Диссертация (1141406), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Объектами исследования служили почки и листья чѐрной смородины и НГМ из свежих и высушенных листьев.При выполнении работы были использованы физико-химические методы: ТСХ,ВЭЖХ, ГЖХ, хромато-масс-спектрометрия, спектрофотометрия. Статистическую обработку результатов исследования производили в соответствии с ГФXI. Микроскопический анализ сырья проводили в соответствии с техникой итребованиями, описанными в ГФ XI.8Публикации.
По теме диссертации опубликовано 17 научных статей,полностью отражающих содержание диссертации: из них 5 статей в журналах,включенных в перечень ведущих периодических изданий ВАК РФ.Степень достоверности результатов. Для получения результатов по качественному составу и количественному содержанию основных биологическиактивных веществ были проведены исследования по анализу девяти серий лекарственного растительного сырья. Сопоставление полученных результатов сприменением методов статистической обработки позволяет считать их достоверными.Апробация диссертации.
Основные положения диссертационной работыдоложены и обсуждены на XXIV, XXV Московских международных гомеопатических конференциях «Развитие гомеопатического метода в современной медицине» (Москва, 2014–2015), На научно-практической конференции «Современные аспекты использования растительного сырья и сырья природного происхождения в медицине» (Москва, 2014, 2015), Московской международнойконференции, посвященной «Дню Татьяны»(24-25 января 2015, Москва). Апробация диссертации состоялась на заседании Научного совета НИИ фармации икафедры фармакогнозии фармацевтического факультета ГБОУ ВПО ПервыйМГМУ им.
И.М Сеченова Минздрава России (Москва, 2015).Личный вклад автора. При непосредственном участии автора были определены цель и задачи работы, разработаны методологические подходы к ихвыполнению; был проведен сбор, обобщение и анализ литературных данных.Диссертант принимал непосредственное участие при разработке методик качественного и количественного определения БАВ в исследуемых объектах. Автору принадлежит ведущая роль в проведении экспериментальных исследований,статистической обработке и анализе полученных результатов, написании публикаций и нормативной документации. Диссертация и автореферат написанылично автором.Соответствие диссертации паспорту научной специальности.
Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.04.02 –9«фармацевтическая химия, фармакогнозия». Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам3, 6 паспорта фармацевтическая химия, фармакогнозия.Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтическойнауки. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематикой и планом: «Развитие научных и научно-методических основ, базовых и инновационных подходов при разработке, внедрении и применении лекарственныхсредств» №012012616553.Основные положения, вынесенные на защиту:Результаты морфолого-анатомического изучения и выявление диаг-ностических признаков почек и листьев чѐрной смородины.Результаты изучения качественного состава и количественного со-держания БАВ (флавоноидов, катехинов, аминокислот, углеводов, эфирногомасла, аскорбиновой кислоты) почек и листьев чѐрной смородины.Результаты стандартизации сырья (высушенных и свежих листьев)смородины черной и НГМ из данных видов сырья.Объем и структура диссертации.
Работа изложена на 147 страницахмашинописного текста, содержит 29 таблиц и 39 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, пяти глав экспериментальной части, выводов, списка литературы, включающего 165 источников, в том числе 71 на иностранных языках.Полученные результаты обработаны статистически, обобщены в таблицах, выражены в соответствующих формулах, которые приведены в работе.10ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫГлава 1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ В ОБЛАСТИФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОГО,ФИТОХИМИЧЕСКОГОИФАРМАКОЛОГИЧЕСКОГО ИЗУЧЕНИЯ ПОЧЕК И ЛИСТЬЕВ СМОРОДИНЫ ЧЕРНОЙ1.1. Ботаническая характеристикаСморо́дина чѐрная (Ríbes nígrum L.) относится к монотипному семействуКрыжовниковые (Grossulariaceae) - семейство двудольных цветковых растенийпорядка Камнеломкоцветные.
Род Смородина (Ribes) содержит около 190 видов, в России имеется свыше 30 сортов.Рис. 1. Внешний вид листьев, плодов и цветков Ribes nigrun L.[http://mag.org.ua/rast/trava508.html]Смородина представляет собой многолетний кустарник высотой 1-2 м.Побеги желтовато-серые, опушенные. Ветви покрыты темно-бурой или краснокоричневой корой. Почки бледно-зеленые. Листья очередные, черешковые, покраю пильчатые или зубчатые, 3-5 пальчато-лопастные, с 3-5 острыми лопастями до 10 см ширины, средняя доля более крупная. Листья с верхней сторонытемно-зеленые, с нижней стороны светлее, с опушением по жилкам, имеют11ароматный специфический запах.
Цветки мелкие, обоеполые, лилового или розовато-серого цвета, 7-9 мм длины, ширококолокольчатые с 5 отогнутыми чашелистиками, 5 тычинок, венчиком из 3 лепестков, пестика с нижней 1 гнездной завязью. Цветки собраны по 5-10 в поникшие кисти, цветоложе колокольчатое. Плод - сферическая многосеменная голая ягода, черного, темнолилового, темно-красного или буроватого цвета до 10 мм. Цветет в мае-июне,плодоносит в июле-августе [5, 9, 16, 18, 20, 28, 39, 40, 44, 82, 88].1.2.
Места обитания, ареал, заготовка сырьяКак дикорастущее растение смородина черная распространена в европейской части России, на Урале, в Западной и Восточной Сибири [25], в ЗападнойЕвропе, Казахстане, Украине, Белоруссии [26], Монголии, Китае. Кусты смородины предпочитают увлажненные места по берегам рек и озер, могут образовывать большие заросли.Смородина черная введена в культуру как ягодное растение еще в средние века.
В настоящее время она широко культивируется как в нашей стране[24], так и на Украине, в Белоруссии, Прибалтике, а также странах ЗападнойЕвропы и Северной Америке, это одна из самых распространенных ягодныхкультур как в промышленных садах, так на приусадебных участках.Размножается смородина вегетативно, в том числе делением куста, укоренением пригнутых к почве ветвей и корневыми отпрысками.
Семенное размножение применяется только при селекции.Лекарственным сырьем черной смородины служат плоды, листья и почки.Плоды созревают в июле-авгуте, их собирают в сухую погоду по мере созревания. Ягоды сортируют, очищают от примесей и сушат, расстилая тонким слоемна подстилке или рамах, обтянутых марлей или при температуре 35-40˚С, затем55-60˚С.Листья заготавливают летом с начала цветения до листопада, сушат навоздухе в тени.
Почки заготавливают зимой или ранней весной. Ягоды и листьяхранят в мешочках или деревянной таре. Почки консервируют этанолом. Срокхранения сырья - 1 год [9, 44, 48, 53, 88, 89, 92].121.3. Химический составПлодыОфицинальным сырьем черной смородины являются плоды, используемые в качестве поливитаминного средства. Химический состав плодов изучендостаточно хорошо. Плоды содержат витамины, в том числе: аскорбиновую кислоту (в зрелых плодах до 50 мг%), витамины P, В1, B2, B6, каротины, токоферолы, витамины группы К.
Содержание витамина Р в ягодах черной смородинычасто превышает 1%. [44, 87, 89, 94, 151].В плодах содержатся сахара (от 4,5 до 16,8 мг/%, в основном глюкоза ифруктоза) и органические кислоты (до 4%, яблочная, винная, янтарная, лимонная, никотиновая - 2,28%), содержат калий 365 мг в 100 г, железо - 10,9 мг в 100г, соли кальция, магния, фосфора и натрия, микроэлементы (B, Mn, Zn, Mo, Co,Cu, Fe, Y) [11], белки - 1% [59], пектиновые вещества - 0,38-1,5% [59], дубильные - 0,39-0,43%, гликозиды, эфирное масло [53, 58, 83]. В плодах смородиныприсутствуют антоцианы [140, 141], основные из которых: дельфинидин-3-Оглюкозид, дельфинидин-3-О-рутинозид, цианидин-3-О-глюкозид и цианидин-3О-рутинозид [126].В спелых ягодах черной смородины найдены флавоноиды. Основнымифлавоноидными гликозидами являются: мирицетин 3-β-D-глюкопиранозид, рутин и изокверцитрин, также доказано 3-рутинозидов и 3-глюкозидов цианидинаи делmфинидина.
Выделены также сложные эфиры гидроксикоричные кислот:1-О-каффеил-β-D-глюкопираноз,1-О-феруил-и1-О-п-кумарил-β-D-глюкопираноза, гидроксициннамил-D-глюкоза [118, 121, 129, 155].Семена черной смородины содержат жирное масло, в его составе триглицериды двух октадекатриеновых кислот: α- и γ-линолевых, которые составляют11-16% от всего количества жирных кислот, и тетраеновой кислоты - стеаридоновой [94]Листья и почкиПо литературным данным листья черной смородины содержат несколькоклассов биологически актвных веществ: эфирное масло, дитерпены, протоанто-13цианидины, углеводы, витамины (аскорбиновую кислоту), флавоноиды [54,127].Особый аромат листьев обусловлен наличием эфирного масла, содержание которого составляет 0,02%. В различных публикациях приводятся несколько отличающиеся данные, как по качественному, так и количественному составу масла. Это обусловлено, по-видимому, различными источниками получениясырья.
В составе эфирного масла найдены: Δ3-карен (18,7%), β-кариофиллен(12,9-17,7%), сабинен (11,6%), α-терпинолен (10,6%), цис-β-оцимен (10,6%), αпинен (1,5%), Δ2-карен, п-цимен-8-ол, линалоол, гераниол, лимонен, α- фелландрен, β-фелландрен, метилсалицилат, бензальдегид, метилэтилбензоат, циссабинен гидрат, цис-β-оцимен, транс-β-оцимен, алло-оцимен, 1-октен-3-ол, βмирцен, α-терпинен, γ-терпинен, п-цимен, о-цимен, ундекан, транс,транс-2,6диметил-1,3,5,7-октатераен, транс-эпокси-оцимен, терпинен-4-ол, α-терпинеол,нерол, борнилацетат, δ-елемен, β-елемен, γ-елемен, α-терпинил ацетат, βбурбонен, α-гумулен (10,2%), аллоаромадендрен, γ-мууролен, α-мууролен, гермакрен D, гермакрен B, гермакрен D-4-ол, β-селинен, бициклогермакрен,транс,транс-α-фарнезен, δ-кадинен, гедикариол, кариофиллен оксид (10,6%),гумулен эпоксид-II, гелифолен-12-ал, τ-кадинол, α-кадинол, 14-гидрокси-цискариофиллен, эудесма-4(15),7-диен-1β-ол, аморфа-4,9-диен-2-ол, фитол, 4метокси-2-метилбутан-2-тиол, 2-цианобутан-3-ол, 2-циано-(Z)-2-бутен-1-ол, 2циано-(E)-2-бутен-1-ол [54, 95, 110, 128, 131].Листья содержат несколько групп полифенольных соединений, в томчисле проантоцианидины и цианидины [144].
Найдены: катехин, эпикатехин,галлокатехин, эпигаллокатехин, галлокатехин -(4a->8)- галлокатехин, галлокатехин -(4a->8) эпигаллокатехин, галлокатехин -(4a->8)-катехин, галлокатехин (4a->6)-галлокатехин, галлокатехин-(4a->8)- галлокатехин -(4a->8)- галлокатехин; дельфинидин-3- О –глюкозид, делфинидин-3-О-рутинозид, цианидин-3О–глюкозид, цианидин-3- О-рутинозид [158, 159].Основным классом биологически активных соединений листьев чернойсмородины являются флавоноиды. Флавоноиды используются в контроле каче-14ства сырья для качественного и количественного определения [148]. В листьяхсодержатся гликозиды кверцетина, кемпферола, мирицетина, и изорамнетина[100, 115, 123, 143, 152, 165].Флавоноиды содержатся во всех частях растения.
В листьях найдены иидентифицированыфлавоноиды:кемпферол-3-0-(6"-0-малонил)-6-D-глюкопиранозид, кемпферол-3-О-галактозид, кемпферол-3-О-глюкозид, гиперозид, изокверцитрин [152], мирицетин малонилглюкозид, мирицетин малонилглюкозид (изомер), кверцетин-3-О-рутинозид, кверцетин-3-О-галактозид,кверцетин-3-О–глюкозид, кверцетин-3-6-малонил-глюкозид, кемпферол-3-Орутинозид, кемпферол-3-О–глюкозид, изорамнетин-3-O-рутинозид, изорамнетин-3-O-глюкозид, кемпферол-малонилглюкозид, кемпферол-малонилглюкозид(изомер) [161.], кемпферол-3-О-глюкозил-6′′-ацетат, кемпферол-3-О-галактозид[102].Имеются данные, что содержание отдельных соединений из группы полифенолов зависит от времени сбора листьев. Например, содержание нескольких соединений было самой высокой в июне, в то время как кверцетинглюкозид, кемпферол-глюкозид и общее содержание фенолов, увеличилась кконцу сезона.