Диссертация (1154479), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Группа экспертов Министерства животных ресурсов и рыбного хозяйстваи сотрудников (ЦЛАЭ) совершила поездку в эти населенные пункты дляпроведения отбора проб для лабораторного анализа [ГОСТ РИСО 5555 2010,2012].Пробы отбирали с 03 июня 2013 года по 30 июня 2015 года. Для изученияфизико-химических показателей, нитратов, нитритов, фосфатов и аммония пробысобирали ежемесячно с февраля 2014 по январь 2015 года.
Для определенияконцентрации ПАУ и пестицидов пробы были взяты с 03 июня по 30 июня 2015г.Станции отбора проб распределены вдоль побережья в зависимости отстепени выраженности катастрофы, то есть массовости гибели рыб: Аhuа, Taboth,Gboubo и Mopoyem (массивная смертность) Koko, Бапо, Papoga, Layo и Abraco(средная смертность) N'djem и Songon (низкая смертность).В общей сложности, было проведено более двухсот анализов рыбы(погибших и живых), воды и грунты чтобы детально изучить причину массовойгибели рыб.Выборки рыб, чтобы охватывали все населенные пункты, расположенные взоне риска.
На берегу задавали интересующие вопросы местным жителям, такжепосетили администрацию населенных пунктов для того, чтобы получитьразрешение. Образцы воды отбирали во флаконы с двух каноэ. Пробы были взятыс поверхности воды (глубина 0-20 см), а также на глубине от 1,5 до 4 м. Рыбакипредоставили выловленную рыбу и другие морепродукты.
Образцы выловленнойрыбы были запечатаны в контейнеры со льдом и отправлены в ЦЛАЭ. Туда жебыли сданы и пробы воды.51Анализ климата и основных физико-химических параметров вод лагуныЕбрие проводился по данным девяти станций мониторинга; некоторые параметрыболее подробно рассмотрены по четырем станциям (Ahua, Кoko, Mopoyem,Gbougbo). Две станции Ahua и Кoko располагались на территории городаЖаквиль, а две другие Mopoyem и Gbougbo на территории города Дабу. Городарасположены на противоположных берегах лагуны (Рисунок 19), причем вЖаквиль в основном население занимается рыболовством, а в Дабу сельскимхозяйством. Рядом с Жаквиль расположены нефтегазовые платформы.Рисунок 19.
Места отбора проб для ПАУ и пестицидов4.2. Методы исследованияАнализ проб проводили в центральной лаборатории агрохимии иэкотоксикологии(ЦЛАЭ).Безопасностьпищевыхпродуктовизащитаокружающей среды являются основными приоритетами ивуарийских властей.Кроме того, риск сбоя экспорта продукции из-за загрязнителей пищевыхпродуктов по причине несоответствия международным нормам являетсятормозом для экономики страны. Поэтому был создан ряд исследовательскихцентров для отслеживания и проверки состояния пищевых продуктов передотправкой [LANADA, 2010]. Одним из этих центров, обладающих полномочиямидля контроля над продуктами сельского хозяйства, является ЦЛАЭ.
Этот центр52оказывает значительную поддержку в улучшении качества сельскохозяйственнойи животной продукции и состояния окружающей среды.Как и все пять остальных лабораторий Министерства сельского хозяйства.ЦЛАЭ оказывает государственным службам и частному сектору материальнотехническую поддержку мероприятий по содействию и контролю. Эта поддержкаохватывает различные сферы, включая: выполнение или участие в выполнениигосударственных или частных научно-исследовательских программ; экспертиза;содействие органам власти и определение путей управления, контроля иулучшения в следующих областях: гигиена и качество пищевых продуктов;качество сельскохозяйственной продукции; ветеринарные и фитосанитарныевопросы; защита растений; охрана окружающей среды.Для выполнения этих задач в лаборатории проводятся следующиемероприятия: анализ и контроль качества агрохимикатов, используемых в КотД’Ивуаре, или в продукции на экспорт; анализ и контроль качества ветеринарныхпрепаратов; исследование микотоксинов в сельскохозяйственной продукции;разработка и осуществление мониторинга для проверки состояния остатковпестицидов в различных экосистемах; экологический биомониторинг для оценкивоздействия химических веществ и т.д.4.2.1.
Методы полевого отбора и первичной обработки пробОтбор проб проводили в контейнеры для сбора образцов с системойохлаждения. Рыбу упаковывали в алюминиевая фольгу и помещали впластиковые пакеты, хранили в контейнерах при низкой температуре. Образцыводы отбирали в стерильные флаконы для образцов воды объемом 1 литр(Рисунок 21 и Рисунок 22).Сбор образцов проводили с соблюдением антисептических норм. Местаотбора проб фотографировали, фиксировали географические координаты точек спомощью навигатора, пробы маркировали.В момент отбора проб проводили оценку состояния вод с помощьюмультиметра YSI (Рисунок 23), который выдает ряд физико-химических данных53(температура, соленость, кислотность, количество углеводородов и др.) .Прозрачность была измерена на месте с помощью диска Секки [Chantraine al,1984; Pages al, 1979].Количество взвешенных частиц в воде в лагуны (SM) определяли путемзаливки одного литра воды через предварительно взвешенный фильтр с размеромпор 0,42 мкм, а затем взвешиванием фильтра снова после сушки при 105 ° С втечение 2 часов, чтобы удалить всу воду.
SM, мг/кг была рассчитана последующей формуле: SM =[P2-P1] / V, где P1, мг – масса фильтровальной бумагиперед фильтрацией, мг; Р2, мг – масса бумаги фильтра после фильтрации, мг; V Объем образца, мл.Рисунок 20.ЛодкиРисунок 21. Контейнер54Рисунок 22. КонтейнерРисунок 23.
Мультиметр YSI4.2.2. Лабораторные методы анализа пробВысокоэффективная жидкостная хроматографияМетодом высокоэффективной жидкостной хроматографии проводилиопределение пестицидов и ПАУ. Использована модификация ВЭЖХ-SM отфирма «Shimadzu» для определения концентрации ПАУ и пестицидов вразличныхпробах (Рисунок 24). Процесс анализа пробы состоял из 2 этапов:разделение пробы на составляющие компоненты, детектирование и измерениесодержания каждого компонента. ВЭЖХ представляет собой хроматограф снесколькими узлами, которые схематически представлены на (Рисунке 25).
Узелподготовки подвижной фазы, включает емкость с подвижной фазой (или емкостис отдельными растворителями, входящими в состав подвижной фазы), системыдегазации подвижной фазы, смеситель подвижной фазы (при необходимости),55насос, инжектор (ручного или автоматического), хроматографическую колонку,детектор (один или несколько с разными способами детектирования) и системы,обеспечивающей модули управления и сбора данных [Садек, 1999].
Цельразделения решается при помощи хроматографической колонки, котораяпредставляет собой трубку, заполненную сорбентом. Определенный составподвижной фазы (элюент) с постоянной скоростью откачивается из бутылки(резервуаррастворителя)инепрерывнопередвигаетсявхроматографе.Циркуляция подвижной фазы обеспечивается с помощью насоса, которыйвыталкивает растворители при высоком давлении в хроматографическую систему.Инжектор затем пипеткой впрыскивает точно отмеренную дозу пробы и вдуваетеё в подвижную фазу, которая в свою очередь, его автоматически транспортируетв колонку. Компоненты пробы, введенной в хроматографическую колонку, из-заих разного сродства к сорбенту колонки двигаются по ней с различнымискоростями и достигают детектора последовательно в разные моменты времени.Таким образом, хроматографическая колонка отвечает за селективность иэффективность разделения компонентов.
Полученная при этом хроматограммапредставляет собой график зависимости некоторого физического или физикохимического параметра подвижной фазы от времени удержания.Рисунок 24. ВЭЖХ в лаборатории ЦЛАЭ56Рисунок 25. Схема функционирования ВЭЖХ.Метод определения концентрации ПАУХимический анализ углеводородов включает в себя два основных этапа:обработка образца (сушка, извлечение углеводородов, очистка) и дозировкауглеводородов. Эта процедура позволяет определять восемь ПАУ с помощьювысокоэффективной жидкостной хроматографии в пробах воды.
Этими ПАУявляются: флюорантен, пирен, бенз (а) антрацен, бенз (б) флюорантен, бенз (к)флюорантен, бенз (а) пирен, бенз (ГХИ) перилен и индено (1,2,3-CD ) пирен.ПАУ извлекаются из анализируемого образца с помощью дихлорметана.После концентрирования экстракт очищается в колонке из основной окисиалюминия. ПАУ разделяются с помощью ВЭЖХ и опознаются детектором UV/VIS SPD-20A с длиной волн 284 нм. Количественный анализ ПАУосуществляется с помощью метода внешней калибровки. Характеристикииспользованных эталонов представлены в таблице 5.Таблица 5 Эталон (стандартный образец)СтандартныйОбразецЧистота(%)ПоставщикСрокГодностиФлюорантенПиренБенз (к) флюорантен989999Dr.
Ehrenstorfer GmbH, GermanyDr. Ehrenstorfer GmbH, GermanyDr. Ehrenstorfer GmbH, Germany20172017201757Бенз (а) пиренИндено (1,2,3-CD ) пириленБенз (g,h,i)пириленБензo (a)антраценБензо (b)флюорантен99.59898.59999.5Dr. Ehrenstorfer GmbH, GermanyDr. Ehrenstorfer GmbH, GermanyDr. Ehrenstorfer GmbH, GermanyDr. Ehrenstorfer GmbH, GermanyDr. Ehrenstorfer GmbH, Germany20182018201720182017Стандартные образцы хранили при температуре -24°С с в холодильникеCooltech (Samsung).
Эти стандарты разводили в ацетонитриле, до концентраций 1;2; 4; 6; 8 нг/мкл для калибровки.Безводный сульфат натрия с 99% чистотой (SDS, Франция) использовали вовремя экстракции, чтобы поглощать воду в образцах крабов, креветок и рыбы.Был использован флюорисил для очистки экстрактов; ацетон 99,9% (VWR,Франция) и ацетонитрил 99,9% чистоты (Мерк, Германия) были такжеиспользованы для экстракции. Ацетонитрил того же качества использовался дляхроматографии (ВЭЖХ).Подготовка образцов рыбы для анализаЭто часто самый длинный этап, который генерирует большинствоисточников ошибок в аналитической цепи.
Он включает: Расквартирование:стандартизация отбора проб и отбора представительной выборки; Шлифовка:превращение образца в тесто, таким образом, чтобы способствовать растворениюаналитов (увеличенной площади поверхности матрицы); Просеивание: разрешитьразделение остатков с целью сохранения для анализа репрезентативной частирыбы.На этом этапе у ПАУ появляется «полулетучесть», как наиболее важныйфактор. Расквартирование, измельчение и просеивание проб, которые частонеобходимы, должны быть выполнены как можно более тщательно. Тем не менее,значительнаягомогенностьдолжнасуществоватьвреальнойпрактике,используемой для фазы подготовки пробы перед анализом (Эбрар С.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
