Автореферат (1150272), страница 5

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 5)

Из полученных данных видно, что перекрывание спектров незначительно иможет быть учтено при добавлении МВА в холостую пробу.Затемдляоптимизацииусловийциклическогоинжекционногоспектрофотометрического определения изониазида в моче было изучено влияниекислотности среды, концентрации цитрат-ионов и МВА.Рисунок 12. Влияние рН (А), концентрации цитрат-ионов (Б) и концентрации МВА (В) наоптическую плотность комплекса 100 мкМ изониазида с МВА и цитрат-ионами.Исходя из полученных данных, следует, что комплекс стабилен в диапазоне pH от 2,05до 2,25 (Рисунок 12А). При добавлении цитрат-ионов во время комплексообразованияпроисходит увеличение оптической плотности раствора вплоть до концентрации 0,1 М(Рисунок 12Б), которая и была выбрана в качестве оптимальной. Концентрация МВА 0,6 мМявляется достаточной для эффективного протекания реакции комплексообразования сизониазидом (Рисунок 12В).Для проточного спектрофотометрического определения изониазида в моче (Рисунок 10)с помощью перистальтического насоса и крана 2 разбавитель – дистиллированная вода (5),17стандартный раствор изониазида (4) и проба мочи (1) направляются в смесительные камерыСК1-СК6 в заданных пропорциях (Таблица 5), общий объем растворов составил 1,25 мл.Затем во все смесительные камеры с помощью перистальтического насоса вводят по 125 мклцитратного буферного раствора (3) и 0,6 мМ МВА (2), растворы во всех смесительныхкамерах последовательно перемешиваются в течение 10 с воздухом.

Затем раствор из СК1направляется в кювету оптоволоконного спектрофотометрического детектора для измеренияоптической плотности в режиме остановленного потока при 420 нм. Измерениеаналитического сигнала повторяется для оставшихся смесительных камер, затем происходитпромывка всех коммуникаций системы дистиллированной водой и измерение оптическойплотности холостой пробы (раствор МВА). По результатам измерений от каждой серии былиполучены значения оптических плотностей A1 - A6, которые позволяют рассчитать 6концентраций пробы по формулам, представленным в таблице 5.Таблица 5. Составы градуировочных растворов в смесительных камерах и формулы для расчетаконцентраций аналита (Сст – концентрация аналита в стандартном растворе).Смесительная камераСоставОбъемноесоотношение1Разбавитель,стандартный раствор1 : 1,5c1 A42Проба, разбавитель,стандартный раствор1:1:3c2 A33Проба, стандартныйраствор, разбавитель1:1:3c3 4Разбавитель, проба1,75 : 0,75c4 5Стандартный раствор,разбавитель и проба1 : 0,75 : 0,75c5 6Стандартный раствор,разбавитель1 : 1,5c6 ИнтерпретацияФормула 2  c стA1 2  c стA6A4 2  c стA2  A3A3A5  A4A4A5  A4A3A2  A3 2  c стA6A1A1A6 2  cст 2  c стМетод градуировочногографика(интерполяционный), неучитывается влияниематрицыИнтегрированный метод,частично учитываетсявлияние матрицыМетод стандартных добавок(экстраполяционный),полностью учитываетсявлияние матрицыВарьируя степень разбавления пробы, можно найти то значение, при котороммешающее влияние матрицы пробы будет полностью нивелировано, что приведет к близкимзначениям концентраций С1 – С6.При определении изониазида в моче было изучено несколько серий градуировочныхрастворов при разных степенях разбавления от 1 до 0,05.

Согласно полученным данным(Рисунок 13), при разбавлении пробы более чем в 10 раз разница между наибольшим инаименьшими значениями концентрации изониазида не превышает 5%, и при дальнейшемразбавлении практически не изменяется. Следует отметить, что степень разбавления пробмочи может изменяться и подбираться в условиях проточного анализа индивидуально.Рисунок 13. Влияние степениразбавлениянарезультатыопределения изониазида в моче.18Для проверки правильности разработанных методик ЦИА проводили определениеизониазида в пробах мочи.

В отобранные пробы мочи вводили добавки изониазида. Дляподтверждения правильности полученных результатов, параллельно проводили анализ припомощи известной методики ВЭЖХ [A. Hutchings, R.D. Monie, B. Spragg, P.A. Routledge // J.Chromatogr. // 277 (1983) 385-390]. Результаты определения изониазида в моче представленыв таблице 6. Результаты были сравнены с помощью F- и t-тестов.

Полученные F-значения ≤6,4 указывают на незначительное различие в величинах стандартных отклонений, аполученные t-значения ≤ 2,78 указывают на то, что нет статистически значимого различиямежду результатами, полученными при помощи методик ЦИА и ВЭЖХ.Таблица 6. Результаты определения изониазида в пробах мочи (n = 5, P = 0,95, Fкр = 6,4, tкр = 2,78).ПробаВведено изониазида,мкМ1234,51525Найдено изониазида в моче,мкМЦИАВЭЖХ4,4±0,14,2±0,115,0±0,515,3±0,425,0±0,824,6±0,6F-значениеt-значение3,14,42,52,11,51,0Аналитические и метрологические характеристики разработанной методикиприведены в таблице 7. Предложенная схема анализа может быть использована дляспектрофотометрического определения других аналитов в биологических жидкостях.Следует отметить, что впервые разработана проточная методика определения изониазида.Найденные методические решения позволяют сократить расходы пробы и реагентов посравнению с ПИА и SIA в 16 и 2 раза соответственно.

Кроме того, удалось упростить схемыon-line разбавления проб и введения добавок.Таблица 7. Аналитические характеристики методики определения изониазида в моче.Диапазон определяемыхконцентраций, мкМКоэффициент корреляции, r2Предел обнаружения, мМСКО (n= 10), %Время анализа, мин1 – 1000,9990,351219Заключение Разработаны схемы циклического инжекционного анализа слюны, включающиедериватизацию аналитов с последующим микроэкстракционным выделением иконцентрированием деривативов при диспергировании экстрагента полярнымрастворителем и газовой фазой, реализованные в методиках определения антипирина вслюне. Выбраны условия микроэкстракционного выделения и концентрирования 4нитрозоантипирина из проб слюны с диспергированием экстрагента полярнымрастворителем и газовой фазой. Разработана схема циклического инжекционного анализа, включающая капельноемикроэкстракционное выделение и концентрирование аналитов, реализованная вметодике потенциометрического определения кофеина в слюне. Представлены результаты адаптации метода комбинированных градуировок к условиямциклического инжекционного анализа, продемонстрированные на примере методикиопределения изониазида в моче. Обоснованы условия стабилизации комплекса изониазида с метаванадат-ионами вприсутствии цитрат-ионов в кислой среде и возможности его использования в качествеаналитической формы при спектрофотометрическом определении изониазида в моче. Представлены результаты испытаний разработанных методик на реальных объектаханализа.Список работ, опубликованных по теме диссертацииСписок статей, опубликованных в журналах:1.

K. Iu. Medinskaia. Determination of antipyrine in saliva using the dispersive liquid–liquidmicroextraction based on a stepwise injection system / K. Iu. Medinskaia, A.V. Bulatov,S. Iu. Garmonov, D.V. Aseeva, L.N. Moskvin // Talanta. – 2015. – V. 133. – P. 66-70.2. K.

Iu. Medinskaia. Stepwise injection determination of isoniazid in human urine samples coupledwith generalized calibration method / K. Medinskaia, S. Garmonov, J. Kozak, M. Wieczorek, V.Andruch, P. Kościelniak, A. Bulatov // Microchemical Journal. – 2015. – V.

123. – P. 111-117.3. K. Medinskaia. A fully automated effervescence assisted dispersive liquid-liquid microextractionbased on a stepwise injection system. Determination of antipyrine in saliva samples / K.Medinskaia, Ch. Vakh, D. Aseeva, V. Andruch, L. Moskvin, A. Bulatov // Analytica Chimica Acta.– 2016. – V. 902. – P. 129-134.4. I.

Timofeeva. Stepwise injection potentiometric determination of caffeine in saliva using singledrop microextraction combined with solvent exchange / I. Timofeeva, K. Medinskaia, L. Nikolaeva,D. Kirsanov, A. Bulatov // Talanta. – 2016. – V. 150. P. 655-660.Список публикаций в других изданиях:5. K.Iu. Medinskaia. Determination of antipyrine in saliva using the on-line dispersive liquid-liquidmicroextraction based on a stepwise injection system / K.Iu. Medinskaia, A.V.

Bulatov // 18thICFIA. Porto. Book of abstracts. − 2013. − Р. 172.6. К.Ю. Мединская. Циклическое инжекционное спектрофотометрическое определениегидразида изоникотиновой кислоты в моче / К.Ю. Мединская, Б.А. Коротецкий, А.В.Булатов, С.Ю. Гармонов // I зимняя молодежная школа-конференция с международнымучастием «Новые методы аналитической химии». Санкт-Петербург. Тезисы докладов. − 2013.− С. 62.7.

К.Ю. Мединская. Автоматизация микроэкстракции на принципах проточных методованализа / К.Ю. Мединская, А.В. Булатов, Л.Н. Москвин // VII Всероссийская конференциямолодых ученых, аспирантов и студентов с международным участием по химии инаноматериалам «Менделеев-2013». Санкт-Петербург.

Тезисы докладов. − 2013. − С. 62-63.208. К.Ю. Мединская. Определение антипирина в слюне с применением микроэкстракции сдиспергированием экстрагента в условия циклического инжекционного анализа / К.Ю.Мединская, А.В. Булатов, Л.Н. Москвин // Второй съезд аналитиков России. Москва. Тезисыдокладов. – 2013. – С. 245.9. К.Ю. Мединская. Циклическое инжекционное спектрофотометрическое определениеаминосодержащих лекарственных средств в биологических жидкостях / К.Ю. Мединская //18-ая Санкт-Петербургская ассамблея молодых ученых и специалистов.

Санкт-Петербург.Сборник тезисов. – 2013. – С. 72.10. К.Ю. Мединская. Автоматизация экстракции с диспергированием экстрагента в условияхпроточных методов анализа / К.Ю. Мединская, С.Ю. Гармонов, А.В. Булатов, Д.В. Асеева, V.Andruch // IV Всероссийский симпозиум «Разделение и концентрирование в аналитическойхимии и радиохимии» с международным участием. Краснодар. Материалы научной школы. –2014. – С.

Характеристики

Список файлов диссертации