Автореферат (1141414), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Фрагмент листа горца почечуйного: пучковые волоски (1), друзы оксалатакальция (2) (ув.х100), железка (3) (ув.х400)Установлено, что при измельчении травы горца почечуйного все элементыизменяют свою форму, размеры и расположение относительно друг друга. Наиболеевариабильными являются структуры стебля, раструба, фрагменты цветка и плода.Практически в неизменном виде остаются диагностические элементы листа горцапочечуйного.Учитывая проблему полиморфизма представителей данного семейства, былопроведено сравнительное изучение анатомо-диагностических признаков травы горцапочечуйного и примесных видов рода Polygonum –горцев малого, щавелелистного ишероховатого.
Выявлено, что все объекты имели сходное строение, однако,различались между собой размерами анатомо-диагностических элементов. Крометого, на листовой пластинке горца шероховатого и горца щавелелистногоприсутствует большое количество остроконечных волосков.Изучение состава БАВ травы горца почечуйногоС помощью известных фармакопейных реакций и методик в исследуемомсырье было подтверждено наличие флавоноидов, показано присутствие сапонинов,дубильныхвеществ,кумаринов,простыхфенолов,кислотыаскорбиновой,аминокислот, полисахаридов, следов эфирного масла.Методом ТСХ в сырье идентифицированы: рутин, кверцетин, галловая кислота,танин, кислоты коричная, кофейная, хлорогеновая, янтарная, лимонная и щавелевая;аскорбиновая кислота, свободные сахара: фруктоза, арабиноза, ксилоза.Методом ГХМС получены масс-спектры 62 веществ органической природы,идентифицировано 17 соединений: 3 вещества спиртовой природы (эритритол,глицерин, ксилит), 4 сахара (D-фруктоза, D-фруктопироноза, галактопироноза,11сахароза), 2 вещества антоциановой природы, галловая кислота, изофлавон, 2 жирныхкислоты (пальметиновая, стеариновая), риботимидин и фитостерол, различныеорганическиекислоты(пирослизеваякислота идр.).АнализУФ–спектровизвлечений, полученных из травы горца почечуйного с помощью растворителейразной полярности, подтвердили присутствие БАВ, установленных с помощьюкачественных реакций и ТСХ.Количественную оценку содержания БАВ травы горца почечуйного проводилипо методикам, наиболее часто используемыми в нормативной документации, иадаптированным к анализируемому ЛРС.
Результаты определения представлены втабл.2.Таблица 2.Содержание отдельных групп БАВ в траве горца почечуйного (n=6, Р=0,95)БАВФлавоноидыСумма дубильных веществТанинПолисахаридыОрганические кислоты свободныеОксикоричные кислотыАскорбиновая кислотаСвободные аминокислотыСумма свободных и связанныхаминокислотЭфирное маслоМетод определенияспектрофотометрияпермангонатометрическоетитрованиеспектрофотометриягравиметрияалкалиметрическоетитрованиеспектрофотометриятитриметрияспектрофотометрияСодержание, %1,26±0,014капиллярный электрофорез9,02±0,01перегонка с водой14,60±0,800,65±0,0316,95±0,850,63±0,0041,20±0,0140,034±4,6*10-40,61±0,03следыИзучение минерального состава травы горца почечуйного и показателейбезопасностиВ соответствии с требованиями ГФ РФ ХIII изд. в траве горца почечуйногобылоопределеносодержаниерадионуклидов,пестицидовитяжелыхметаллов(табл.3).
Исследование проводили параллельно с анализом почвы с местапроизрастания горца почечуйного. В ходе анализа установлено, горец почечуйный неконцентрирует в себе ионы тяжелых металлов, содержание пестицидов ирадионуклидов также находилось на допустимом уровне.12Таблица 3. Содержание тяжелых металлов, пестицидов и радионуклидовв траве горца почечуйногоПоказателисвинецкадмийртутьмышьякСодержаниеПочва с местаТрава горцапроизрастанияпочечуйногорастенияТяжелые металлы, мг/кг0,62±0,1308,65±1,8100,017±0,0060,11±0,0200,004±0,0010,014±0,0040,032±0,0081,96±0,37Пестициды, мг/кгНормысодержания вЛРС по НД(не более …)Кбп6,001,000,100,500,0710,1540,2800,016ДДТ и его метаболитыменее 0,007менее 0,0070,100ГХЦГ (α, β, γ-изомеры)менее 0,001менее 0,001Радионуклиды, Бк/кгменее 0,001менее 0,001менее 0,001менее 0,0010,100400,00200,000,0140,300Цезий-137Стронций-90Рассчитанные коэффициенты биологического поглощения (Кбп) показали, чтостронций относится к веществам слабого накопления и среднего захвата, а мышьяк,пестициды и цезий являются веществами слабого накопления и очень слабогозахвата.Всоставметаболомалекарственногорастения,помимоорганическихсоединений, входят минеральные вещества.
Было изучено содержание основныхмакро- и микроэлементов в траве горца почечуйного с помощью известных физикохимических методов анализа (табл.4.)Таблица 4. Содержание макро – и микроэлементов в траве горца почечуйногоНД на методыиспытанийГОСТ 26928ГОСТ Р 51637ГОСТ 30178ЭлементСодержаниеЖелезо, мг/кгМарганец, мг/кгЦинк, мг/кгКобальт, мг/кг2,0175,1640,940,14Никель, мг/кг0,33Хром, мг/кг2,23Медь, мг/кг8,07МУ 01-19/47 11-92ГОСТ 26931Фосфор, %0,38ГОСТ 26657-85ТитриметрияКальций, %Натрий, %Калий, %Магний, %1,250,2822,047,88М 04-65-2010КапиллярныйэлектрофорезГОСТ 2841413Метод испытанийАтомнаяабсорбционнаяспектроскопияМетодом хромато-масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмойопределен полный элементный состав травы горца почечуйного (62 элемента) ипочвы с места его произрастания (рис.3).Изучаемые объекты имели разный элементный состав. В ЛРС содержаниемакроэлементов достигало 98,48%, в почве - 74%.
Содержание микроэлементов впочве и траве горца почечуйного составило 22,31% и 1,4% соответственно. Тяжелыхметаллов: в почве было больше, чем в растении почти в 10 раз. Это объясняется тем,что горец почечуйный относится к однолетним растения и за вегетационный периодне накапливает большое количество микро-, ультрамикроэлементов и тяжелыхметаллов.Расчет коэффициента биологического накопления показал, что в траве горцапочечуйного к энергично накапливаемым элементам следует отнести фосфор, калий,кальций, магний, марганец, медь, молибден, ртуть, рубидий, цинк, селен, стронций.Рис.
3. Содержание макро – и микроэлементов в траве горца почечуйного (1) и почвес места произрастания (2)К элементам, сильно накапливающимся в растении, относятся кобальт,мышьяк, никель, олово, свинец, серебро, таллий, хром. К группе элементов слабогонакопления и среднего захвата были отнесены железо, натрий и др. Остальныеэлементы являются веществами слабого накопления и очень слабого захвата (рис.4).14Рис.4. Доля элементов энергичного накопления (1) сильного накопления (2), слабогонакопления и среднего захвата (3), слабого накопления и очень слабого захвата (4)Так как трава горца почечуйного, содержит значительное количество кальцияи магния, участвующих в различных жизненно важных процессах организма, быларазработана методика количественного определения данных компонентов в сырьепослеозоленияметодомкомплексонометрическоготитрования.Подобраныоптимальные условия проведения анализа, выбран индикатор и выявлена зависимостьобъема титранта, пошедшего на титрование кальция и магния, в зависимости от pНсреды (заявка на изобретение №2015102880 от 28.01.15).Разработка методик стандартизации травы горца почечуйногоТак как трава горца почечуйного используется для изготовления настоя иполучения жидкого экстракта, был изучен показатель «Содержание экстрактивныхвеществ» с использованием различных экстрагентов: воды и спирта этилового вконцентрациях 30, 50, 70, 90 % (табл.5).
Максимальное количество, экстрактивныхвеществ и флавоноидов наблюдалось в извлечениях, полученных водно-спиртовымисмесями. Наибольшее количество флавоноидов экстрагировалось70% спиртомэтиловым.Таблица 5. Влияние полярности растворителя на содержание экстрактивных веществи флавоноидов в траве горца почечуйного (n=6, Р=0,95)РастворительПолярностьВодаСпирт этиловый 30%Спирт этиловый 50%Спирт этиловый 70%Спирт этиловый 90%ЭтилацетатХлороформГептан10,208,407,256,074,894,404,100,20Содержание, %экстрактивных веществфлавоноидов16,78±0,041,18±0,0118,05±0,021,36±0,0119,38±0,051,42±0,0216,35±0,031,73±0,0210,62±0,021,18±0,020,74±0,0090,08±0,0012,22±0,010,44±0,011,97±0,020,08±0,00215Изучена возможность применения для количественного определения суммыфлавоноидов в сырье горца почечуйного спектрофотометрической методики,основанной на образовании окрашенных продуктов взаимодействия флавоноидов соспиртовым раствором алюминия хлорида, имеющих характерный максимумпоглощения при длине волны 415±2нм.Для разработки спектрофотометрической методики определения содержаниесуммы флавоноидов в пересчете на рутин в траве горца почечуйного подобраныоптимальные условия проведения анализа: время, необходимое для созреванияокраски продуктов реакции и их стабильность во времени.Рис.
5 Спектры поглощения извлечений из травы горца почечуйного до и поле взаимодействия салюминия хлоридомРазработанная методика была валидирована по критериям правильности,точности, диапазона линейности, прецизионности количественного определенияаналита.
Метрологические характеристики разработанной методики, представленныев табл.6.Таблица 6. Метрологические характеристики спектрофотометрической методикиопределения суммы флавоноидов в траве горца почечуйного (n=6; р =0,95)f52x1,87S0,0025ПараметрыSχS0,050,02t(p,f)2,57±ΔX0,02ε, %1,12Изучение лекарственных форм травы горца почечуйногоНастой травы горца почечуйного (1:10) готовили в соответствии с методикамиобщей статьи ГФ XI изд., вып.
2, с.147 «Настои и отвары», ГФ РФ XIII изд.,ОФС.1.4.1.0018.15 «Настои и отвары») и «Инструкции по изготовлению в аптекежидких лекарственных форм» (Приложение к приказу МЗ РФ от 21.10.97. №308).16Жидкий экстракт (1:1) из травы горца почечуйного получали в лабораторныхусловиях методами ремацерации и перколяции. Полученный жидкий экстрактсоответствовал требованиям статьи ОФС.1.4.1.0021.15 «Экстракты» ГФ РФ XIII изд.ПолученныеЛФ охарактеризованыповнешнему виду,прозрачности,цветности, pH и вкусу.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
