕХРКЕЫ!ОМ Я'ЬТЕМ Растогк тЬат тттйиепсе тЬе сЬотсе оГ а куктеш Еог ехргекяоп оЕ а рагттси!аг рготеш ш Е, соП аге Пктес| Ъе!отч. ° ТЬе к|хе оГтйе рготет. 5шаП сусокойс ргосе|пк апс) ро!урерт|т|ек | < ! 00 тек!с|иек |п !епдтЬ) аге Ьек! ехргеккед !п Е, соП ак Еияоп ртосе!пк сотпроке6 оЕ сагпег кет!иепсек Пи|сед Ьу а ктапс|агс| рерт|де Ьопт| то йе тагцет ргосеш |р1еаке кее кес6оп оп ртьюп ртоте!пк, р. ! 5.4). ТЬе сагпег ойеп яаЬт1тхек йе рготе|п оГ |птегект а5а|пкт иигасейи1аг Йецгат!а!|оп апс1 ргоч|т|ек а 1фапс)- Ь|пт|!пи яте тЬат сап Ъе чье Гог айтппу рипйсатюп.
ТЬе сагПет рготе!и шау Ггециепт1у Ье гесочетес1 !п ап асти е Еопп Ьу |пс1исйп5 а рготео!уттс с1еачаце кпе ат ап арргорпасе!осабоп тп тЬе Гияоп рготе!и. Сутоко!тс ргосе!пк > !00 гек|с|иек |п !еп5тЬ аге йе пюкт ргоЫешабс рготешк то ехргекк ш ейЬег куяеш. 1п Е. со|6 тЬеке рготетпк аге ойеп ипктаЫе ог Гопп иьо1иЪ|е шс|икюп Ьот||ек.
1п гпапипа1тап сейк, ртоЫегпк сап агье тп т|!к6п5и!кЫпц |Ье Гоге!цп рготетп Еготп йк епбоцепоик Ьошо1оя. ° ТЬе атоипт оЕ рготет пеейет|. |Г оп1у япаП т)иапт!т|ек оГ тЬе татре! ргосеш аге тес)и|гед— Еог ехатпр1е, реп ксгееп!п5 а кепек оГ яте-т|!гессес| тпитапь Еог епгушат!с ас6тйту — йеге ь 1ти1е рошт тп !ту|од то ортипгхе ргос1ис6оп. Мокс оЕ тЬе ктапс1агс| ехртекяоп р1аятпбк сап Ье икеда киссеккуиПу тТ тЬе епхуше сап Ье аккауес) |п стиг)е ехтгась оЕ Е.
со!т'. Ноччечег, тТ рипйса6оп оГ ап асбче рготеш |к песеьагу апс|т'ог |Е |Ье рготе!и ь тес!и|тес| !п 1ат5е т|иапт|т!ек, й ь икиайу песеккагу то ехр1оге кечега! ПтТГегепт Ьокт-честог куктепь апс! рипйсабоп ксЬешек ЪеГоге Етпб!пц опе тЬат |к тчот)саЫе оп а 1агПе кса!е. ° т4г|тет|тет асттче рготет ь гет|шгегЕ.
1Е йе ригроке оЕ ехргекк!пц йе гаг5ет рготетп ь яшр|у то оЪта!и тпатепа1 Еог та|к!п5 апт|Ьо6!ек, йеге ь по ротпт тп !ту|од со оЬсатп ас6че рготеш. |пктеас1, ехргеккюп куктепь сап Ье тьес1 тЬат Еасййате рипйса6оп оГ йе тагвет рготеш, !ггекреспче оЕ ть ктате оЕ Ью1о5|са! асбтйту ог Пепатигат|оп. Неге, йе Еоппаттоп оГ шс!тьюп Ъосйек ь а цгеас ас|чаптаце Еог !ко1ат|пц !пко1иЫе ргосе!и, ак ате тау йат сап Ье сье6 т|ит!пц аГГтп|ту рипйса6оп оГ |Ье тагес ргосе|п. 1Г йе татре! рготе|п !к то Ье чье ш ЬюсЬеписа! ог сеП Ыо1о5|са! ктис||ек, йеп ша|пса|п|пц ог гектоппц рготеш Еипс6оп ь ипрогтапт ап6 еаке оЕ рипйсатюп гпаиеь 1екя 1п ютпе сакек, сйгесс ехргекяоп честогк шау Ье икед то ргот!исе ко!иЫе, ас6че рготетпк.
1п гпокт сакек, Ьоччечег, тЬе ехргекке6 ргосе|п илП Ъе !пко1иЫе апт| пшя Ье рипйе6 |тою тпс!ияоп Ьоб|ек, ко|- иЬт!гхе6, апс| теГо!т|ес1 |пто ап ас6че Еогш. !игтот(исгтоп 15.3 'тЧЬеп йе ехргеааес) ргогеш !а со Ье пхес) !п аттис!ига! зтпсдея 6 !х Ьезг со ехргеаа тЬе гагдет аа а ао1иЫе рготе!п.
!1 шау Ъе песехаагу то сект ехргеааюп (и аенега! ЙГГетепс ьтга(пк оЕ Е. со6 го еьгаЫгаЬ сопс66опь йат ппп(гп!те ппзЕо1сдпд (и ч(чо, апс1 со га1се дгеат саге то ппп(- пике с(епагигабоп тп чдго 1о ша!пга!и йе ргорег соп6дпгапоп оЕ1Ье ргогетп (р!еаье атее 1Ье рапе1 оп А001Т1ОГ1АЕ РКОТОСОО КЕГОЕ0! 9С 5ОШВ1с12Е0 РКОТЕВ95 КЕСОЧЕКЕ0 ГКОМ 161СШ51О!9 ВО01Е5 ш Рготосо! 8).
СНОО$!МС А Р!сОМОТЕ!с АМ0 ЧЕСТО!х ЬгйТЕМ ТЬе Го11онлпд саседопех оЕ ехргеааюп нес!ого Ъаьед оп йе гуре оЕ ртопюгег, аге с(екает!Ьед 1и с(еса(1 !и йе Гтгкт кет)ех оГ рготосо!а (и 1Ьга сЬартег (р!еаье а!хо атее 1Ье !п(оппапоп раие1 оп Е. СОЕ1 ЕХРКЕ551ОМ 5Ч5ТЕМ5). Ехрге55!оп Чес(ог5 СопГа!п!пк ап !РТС-!пг!ис!Ые РгогпоГег (РгоЕосо! 1) денега! с66егепс чессогв Ъаьес( оп йе 1ас орегоп аге иаес) Еог ЫдЬ-!ене! ехргекяоп оЕ Гоге!дп рго- гетп5 ти и, сОП, тпсЬН1тид: ° Тйе тгр-1ас (гас) ргоитогет.
гас (х а ЬуЪг(т( гтр-!ас ргопюгег соп1аш(пд гЬе -35 гед(ои оЕ йе т р ргогпотег наес( го 1Ье — 10 гед!оп оЕ тЬе (ас()Ч5 ргоптотет; Ь !а геди1атес1 Ъу 1Ье !ас гергея аог апт( !х !пс!ерепт(епг оГ сАМР геди1агюп шесбасес1 Ъу йе стр депе ртос1исг (Агпапп ег а!. 1983; с1е Воет ег а!.
1983). А пхеЕи! гас ргошогет ехргекяоп р!аяп(с( (РКК223-3 (Вгоь!иь апс1 Но!у 1984)) !а ача!1аЫе боги РЬатшас!а. ° ТЬе тгр-1ас (тгс) ргототет. ос (а аиогЬег чегяоп оГ йе!ас гергеяог-геди!атес( ЬуЬг(с) ттр-1ас ргогпогег сои!а!п!пд йе — 35 тед(оп оГ йе гтр ргопюгег Еиает( то 1Ье -10 гед)оп оЕ йе !ас(Л'5 ргогпотет (Ашапп апс( Вгояпа 1985).
ТЬе оп1у ЙЕГегепсе Ъеинееп йе ттс апс( гас рготпотегх ь йе с(!згапсе ьерагаппд 1Ье -35 апс1 — 10 гед!опз оЕ йе ргопюгег. 1п тЬе гтс ргоптосег, 1Ьехе ттчо е1ешеитк аге ьерагагет( Ьу а сопьепхиа т))агапсе (17 Ьр), тчЬегеаь !и йе гас ргоптосег, йеу аге ьерагатед Ьу 16 Ьр. ТЬта сдйегепсе Ьаь 1!111е ог по еЕГес1 оп йе ехргеаяоп 1ече!а оЕ Гогетдп ргоге)па (Ашапп апд Вгояпа 1985). ТЬе ехргеаяоп р1аяп!с( РТтс 99А, ача!1аЫе Егош РЬатшас)а, саспенс йе ттс рготпо1ег.
° ТЬе 1ас рготиотет. Апу депега1-рпгроае честит (р()С, РТт., рдК, РВ1иеьст)рт, РОЕМ, егс.) с(еядиес( Гог Ыпе/тнЫге асгеешпд Еог с!опек сопгатптпд (пхегга оЕ Гогетдп РГ(А сап Ъе ивет( го ехргеаа а Гоге(дп рготе!п, ихиа11у аь а Гияоп ргосетп нч(й апппо ас!т)ь епсос)ес( Ьу 1Ье аиппо гетш!пиа оЕ1Ье 1асх. депе апт()ог 1Ье ро1у1(п)сет вес)иепсе (Еог Ецгйег с(еса!!я р!еаке хее 1Ье !иЕотшабои рапе1 оп !АСЬ Г13510195). А!йоидЬ йе !ас ргопютег )а пот аа ьтгопд ах 1Ье 1ас ог пс ргошосегя йе Ь)дЬ сору пшпЪег оГ пюьт депега!-рптроае честотх а!!она ехргеьяоп оЕ Еогетдп ргоСе(пь аг гезресгаЫе 1ече1я Махипшп !пс(пспоп оЕ йе 1ас рготпотег гет!шгех йе асгюп оГ йе сАМР аспчагог ргосе!п (САР, 1Ье стр депе ргос)пес), тчЬ(сЬ !а гпоя ас6че тчЬеп се!(а аге дгончп ш гпеспшп 1ас)опд д!психе, Мес!)а 1Ьат сопсаш 8!психе аь а сагЬоп хоигсе ГЬои1с) пот Ъе ихет( го ехргеаа депех с1опет( (пго йене честогя Ехрге55!оп Чес(ог5 СопЕатп1пк йе ВасГег1ор!!аде Т7 РгогпоЕег (Рго(осо! 2) ТЬе РЕТ ьепеь оЕ несгогя от(д!па!!у с1ече1орес1 Ьу 51пт)!ег ет а!.