Автореферат диссертации (1151576), страница 3
Текст из файла (страница 3)
В отдельном образце ткани измерение каждогопоказателя осуществляли не менее чем в 10 полях зрения каждого объекта.Физиологические методы: определение концентрации общего Т 3, Т4 иТТГ проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа сиспользованием наборов реагентов – «Т4 общий – ИФА - БЕСТ»; «Т3 общий 10ИФА - БЕСТ»; «Тироид ИФА - ТТГ» (Россия) на спектрофотометре MultiscanLabsystems (Финляндия). Исследование концентрации гормонов в сывороткекрови крольчих проводили на базе проблемной лаборатории по изучениюмеханизмовестественногоиммунитета«ОренбургскойГМА».Гематологическое и биохимическое исследование крови проводили нагематологическом (еMedoniс СА 620) и биохимическом (ERBA XL-200)анализаторах.Определяликоличество:гемоглобина;эритроцитов;лейкоцитов; общего белка; белка по фракциям (α, β, γ); АсАТ; АлАТ.Химико-аналитическое исследование количественного содержания селенав сыворотке крови, осуществляли усовершенствованным флуориметрическимметодом (Anipko V.V., Maryakhina V.S., Abramova L.L., 2011), наспектрофлуориметре SOLAR CM-2203.Статистическая обработка данных результатов исследований заключалась впостроении вариационных рядов, определении средних величин показателейвариации и проверке нормальности распределений полученных данных прииспользовании программы «Microsoft Excel».
Для оценки различий двух групппоказателей применяли критерий достоверности Стъюдента. Взаимовлияниеморфометрических показателей гистоструктур выражали через коэффициентыпарной корреляции, построение регрессионных уравнений (Автандилов Г.Г., 1990,2002).Названия анатомических, гистологических и эмбриологическихструктур и образований приведены в соответствии с Международной(Парижской) анатомической и гистологической номенклатурой, уточненнойна международных конгрессах, а русские эквиваленты – по 4-ой редакцииМеждународной ветеринарной анатомической номенклатуры (ЗеленевскийН.В., 2003).2.2.
Результаты собственных исследований и их обсуждение2.2.1. Гистофизиология щитовидной железы ремонтных крольчихв условиях эндемичного по микронутриентам Оренбуржья и на фонеприменения препаратов селенаУ крольчих контрольной группы гистоархитектоника железы носилавыраженный гетероморфный характер. Фолликулы (от129 до 162 мкм; ПЭИ7,91 – 8,93) и тиреоидный эпителий (от16,3 до 18,2 мкм; ЯПО 0,20 – 0,28; ИДЯ1,02 – 1,81) вариативны как по форме, так и по размеру. Сосудистое руслоинъецировано. Морфологические особенности структур щитовидной железы,позволяли говорить о наличии в ней двух типов кластеров:нормофункциональных и с признаками гипофункции.Ультраструктурно тироцит органотипичного кластера характеризуетсяспецифической морфологией. Ядро (8,7±0,16 мкм) округло-овальной формы с11извилистым контуром. Эухроматин в основном занимает магистральноеположение, ближе к кариолемме обнаруживаются конденсированные участкигетерохроматина.
В цитоплазме многочисленные микропузырьки и вакуоли,содержат частицы неоднородного, зернистого секрета. Белоксинтезирующийаппарат значительно развит. В 30% от общего числа случаев, отмечаетсярасширение эндоплазматического ретикулума, сформированные вакуолирасполагаются в базальной части клетки, их содержимое имеет низкуюэлектронную плотность. Полученные данные согласуются с работой Shimoi A.,Kuwayama C., Miyauchi M. et al. (2001).Гипофункциональные тироциты характеризовались частичной редукциейорганелл. Ядро ( 8,2±0,21 мкм) деформировано в продольной плоскости,эухроматин превалирует. Содержимое цитоплазмы электронно–плотное,отмечается обилие вакуолей их содержимое гетероморфно.
В апикальной частиклеток визуализируется процесс отделения от цитоплазмы крупных заполненныхвакуолей – макро апокриновая секреция.Скрининговый тест на гормоны щитовидной железы у ремонтных крольчихконтрольной группы показал низкие концентрации оТ4 и оТ3, при этом значениеТТГ не выходило за пределы физиологической нормы.На фоне влияния неорганической формы селена рисунок ткани однородный,диаметр фолликула уменьшился на 9% в сравнении с нормофункциональнойструктурой в контроле (ПЭИ 8,47±0,146). Кластеры с признаками гипофункции невыявлялись. Ультраструктуры тироцитов (15,28±0,582 мкм; ЯПО 0,44±0,006;ИДЯ 1,05±0,014) схожи с таковыми у нормофункциональных кластеров вконтрольной группе, однако отмечался ряд особенностей. Белоксинтезирующийаппарат эпителиоцитов более развит, микропузырьки и вакуоли располагалисьпреимущественновапикальнойчастиклетки,секретоднородный,электронноплотный.Наповерхностиэндоплазматическогоретикулумавизуализировались значительные скопления рибосом, которые формировалиполисомный аппарат.
Митохондрии мелкие, располагались в перинуклеарномпространстве. Тироциты имели низкопризматическую форму, на их апикальнойповерхности регистрировали микроворсинки, у единичных клеток участкиапокриновой секреции.В сыворотке крови регистрировалось достоверное повышение концентрацииоТ4 – на 52,6% (р≤0,001), оТ3 – на 35,8% (р≤0,001) и понижение ТТГ – на 34,3%,относительно контрольных цифр.Рисунок ткани щитовидной железы у крольчих при примененииорганической формы селена гетероморфный. Диаметр фолликула возрос на 36%(ПЭИ 10,78±0,090) в сравнении с нормофункциональной структурой в контроле.Кластеры с признаками гипофункции не выявляются.
На субмикроскопическомуровне тироциты идентичны (ЯПО 0,44±0,007; ИДЯ 1,08±0,007) по своей структурес таковыми для неорганической формы селена. Рост уровней сывороточной12концентрации йодтиронинов характеризовался увеличением оТ4 – на 11,7%(р≤0,01), оТ3 – на 52,5% (р≤0,001), тогда как уровень ТТГ понижался – на 37,5%.2.2.2. Особенности гистофизиологии щитовидной железы беременныхкрольчих (15 суток) при коррекции селенового статусаУ беременных крольчих контрольной группы гистоархитектоникажелезыносилаотносительноизоморфныйхарактер,преобладалинормофункциональные фолликулы овоидной формы (209,5±8,65мкм; ПЭИ10,2±0,12).
Кровенаполнение сосудов ГМЦР умеренное. Тканевые кластеры спризнаками гипофункции не выявлялись, однако обнаруживались единичныефолликулы с морфологическими признаками таковой, на дольку железыприходилось не более одного гипофункционального фолликула.Ультраструктуры тироцитов (20,7±0,94 мкм) характеризовалисьследующим образом: ядро (13,6±1,13 мкм; ЯПО 0,42±0,007; ИДЯ 1,09±0,014)принимало разнообразную форму, гетерохроматин занимал центральную частьорганеллы, около кариолеммы – незначительное количество перихроматина, чѐтковизуализировались ядерные поры.
На апикальном полюсе клеток, пребывавших настадии поглощения коллоида, регистрировали микроворсинки, цитоплазма быланасыщенна мелкими вакуолями с гетерогенным содержимым. На стадии инкрециипродуктов гидролиза коллоида в базальной части клетки и цитоплазме,прилегающих к ней эндотелиоцитов, были выявлены везикулы с низкойэлектроннойплотностью,чтосвидетельствовалообактивностигистогематического барьера. Митохондрии сравнительно небольших размеровлокализованы в непосредственной близости к цитолемме базального полюсаклеток, их крипты выражены, матрикс электронноплотный.
Подобноесосредоточение митохондрий характеризовало высокую степень местныхэнергозатрат и косвенно свидетельствовало в пользу активного типа транспортаинкретачерезтиреогематическийбарьер.Степеньразвитостибелоксинтезирующего аппарата была сопоставима с таковой в контрольной группеу шестимесячных крольчих. Аналогично была обнаружена эктазия цистерн ЭПР,однако еѐ интенсивность, очевидно, ниже. В стромальном компоненте железыобилие клеток фибробластического ряда, утолщение пучков коллагеновыхволокон.Исследование сыворотки крови на содержание йодтиронинов показали, что к15-ти суткам беременности в сравнении с предыдущим периодом (шесть месяцев)достоверно снизились: оТ4 – на 24,3% (р≤0,01), а оТ3 – на 8,3%, а концентрацияТТГ, в сравнении с выше указанным периодом, незначительно возросла (2,0%).При применении неорганической формы селена отмечался структурныйгетероморфизм щитовидной железы крольчих, диаметр фолликула понизился на13% относительно контроля (ПЭИ 13,1±0,05).
Кровенаполнение сосудистого русла13ГМЦР умеренное. Тканевые кластеры с признаками гипофункции, равно как иотдельные гипофункциональные фолликулы выявлены не были. Локальноотмечаются базально смещенные тироциты на разных стадиях дифференцировки.Ядра тироцитов (9,9±0,24 мкм; ИДЯ 1,04±0,015; ЯПО 0,51±0,005)характеризовались относительным мономорфизмом, сохраняя округло-овальнуюформу с преобладанием эухроматина. Подавляющее большинство тироцитов(13,8±0,26 мкм) прибывало на стадии поглощения коллоидных масс, чтохарактеризовало обилие вакуолей в цитоплазме, высокую активность лизосом иформированиенаапикальнойчастиплазмалеммымикроворсинок.Гранулированный ЭПР значительно развит, эктазия его цистерн не выявлялась.Митохондрии мелкие, локализованы относительно равномерно, структурныхаберраций не установлено.
Базально смещенные тироциты, округлой формы,окружены соединительнотканной прослойкой с пучками коллагеновых волокон икапиллярами. Ядерные структуры тироцитов вариативны, что было объясниморазной степенью их дифференцировки. Объем цитоплазмы клеток незначительный,органеллы малочисленны или не визуализируются. Таким образом в нашей работеподтвержден факт наличия субпопуляции экстрафолликулярных тироцитов, чтосогласуется с мнением А.Ф.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
