Автореферат (1151531), страница 2
Текст из файла (страница 2)
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙРис. 1 Схема исследований.Объектом исследований являлись самки серебристо-черных лисиц разныхнаправлений селекции.7Предмет исследования – потенциальная плодовитость лисиц норвежскойи отечественной селекции, разные методы определения стадии эстральногоцикла.2.1. Определение потенциальной плодовитостиДля анализа потенциальной плодовитости во время осеннего убоя 2014года были взяты матки и яичники лисиц отечественной селекции из ОАО «ПЗ«Салтыковский» и лисиц норвежской селекции ООО «ЗПЗ Савватьево», а в2016 году в ООО «ЗПЗ Савватьево» - лисиц норвежской и отечественнойселекции, а также их помесей с 1/2 и 3/4 норвежской крови.Далее по методике Клера Р.В.
был проведѐн подсчет тѐмных и светлыхпигментных пятен в матке (Рис. 2.) и жѐлтых тел в яичниках (Рис. 3.).Рис. 2. Пигментное пятно в роге маткиРис. 3. Желтые тела в яичникеИнформация о количестве родившихся щенков была взята с карточекживотных. Данные сведены в таблицы и обработаны методом вариационнойстатистики.Былирассчитаныпотериэмбрионовнаразныхстадияхвнутриутробного развития и найдена корреляция между показателями.2.2 Изучение повторяемости и наследуемости плодовитости.Для изучения повторяемости плодовитости были взяты взрослые самки,участвовавшие в воспроизводстве и благополучно родившие в 2014-2015(n=285), в 2015-2016 (n=285) и в 2014-2016 (n=214) годах.
Далее междуплодовитостью одних и тех же самок была рассчитана корреляция.Наследуемость рассчитывалась по формуле h2= 2r по первому щенению у329 пар мать-дочь и по средней плодовитости за 3 щенения у 158 пар.2.3. Определение стадии эстрального цикла1) Методика влагалищных мазков Т.М. Чекаловой (1987).Мазок брали ватными палочками, прокатывали по предметному стеклу,подсушивали и окрашивали 2 минуты 3% раствором метиленовой сини. Затем8мазок промывали в дистиллированной воде, подсушивали и рассматривали подмикроскопом.2) Электрометрический методДля определения электрического сопротивления влагалищной слизииспользовали прибор, разработанный норвежскими учеными Si-Li 3 (SiLiDigital Heat Detector).Продезинфицированныйивысушенныйзондприборааккуратнопогружали во влагалище самки на глубину 3-4 см.
Показания считывали, когдана экране прекращались изменения. Показания заносились на карточкуживотного, а при взятии мазка фиксировались на стекле.Данные о стадиях по мазку и показаниях прибора сводились в таблицыпервичной документации. Далее методом случайной выборки были отобранысамки, у которых был определен тип кривой показаний прибора. Диапазонизмерений прибора – 0 – 1990 Ом.Были выделены лисицы, у которых прибор не показывал измененийэлектрического сопротивления, но которые при этом находились в стадииохоты по петле и мазку. Таких лисиц осеменяли, определяя оптимальное времяпо мазку.Были проанализированы количество живых щенков на основную самку,продолжительность периода осеменения (проводилось 1 осеменение в день), атакже плодовитость лисиц и количество пропустовавших самок.Полученные данные были обработаны методом вариационной статистикив программе Excel.3.
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ3.1. Определение потенциальной и фактической плодовитости лисицнорвежской и отечественной селекции и их помесей разной степеникровностиПервоопределяющим фактором, влияющим на плодовитость, являетсяколичествоовулировавшихяйцеклеток.Крометого,важноналичиеплацентарных пятен в матке, по количеству которых можно судить о числеприкрепившихся эмбрионов.В 2014 году во время осеннего убоя были взяты для анализапотенциальной плодовитости матки и яичники лисиц отечественной селекции9иззверосовхоза«Салтыковский»илисицнорвежскойселекциииззвероплемзавода «Савватьево».Таблица 1.
Потенциальная и фактическая плодовитость лисицПоказателиплодовитостиЖелтые тела, шт.Плодовитость, гол.ОАО «ПЗ Салтыковский»n±S209,7±0,5176,8±0,4ООО «ЗПЗ Савватьево»n±S207,6±0,5**92,6±0,5***** - P>0,99 *** - P>0,999В результате морфологических исследований получены следующиеданные (Табл. 1): количество желтых тел в яичниках у лисиц отечественнойселекции больше на 2,15, чем у лисиц норвежской селекции (Р>0,99).Плодовитость лисиц «ПЗ Салтыковский» на 4,2 щенка больше, чем у лисиц«ЗПЗ Савватьево», однако это может быть связано с различными технологиямигона.Рис. 4. Внутриутробные потери на разных этапах эмбрионального развитияНа основе данных по количеству пигментных пятен в матке и желтых телв яичниках были рассчитаны внутриутробные потери до и после имплантации.В результате получены следующие данные: большая часть (76,9% в«Салтыковском» и 68,7% в «Савватьево») от всех потерь приходится на периоддо прикрепления эмбрионов (Рис.
4).10Так как в 2014 году анализ проводился в разных хозяйствах с разнымиусловиями кормления, содержания и технологией гона, было принято решениев 2016 году провести подобное исследование на лисицах ООО «ЗПЗСавватьево». Для анализа были взяты матки и яичники лисиц норвежскойселекции, российской селекции, 1/2 и 3/4 норвежской крови.При анализе потенциальной и фактической плодовитости лисиц разныхстепеней кровности было выявлено, что количество желтых тел в яичникахсамое высокое у лисиц 1/2 кровности норвежских и составляет 10,2 тел. Приэтом разница по сравнению с лисицами норвежской и 3/4 норвежской селекциидостоверна и составляет 1,5 (P>0,95) и 1,8 (P>0,99) желтых тел соответственно.Таблица 2. Потенциальная плодовитость лисиц разных типов селекцииКровностьnЖелтые тела вяичниках, шт.n±SОтечественной½ норвежские¾ норвежскиеНорвежской202020209,9±0,5*10,2±0,4*8,4±0,3**8,7±0,520121411Пигментные пятна вматке, шт.Плодовитость,гол.±S±S6,6±0,56,6±0,74,3±0,2**6,1±0,45,5±0,45,3 ±0,53,5 ±0,3*4,6 ±0,3* - P>0,95 ** - P>0,99Количество желтых тел у лисиц 3/4 норвежской самое низкое, идостоверно отличается от этого же показателя не только у лисиц кровности 1/2,но и у лисиц отечественной селекции.
Разница составляет 1,5 шт. (P>0,95).Таким образом, максимальная потенциальная плодовитость выявлена у помесей1-го поколения. При подсчете пигментных пятен в матке и плодовитостивыявлено, что оба показателя у самок с 3/4 крови норвежских лисиц достовернониже, чем у отечественных на 2,3 пятна (P>0,95) и 2,0 щенка (P>0,95)соответственно (Табл. 2).При анализе внутриутробных потерь на разных стадиях эмбриональногоразвития было выявлено, что наибольшие потери у лисиц с 3/4 кровинорвежских самок (60,2%), а наименьшие – у отечественных лисиц (44,7%).При этом основная часть потерь у всех лисиц приходится на период доимплантации эмбрионов (73,9– 91,9 % от потерь за весь период) (Рис. 5.).При анализе корреляции выявлено, что внутриутробные потери за весьпериод имеют высокую зависимость от количества желтых тел r=0,61, при чемв большей степени от потерь до имплантации r=0,54.
Потери после11имплантации положительно коррелирует с количеством пигментных пятенr=0,50. При этом в большей степени они зависят от количества светлых пятен(r=0,45), чем от количества темных (r=0,25).Плодовитость же отрицательно коррелирует с потерями за весьвнутриутробный период (r=-0,48), однако в большей степени зависит от потерьдо имплантации (r=-0,41), чем от потерь после (r=-0,19).Рис. 5.
Внутриутробные потери на разных этапах эмбриональногоразвитияУ 3 из 80 (3,75%) самок наблюдалась миграция яйцеклеток в соседнийрог, то есть в роге было обнаружено большее количество яйцеклеток, чемжелтых тел в сообщающемся с ним яичнике.3.2. Наследуемость и повторяемость плодовитостиНами было проведено исследование наследуемости плодовитости усеребристо-черных лисиц в условиях применения искусственного осеменения.Плодовитость по первому щенению наследуется с коэффициентом h2 =0,10 (n=329) а по средней плодовитости за несколько благополучных щенений h2 = 0,19 (n=158)Более низкое значение наследуемости по первому щенению может бытьсвязано с тем, что плодовитость варьирует в стаде сильнее за счет разной12степени развития половой системы у молодых самок, а также из-за того, что небыл еще проведѐн отбор по плодовитости.Повторяемость плодовитости была определена у взрослых животных в2014-2015, в 2015-2016 и в 2014-2016 годах.
Она составила соответственно r =0,22 (n=285), r = 0,24 (n=441) и r = 0,22 (n=214)3.3. Методы определения стадии эстрального циклаОдним из решающих факторов достижения высоких показателейвоспроизводства при искусственном осеменения, как было сказано выше,является точное определение стадии эстрального цикла.Для этого на данный момент используются 3 основных метода:определение по петле, по гистологической картине влагалищного мазка и поэлектрическому сопротивлению влагалищной слизи.3.3.1. Анализ результатов гона 2014 и 2015 годаПо результатам гона 2014 и 2015 года методом случайной выборки быливзяты 465 и 401 соответственно самок лисиц.
Лисицы были разделены по типукривых электрического сопротивления влагалищной слизи. Выделяли 4 типакривых: А – с острым пиком, Б – с плавным пиком, В – с «плато» и Г – с 2пиками.При этом количество живых щенков на основную самку примерноодинаковы у лисиц с разными типами кривых, но значительно ниже у лисиц, укоторых не было выраженных пиков электросопротивления влагалищнойслизи, и время для осеменения выбирали по мазку, и у лисиц, у которых пиксопротивления проигнорировали и осеменяли по мазку. Разница междулисицами,укоторыхвремядляосемененияопределялипоэлектросопротивлению и теми, у которых выраженных пиков не наблюдалосьсоставила 1,1 щенка в 2014 году (P>0,999) и 0,3 щенка в 2015 году.Плодовитость более равномерна, чем количество живых щенков наосновную самку, хотя в группах, где время для осеменения определялось помазкам она достоверно ниже, чем у лисиц, у которых определяли овуляцию поэлектросопротивлению (Табл.
3).Разницасоставляет0,64и0,56щенкав2014и2015годусоответственно(P>0,95). В этих же группах выше % пропустовавших самок.Былипроанализированыпоказателивоспроизводствасамокв13зависимости от дня первого осеменения относительно пика электрическогосопротивления слизи. Лучшие показатели у лисиц, которых начали осеменять впериод с -1 по 1 день относительно пика. У самок, которых начали осеменятьпозже 1 дня после пика электросопротивления количество живых щенков наосновную самку меньше на 2,7 щенка (P>0,95).Таблица 3. Плодовитость самок в группах лисиц с разными методамиопределения стадии эстрального цикла, гол.Метод определения стадииэстрального цикла2014 годСамки безnприплода,±S%283 5,4±0,17106 4,7 ± 0,2*18,3По приборуПо мазкуС пиком электросопротивления,20 4,1 ± 0,5*но крылись по мазкуИтого409 5,1 ± 0,1n264852015 годСамки безприплода,±S%5,4±0,113,74,8±0,2*10,537,5---13,73495,2±0,113* - P>0,95Наблюдается более низкое количество живых щенков на основную самкуи при начале осеменения за 3 дня до пика и ранее.
Кроме того, в этих группахсамая высокая продолжительность осеменения.При этом лучшим временем для начала осеменения можно считать деньпика электросопротивления, так как продолжительность периода осеменения уэтих самок достоверно ниже, чем у тех, которых начали осеменять за день допика, разница составляет 0,84 дня в 2014 году и 0,70 в 2015 году (P>0,999) исоставляет 2,6 и 2,5 дней соответственно.Так же обнаружена высокая отрицательная корреляция между днемначалаосемененияотносительнопикаэлектросопротивленияипродолжительностью периода осеменения. Она составляет в 2014 году r=-0,752,в 2015 r = -0,517.При этом выявлено, что плодовитость лисиц ниже при слишком раннем (4 день) и слишком позднем (2-4 дни после пика) осеменении, а количествопропустовавшихсамокпревышает20%.Самыйнизкийпроцентпропустовавших самок у лисиц, которых начали осеменять за день до пика и вдень пика электрического сопротивления слизистой влагалища (2,3-3,2 в 2014году и 10 в 2015 году).14У всех самок дополнительно уточняли и стадию эстрального цикла помазку в день первого осеменения.