Диссертация (1151571), страница 6

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 6)

и анатомии и гистологии животных имени профессора А.Ф.Климова ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина, а также впитомниках "Веолар", "Звезда Руси", "Русский Риск" и различных выставкахв период с 2012 по 2017 г.Для формирования групп животных использовали классификациюпород собак в зависимости от морфологического типа волосяного покрова.[5,6] Для изучения гладковолосой группы собак (длина волосяного покрова до1,5 см) были отобраны образцы волос от взрослых половозрелых собак породышарпей, для изучения коротковолосой группы собак (длина волосяногопокрова от 1,5 см до 7 см) - образцы волос от пяти собак породы норвежскийэлкхаунд , длинноволосой (длина волосяного покрова от 7 см) - образцы волосот пяти собак породы леонбергер. Критерий отбора материала позволяет, нанашвзгляд,расширитьизвестныевнутригрупповыехарактеристикиволосяного покрова, а также микроморфологически установить объективностьпредложенного дифференцирования пород собак по длине волосяногостержня.

Для изучения половозрастных вариаций морфологических признаковволоса собачьих использовали волосяной покров различных половозрастныхгрупп представителей пород кавказская и восточно-европейская овчарки.Исследованию были подвергнуты различные категории волос у изучаемых32пород собак: направляющие, остевые и пуховые, отобранные с области животаи спины (n=300). Кроме того, в качестве природной нормы строения кожноволосяного покрова были изучены образцы направляющих, остевых ипуховых волос со спины и живота самца, самки и щенка волка центральногокряжа РФ.

Данные о характеристике исследуемого материала представлены втаблице 1.Таблица 1 – Объекты исследованияТипологический, половозрастнойпризнакСамецСамкаЩенокВосточно-европейская овчарка(ВЕО)555Кавказская овчарка (КО)555ВолкШарпейНорвежский элкхаундЛеонбергер5555552.2 Методы исследованияПриопределениидлиныволосиспользоваликомплексныйметодический подход, включающий визуальную оценку состояния волосяногопокрова, анатомическое препарирование, макроскопическую морфометрию сопределением истинной и естественной длины волос. С этой целью отмытыйволосяной пучок расчесывали, помещали на бумагу контрастного цвета подстекло так, чтобы верхушки волос выступали.

Пинцетом вытягивали волос изпод стекла за выступающий конец, тем самым распрямляя его от извитости. Вмомент, когда волос выпадал из-под стекла, определяли его истинную длину спомощью линейки с точностью до 0,5 см.33При определении естественной длины пучок под стекло не помещали с цельюисключения возможности выпрямления волоса в процессе измерения.Толщину волоса определяли микроморфометрически. С этой цельюустанавливали величину (цену) деления окулярного микрометра, которуюобозначали переводным коэффициентом K.

Для этого использовалиобъективный микрометр с ценой деления 0,01 мм, т.е. 10 мкм. Объективныймикрометр помещали на предметный столик микроскопа и закрепляли междузажимами. В поле зрения микроскопа визуализировали две шкалы: окулярнуюи объективную, при этом изображения обеих шкал накладывались.Подсчитывали число делений окулярной и объективной шкал в пределах двухсовпадений, затем количество делений объективного микрометра на данномучастке умножали на его цену и делили на количество окулярных делений наэтом же участке.Для установления переводного коэффициента расчеты проводилидважды, на основании их результатов выводили среднюю арифметическуювеличину. Цена одного деления окулярного микрометра не превышала 5 мкм.Для микромофологического исследования пробу волос тщательноскручивали в жгут.

Фрагмент волоса помещали на предметное стекло сглицерином и осторожно накрывали покровным стеклом.После установления цены деления окулярного микрометра объективмикрометрснималиспредметногостолика,нанегопомещалиприготовленный препарат и фиксировали. Затем препарат при помощипрепаратоводителя перемещали вправо и измеряли отрезки, расположенные вцентре поле зрения, то есть в пределах шкалы окулярного микрометра.Далее препарат перемещали на два или три мм, продолжая определять отрезки,попадающие при передвижении препарата в обратном направлении.

Этимспособом исключали возможность повторных измерений одних и тех жеотрезков волоса. Важным условием при этом являлась визуализацияизмеряемого отрезка волоса с тонкими и прозрачными краями, что возможно34достичь микрометрическим винтом микроскопа. Окулярный микрометрнакладывали строго перпендикулярно к краям отрезков волокон, затемподсчитывали число делений, накрывающих поперечник волокна, ирегистрировали каждое измерение в таблице.Волосы распределяли по классам толщины.

Классный промежуток был равенцене одного деления окулярного микрометра, которым определяли толщинуотрезков, и значение класса толщины выражали в делениях окулярногомикрометра. [36]Для приготовления образцов к сканирующей электронной микроскопииволосыпромывалимыльно-содовымрастворомспоследующимвысушиванием в течение суток в эксикаторе с силикагелем для снижения егоестественного влагосодержания, так как большая остаточная влажность моглапривести к значительному удлинению времени откачки в напылительнойустановке.Волос фиксировали на специальных немагнитных объектных столикахс помощью двухсторонней клейкой пленки. Для создания электропроводногослоя в ионно-напылительной установке Eiko IB-3 препараты напылялиплатиной в атмосфере аргона.[8, 32, 62]Проведение СЭМ осуществляли на микроскопе FEI Inspect F50предприятия ЗАО "Нанопромимпорт" при ускоряющем напряжении в 20 кВ,что позволяло получить четкие цифровые изображения при увеличении свыше3 тысяч раз.Классификация строения чешуйчатого слояПриоценкеклассификацию,строениячешуйчатогоразработаннуюслояавстралийскимиволосиспользовалиисследователямииотраженную в работе Кисина М.В.

(1996) [24] Согласно этой классификации,выделяют четыре основных типа рисунка чешуйчатого слоя:35- Коронарный простой. Клетки кутикулы расположены подобно лепесткамцветка, перекрывают одна другую;- Мозаичный. Видимые части кутикулы неправильной многоугольной формыс бессистемным расположение клеток;- Волнистый. Свободные края клеток с волнистой конфигурацией;- Промежуточный.

Этот тип волнистости встречается в частях волоса, гдепроисходит смена типов кутикулы.Так же авторы выделяют пять видов строения свободного края апикальнойчасти клеток кутикулы:- Ровный, в виде ровной линии;- Округло-зубчатый, неровный с неглубокими впадинами и относительноострыми углами;- Волнистый, неровный с глубокими впадинами и закругленными углами;- Зубчатый, неровный с округлыми вершинами и острыми углублениями;- Острозубчатый, с остроконечными выступами в виде зубцов.Для определения зонарной окраски волос отбирали образцы с различныхтопографических участков. Волосы помещали под предметное стекло, цветбумаги, подложенной под стекло, позволял четко выделять их стержни.Каждый волос распрямляли иглой для препарирования и измеряли длинукаждой зоны масштабной линейкой с точностью до 0,5 мм.Полученный цифровой материал подвергали статистической обработке поклассическим методам [35]Расчет средней арифметической производили по формуле :ххni, гдех - среднее значение признака;36хi-значение признака;n- количество измерений.Расчет среднего квадратического отклонения производили по формуле: х  х 2in 1 ,где  х  х2i- сумма разности между отдельнымзначением варианта и средней арифметической;n-1 – число степеней свободы.Коэффициент вариации для выборки определяли по формуле:Сv х 100%При Сv менее 10 % можно судить об однородности значений, при С v от 10 до20% - о средней изменчивости значений признака, при С v более 20% - о егонеоднородности.Статистическую ошибку для среднего арифметического значения определялиmпо формуле:n, где m-статистическая ошибка среднейарифметической; n- количество исследуемых данных.Общую дисперсию определяли по формуле: Сy = ΣV 2 − H, где H =(ΣVi )2nОбщефакториальную дисперсию определяли по формуле: Cx = Σhx − H , гдеΣhx = Σ(ΣVi )2niДисперсия совместного действия двух факторов: СAB = Cx − CA − CBДолю влияния каждого фактора определяли по формуле η2x =CxCy372.3 Результаты собственных исследований и их обсуждение2.3.1 Морфологическая характеристика волосяного покрова представителейсемейства собачьихНа первом этапе было произведено визуальное исследование волосяногопокрова волка и пяти пород собак.Установлено, что волосяной покров волка и изучаемых пород собакимеет общие закономерности строения и состоит из волос трех категорий:пуховые,остевые,направляющие.Пуховойволосхарактеризуетсяцилиндрической, а остевой и направляющий – ланцетовидной формой.Направляющий волос, отобранный с области живота собаки породылеонбергер, извит незначительно (0,9%) в основании и шейке стержня, онимеет ярко выраженную гранну, длина которой составляет 32%.

Остевойволос извит слабо (2,8%) в основании и шейке стержня волоса. Практическився гранна направляющих и остевых волос окрашена в темный, краснокоричневый цвет, а основание – в светлый, золотистый. Пуховой волос имеетярко выраженную (18%) степень извитости, при этом она уменьшается отоснования к верхушке стержня. Окрас пухового волоса от золотистого досветло-бежевого.Направляющий волос в области спины леонбергера характеризуетсянезначительной (0,8%) извитостью в основании и шейке стержня волоса, сярко выраженной гранной, длина которой составляет 37% от его общей длины.Извитость остевого волоса, по сравнению с направляющим, усиливается до2,5% в основании и шейке стержня волоса.

Характеристики

Список файлов диссертации