Диссертация (1141406), страница 20
Текст из файла (страница 20)
Ribes Nigrum Gemmotherapy по Unda. – Режим доступа:http://www.rockwellnutrition-canada.com/Ribes-Nigrum-Gemmotherapy-byUnda_p_771.html.150. Sawant, L. Quantitative HPLC Analysis of Ascorbic Acid and GallicAcid in Phyllanthus Emblica. / Sawant L, Prabhakar B, Pandita N // J. Anal.Bioanal. Tech. – 2010. – V. 1. – P. 111.151. Seeram, N.P.
Berry fruits: compositional elements, biochemical activities, and the impact of their intake on human health, performance, and disease. //Journal of Agricultural and Food Chemistry. – 2008. - V. 56 (3). – P. 627–629.152. Separation and Purification of Flavonoids from Black Currant Leavesby High-Speed Countercurrent Chromatography and Preparative HPLC. /He D,146Huang Y, Ayupbek A, et al. // J. Liq. Chromatogr Relat Technol.
– 2010. – V.33(5). – P. 615-628.153. Shukitt-Hale B. Dietary supplementation with fruit polyphenolicsameliorates age-related deficits in behavior and neuronal markers of inflammationand oxidative stress. / B. Shukitt-Hale, R.L. Galli, V. Meterko et al. // Age. – 2005.– V. 27. – N. 1. – P. 49–57.154. Szachowicz-Petelska, B.
Protective effect of blackcurrant on liver cellmembrane of rats intoxicated with ethanol / B. Szachowicz-Petelska, I.Dobrzyńska, E. Skrzydlewska et al. // Journal of Membrane Biology. – 2012. - V.245. – P. 191–200.155. Tabart, J., Kevers C., Evers D., Dommes J. Ascorbic acid, phenolicacid, flavonoid, and carotenoid profiles of selected extracts from Ribes nigrum. //J. Agric. Food Chem. – 2011. - May 13;59(9).- P. 4763-4770.156. Tabart, J.
Antioxidant and anti-inflammatory activities of Ribes nigrum extracts / J. Tabart, T. Franck, C. Kevers et al. // Food Chemistry/ - 2012. –V. 131. - N 4. – P. 1116–1122.157. The Homoeopathic Pharmacopoeia of the United States.- 1989, 1990.158. Tits, M. Proanthocyanidins from Ribes nigrum leaves : TLC Analysis/ M. Tits, P. Poukens, L. Angenot // Bulletin de Liaison - Groupe Polyphenols. –1992. - Vol 16 (Part 1). – P. 182-185.159. Vagiri, M.R. Phenolic compounds and ascorbic acid in black currant(Ribes nigrum L.) – Variation due to genotype, ontogenetic stage, harvest date andlocation.
Doctoral Thesis Swedish University of Agricultural Sciences. - Alnarp2014. – 68 p.160. Vagiri, M. Phenolic compounds in blackcurrant (Ribes nigrum L.)leaves relative to leaf position and harvest date / M. Vagiri, S. Conner, D. Stewartet al. // Food Chem. – 2015. - Apr 1;172. – P.135-142.161. Vagiri, M. An Optimized Method for Analysis of Phenolic Compounds in Buds, Leaves, and Fruits of Black Currant (Ribes nigrum L.) / M.
Vagi-147ri, A. Ekholm, S.C. Andersson // J. Agric. Food Chem. – 2012. V. 60. – P.10501−10510.162. Verma, K.K. Determination of ascorbic acid in fruits and pharmacenticals by titration with thallium (III) / Verma K.K., Polad S. // Microehim.Acta.-1983. - V. 2.
– N 5-6. - P. 361-367.163. Wang, H. HPLC determination of catechins in tea leaves and tea extracts using relative response factors / H. Wang, G.J. Provan, K. Helliwell // FoodChemistry. – 2003. – V. 81. – N 2. – P. 307–312.164. Wichtl, M., Anton, R. Plantes thérapeutiques - Tradition, pratique officinale, science et thérapeutique. - 2 éd., Paris, Éditions Tec & Doc, 2003. – 692 p.165.
Williams, B The Isolation and Identification of Quercetin and Isoquercitrin from Black Currants (Ribes nigrum) / B. Williams, C.H. Ice, S.H.Wender // J. Am. Chem. Soc. – 1952. – V. 74 (18). – P.4566–4567.148ПРИЛОЖЕНИЯ149МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯСмородина черная листья свежиеФС 42 -Ribes nigrum folia recensВодится впервыеНастоящая Фармакопейная статья распространяется на свежесобранные в конце июля, августе листья дикорастущей или культивируемой смородины черной - Ribes nigrum L., семейство камнеломковые – Saxifragaceae(крыжовниковые – Grossulariaceae), используемые для приготовления настойки матричной гомеопатической.Внешние признаки.
В соответствии ОФС «Методы анализа растительных лекарственных средств» раздел «Листья» ГФ ХIII. Сырье исследуется невооруженным глазом, с помощью лупы (10 ×) или стереомикроскопом(8 ×; 16 ×).Листья цельные или частично измельченные длинночерешковые, 3 – 5– лопастные, с двояковильчатым краем, сверху голые тусклые, снизу – серые,по жилкам пушистые и усажены точечными золотистыми железками, издающими специфический запах. Вкус водного извлечения горьковатый.Микроскопия. Анализ проводят в соответствии с ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» (ГФ ХIII).150Из части аналитической пробы готовят микропрепараты по методике приготовления микропрепаратов из цельного и измельченного сырья (ГФ XIII).
При рассмотрении листа с поверхности видны с верхней стороны клетки эпидермисас сильноизвилистыми, извилистыми и слабоизвилистыми стенками, длиной21-62 мкм, шириной 12-33 мкм; с нижней стороны - со слабоизвилистыми,извилистыми и сильноизвилистыми, длиной 8-71 мкм, шириной 6-38 мкм.Стенки клеток с обеих сторон местами четковидно утолщенные (чаще вдольжилок и по краю листа). Клетки эпидермиса вдоль жилок вытянутые прямоугольной, веретеновидной и комбинированной формы, крупнее, чем на всейповерхности листа. Кутикула с обеих сторон листа ровная.
Устьица аномоцитного типа расположены с нижней стороны листа (длиной 17-25 мкм, шириной 8-25 мкм) расположены с частотой 137-431 на 1 мм2. С верхней стороны листа встречаются крупные водяные устьица с округлой зияющей щельюна концах лопастей и зубцах листа (длиной 25-62 мкм, шириной 29-75 мкм),как правило, одно устьице более крупное и 2-4 более мелких. С нижней стороны листа по жилкам, близко к краю и по краю видны простые остроконусовидные одноклеточные волоски длиной 115-793 мкм с бородавчатой кутикулой, по краю они прижаты по направлению к вершине листа.
С верхнейстороны листа волоски редко встречаются по всей пластинке с частотой 0-9на 1 мм2. С обеих сторон листа видны щитковидные железки (диаметром 133250 мкм) с частотой встречаемости с верхней стороны листа 0-9 на 1 мм2, снижней – 0-13 на 1 мм2. Среди клеток эпидермиса встречаются пигментныеклетки, а вдоль жилки просвечивают секреторные ходы. В паренхиме листаимеются идиобласты, содержащие друзы оксалата кальция диаметром 2-15мкм.
Лист дорсовентрального строения. Сосудисто-волокнистый пучоквключает сетчатые и лестничные сосуды и спиральные трахеиды.Эпидермис черешка представлен вытянутыми по длине черешка клетками многоугольной (ближе к основанию листа), прямоугольной, веретеновидной и комбинированной формы с ровными или слабоизвилистыми четко-151видно утолщенными стенками.
Кутикула ровная. На эпидермисе черешкавстречаются железки и простые волоски такие же, как на листе.Рис. 1. Смородины черной листья свежие.Нижний эпидермис листа с устьицами. Ув. × 250.Рис. 2. Смородины черной листья свежие.Слева: верхний эпидермис листа. Справа: друзы в паренхиме. Ув. × 250.152Рис. 3. Смородины черной листья свежие. Простые волоски пожилкам с нижней стороны листа. Ув.
× 70 – слева; × 100 - справа.Рис. 4. Смородины черной листья свежие.Нижний эпидермис листа с железками. Ув. × 70 – слева; × 31,25.153Рис. 5. Смородины черной листья свежие.Обрывок нижнего эпидермиса с железкой. Ув. × 100.Рис. 6. Смородины черной листья свежие.Слева: обрывок нижнего эпидермиса над жилкой листа с вытянутымиклетками с четковидноутолщенными стенками.Справа: нижний эпидермис (с устьицами), включающий эпидермис наджилкой листа (с вытянутыми клетками).
Ув. × 250.154ПодлинностьПриготовление растворовПриготовление исследуемых растворов А и БАналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц 5 мм.Около 4,3 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 60 мл 70 % этанола и нагревают на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 45мин. После охлаждения до комнатной температуры фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл.
В колбу прибавляют 40мл 70 % этанола, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают в течение 15 мин. После охлаждения извлечение фильтруют через тот же фильтрв ту же мерную колбу. Объем раствора в колбе доводят 70 % этанолом дометки и тщательно перемешивают (раствор А).20 мл раствора А помещают в выпарительную чашку и упаривают накипящей водяной бане до удаления запаха спирта. Остаток разбавляют водойдо 30 мл, переносят в делительную воронку вместимостью 100 мл, прибавляют 20 мл н-бутанола и встряхивают в течение 10 мин. Водный (нижний)слой отбрасывают, бутанольное извлечение переносят в круглодонную колбуи упаривают на горячей водяной бане под вакуумом досуха.
Сухой остатокрастворяют в 2 мл 70 % этанола (раствор Б).Приготовление раствора СО кверцетина10 мг кверцетина растворяют в 20 мл этанола 96%.1. К 0,5 мл раствора А прибавляют 0,1 г порошка магния или цинка и0,2 мл кислоты хлористоводородной концентрированной постепенно образуется малиновое окрашивание (флавоноиды).2.
На линию старта аналитической хроматографической пластинки сослоем силикагеля на алюминиевой основе размером 10×15 см наносят по 10мкл СО кверцетина и 30 мкл раствора Б. Пластинку с нанесенными пробамипомещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин смесьюрастворителей н-бутанол - уксусная кислота ледяная - вода (40:10:20), хрома-155тографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет 1112 см, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следоврастворителей, опрыскивают 2 % спиртовым раствором алюминия хлорида инагревают в сушильном шкафу при температуре 100-105 0С в течение 5 мин.На хроматограмме СО кверцетина должна обнаруживаться зона желтозеленого цвета с Rf около 0,74.На хроматограмме испытуемого раствора Б должны обнаруживатьсязоны желто-зеленого цвета с Rs 1,0, 0,79, 0,64 и 0,51 (по кверцетину).Числовые показатели.
Содержание суммы флавоноидов в пересчетена рутин не менее 1,0 %, влажность не менее 60,0%, золы общей не более10,0 %, золы не растворимой в 10 % кислоте хлористоводородной не более0,5 %, органических примесей не более 0,5 %, минеральных примесей не более 0,5 %.Микробиологическая чистота. Испытания проводят в соответствии стребованиями ГФ ХIII издания, ОФС 42-0067-07 «Микробиологическая чистота».Количественное определениеПриготовление растворовПриготовление раствора РСО рутинаОколо 0,05 г (точная навеска) рутина (ГФ Х, ст.
587) предварительновысушенного при 130 -135 0С в течение 3 часов, растворяют в 90 мл 96 %этанола в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.2 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл 2 % спиртового раствора алюминия хлорида, 0,1 мл уксуснойкислоты и объем раствора доводят 96 % этанолом до метки. Через 30 мин измеряют оптическую плотность раствора с помощью спектрофотометра придлине волны 409 ± 2 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
Раствором сравнения служит раствор, состоящий из 2 мл раствора А, 0,1 мл уксусной кислоты156и доведенный 96 % этанолом до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность раствора,содержащего 1 мл раствора РСО рутина, 5 мл 2 % спиртового раствора алюминия хлорида, 0,1 уксусной кислоты, доведенный 96 % этанолом до метки вмерной колбе вместимостью 25 мл. Раствором сравнения для измерения оптической плотности РСО рутина служит раствор, состоящий из 1 мл РСО рутина, 0,1 мл уксусной кислоты, доведенный до метки 96 % этанолом в колбевместимостью 25 мл.Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:D × m × 1 × 100 × 25 × 100 × 100D × m × 5000Х = ——————————————— = ————————, гдеD0 × 100 × 25 × а × 2 × (100- W)D × а × (100- W)D – оптическая плотность испытуемого раствора;D0 – оптическая плотность РСО рутина;m – масса рутина;а – навеска сырья, граммы;W – потеря в массе при высушивании.Содержание суммы флавоноидов в листьях смородины в пересчете нарутин должно быть не менее 1 %.Тяжелые металлы.