Диссертация (1141296), страница 16
Текст из файла (страница 16)
Так в концентрации«Жэтривис» 4,0 мг/мл скорость ферментативной iNOS–реакции снижалась до3,1% от контроля, что более чем в 20 раз превосходит результат Ротокана. В104концентрации 2,0 мг/мл «Жэтривис» снижал скорость iNOS– реакции до 9,1%,что превышает эффект Ротокана в 8,5 раз, а в концентрации 1,0 мг/мл до 45,2%,т.е. в 2 раза выше по сравнению с Ротоканом.Таким образом, по угнетению скорости ферментативной реакции,катализируемойiNOS,подтвержденоналичиепротивовоспалительнойактивности БАС целевого фрагмента метаболома I.viscosа, входящих в составразработанногопрепаратапротивовоспалительнойэкспериментального«Жэтривис».активностиобразца,всодержаниеСогласновыявленнойрабочихконцентрациях«Жэтривис»всоставеаппликационной ЛФ для местного применения должно быть около 1,0-1,5 %.4.2.3 Установление противовоспалительной активности «Жэтривис» invivo на модели острого воспаленияУстановление противовоспалительной активности in vivo проведено намодели«острогоформалиновогоотекалапы»умышейпривнутрижелудочном введении «Жэтривис».
Согласно методике, описанной вглаве 2, препаратом сравнения являлся используемый ранее «Ротокан».Результаты эксперимента по изучению противовоспалительной активности намодели экссудативной фазы острого воспаления при трехкратном введенииприведены в таблице 4.9.Таблица 4.9 - Влияние «Жэтривис» на течение экссудативной фазы воспаленияу мышей при трёхдневном введении.ПрепаратПриростобъемаэкссудатанапикевоспаления, мг,Противовоспалительныйэффект% к контролюКонтроль(вода дист.) n=1097,77±12,06-«Жэтривис»10 мг/кгn=1082,71±9,9615,4%«Жэтривис» 100 мг/кгn=1062,0±1,38*36,58%105Ротокан 1000 мг/кгn=1083,14±2,14*15,0%Примечание: *- различия статистически достоверны по сравнению сконтролем при р≤0,5Как видно из данных таблицы 4.9, образец «Жэтривис» в дозе 10 мг/кгпри трёхдневном введении обладает противовоспалительным эффектом. Онподавляет развитие экссудативной фазы воспаления, вызванного формалином,уменьшая отёк на 15,4%, по сравнению с контрольной группой животных, чтосопоставимо с противовоспалительным эффектом препарата сравненияРотокан, но в дозе, превосходящей в 100 раз, т.е.
1000 мг/кг в.В дозе 100 мг/кг при трёхдневном введении «Жэтривис» обладаетдостоверным противовоспалительным эффектом, он подавляет развитиеэкссудативной фазы воспаления, вызванной формалином, уменьшая отёк на36,58%, по сравнению с контрольной группой животных.По результатам изучения противовоспалительной и антимикробнойактивности «Жэтривис» определены диапазоны возможно содержания его вкачестве активного компонента в составе аппликационных ЛФ для местного инаружного применения.4.3. Разработка состава и технологии аппликационной лекарственнойформы с экстрактом травы I.viscosa «Жэтривис-гель»На основании полученных данных в опытах in vivo и in vitro установленоналичие выраженной антимикробной и противовоспалительной активностиразработанного препарата «Жэтривис», что свидетельствует о возможностиразработки его аппликационной формы гель.4.3.1.
Разработка состава аппликационной формыРазработка состава аппликационной формы с экстрактом I.viscosaпредполагала выбор марки полимера РАП, установление концентрации дляконкретного загустителя. Принимая во внимание, что экстракт содержит неменее 48 мас% спирта, необходимо обеспечить устойчивость дисперсной106системы и поддержать БАС в растворенном виде, не допуская конденсации вприсутствии водной гелевой основы РАП. Использование спиртов в качествесорастворителей позволит получить ЛФ «Гель» и не должно негативно влиятьна вязкостные характеристики приемлемые для нанесения на поврежденнуюкожу (80-120 Пахс, при 9 об/сек). [38]Для получения гелевой основы препарата «Жэтривис» использовалиредкосшитые акриловые полимеры – РАП.
Гели на основе РАП являютсяосновой большинства современных аппликационных средств, используемыхкак для трансдермальной подачи ЛВ (НПВС – Нимулид гель, Найз гель,антигистаминных – Фенистил и др.), так и для лечения первой фазы раневогопроцесса (Фурагель).Модельные составы образцов гелей с Жэтривис для выбора РАПосновообразователя представлены в таблице 4.10.Таблица 4.10 - Составы образцов гелей с Жэтривис на основах различныхмарок РАПКомпонентыАресполСarbopol ETD 2001Сarbopol ETD 2020Сarbopol ultrez 10Сarbopol 934ТрометамолЖэтривисВода очищеннаяВнешний видДинамическаявязкость при 9 об/с,Па х сСогласноСоставы, содержание компонентов %123456789101,01,50,51,00,51,00,51,00,51,0До рН 6,5-7,510,0 10,010,0 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0 10,010,0До 100,0Результат экспертной оценки составовНе прозрачная однородная масса буро-зеленого цвета, вязкостьзависит концентрации полимера25±1,0100±4,035±1,4представленным80±3,2в30±1,2таблице80±3,236±1,44.1080±3,2данным40±1,680±3,2выявленавозможность достижения приемлемой вязкости для гелей в присутствииЖэтривис с использованием Сarbopol ETD 2001, Сarbopol ETD 2020, Сarbopolultrez 10, Сarbopol 934 при содержании полимера 1,0% (образцы 4, 6, 8, 10),сопоставимую вязкость дает содержание Ареспола 1,5% (образец 2).107Дальнейшие эксперименты, было решено проводить с использованием РАПмарки Ареспол, как наиболее доступной и дешевой.
Ключевым недостатком,по нашему мнению, является помутнение гелей после добавления Жэтривис,что диктует технологическую необходимость введения сорастворителей.Разработкасоставагеляпредполагает выбор марки полимера,установление рабочей концентрации РАП в присутствии действующеговещества, а также изучение влияния различных ВВ, в частности спиртовглицерина, ПГ и ПЭО-400. Присутствие спиртов в составе различныхдерматологических гелей позволяет оказывать однонаправленное с ЛВдействие на составляющие патологического процесса и обеспечиватьфизическую, химическую стабильность действующих веществ, а также придостаточном количестве и микробиологическую чистоту ЛПВтаблице4.11представленырезультатыизучениявлияниясорастворителей на вязкость и внешний вид гелей.Таблица 4.11 - Составы образцов гелей с Жэтривис на основе Ареспол 1,5%КомпонентыАресполТрометамолГлицеринПГСпирт(70%)ПЭО-400ЖэтривисВодаочищенная21,5111,5-10-1010Составы, содержание компонентов %121314151,51,51,51,5До рН 6,5-7,501002010101010101010101010До 100161,5171,510201010101010Результат визуальной оценки составовВнешний видМазеобразнаямассабурозеленогоцветаДинамическаявязкость при 9об/с, Пахс100±4,0Выраженныеэмульсионные (непрозрачные) системыбуро-зеленого цвета90±3,690±3,680±3,2Гелевые системы среднейопалесценциибуро-зеленого цвета40±1,660±2,450±2,080±3,2108Глицерин в составе дерматологических мазей оказывает увлажняющеедействие и повышает комфортность применения, препятствует высыханиюЛФ.
ПГ является промотором всасывания и используется в составеаппликационных ЛФ в концентрации до 60%. ПЭО-400, как осмотическиактивный компонент актуален в составах, предназначенных для леченияпервой фазы раневого процесса с экссудатом и риском инфицирования.Учитывалибиофармацевтическуюрольсорастворителей.Критериямиприемлемости считались удовлетворительный внешний вид – прозрачныйоднородный гель со слабой опалесценцией и динамическая вязкость вдиапазоне 80-120 Пахс, при 9 об/сек. Представленные в таблице 4.11результаты свидетельствуют о негативном влиянии спиртов на динамическуювязкость образцов гелей при содержании Ареспола 1,5%.
Одновременносуммарное содержание спиртов (ПГ, ПЭО-400 и глицерина) от 10 до 30индивидуально и в комбинациях не позволяет добиться полученияпрозрачного, не опалесцирующего геля. Ведение спирта этилового 70%позволяет повысить прозрачность, но приводит к резкому разжижению(образец 14), что исключило его из состава образцов. Наиболее удачным посовокупности выбранных критериев признан образец 17.Повышение содержания Ареспола до 2,0% повысило вязкость образцовгелейиодновременносодержаниеспиртовдо35-40%результатыпредставлены в таблице 4.12.Таблица 4.12 - Составы образцов гелей с Жэтривис на основе геля Ареспола2,0%Составы, содержание компонентов %КомпонентыАресполТрометамолГлицеринПГПЭО-400Жэтривис182,0192,015151020201020212,02,0До рН 6,5-7,510530301010222,0232,0530105151510109ВодаочищеннаяДо 100Результат визуальной оценки составовВнешний видОпалесцирующий гельПрозрачный гель спузырькамиПрозрачныйжидкийгель спузырькамиДинамическаявязкость при9 об/с, Пахс65-7045±1,830±1,2Гель слёгкойопалесценциейНеоднородный гельОднородный гель слёгкойопалесценцией буро-зеленогоцвета70±2,885±3,485±3,4Как видно из результатов эксперимента, представленных в таблице 4.12.образец 23, с содержанием спиртов 35%, вполне соответствовал критериямвязкости и был более прозрачен относительно других образцов.Также представляло интерес установить влияние самого экстракта навнешний вид и вязкость гелевой формы.
В таблице 4.13 отражены результатыподбора концентрации Ареспола 1,5% или 2,0 %, экстракта 5,0%, 8,0%, 10,0%и спиртов 20-40%.Таблица 4.13 - Составы образцов гелей с Жэтривис и различным содержаниемполимера и спиртовКомпонентыАРЕСПОЛТрометамолГлицеринПГПЭО-400Спирт 40%ЖэтривисВодаочищеннаяВнешний видДинамическаявязкость при 9об/с, Пахс241,51,55251,51,51010105Составы, содержаниекомпонентов %2627282,02,02,02,02,02,0551015155155810292,02,052058302,02,01520108До 100Результат визуальной оценки составовОпалесНеНецирую Относиоднород однородщийтельно Прозрач Прозрачный, сный, сПрозрачодноро прозрач ный гель ный гель лёгкойлёгкой ный гельдныйныйопалесце опалесцегельнциейнцией70±2,885±3,4160±6,4100±4,0180±7,2180±7,2100±4,0110Полученныерезультаты,втаблице4.13позволяютсчитатьприемлемыми по внешнему виду образцы 26, 27 и 30.В целом, проведенные эксперименты по подбору состава геля Жэтривис,свидетельствуют о широких возможностях по получению аппликационныхЛФ на основе РАП и требуют дальнейшего углубленного обоснованиясоставов для различных терапевтических задач.Для дальнейшей работы в ходе настоящего исследования был выбрансостав (образец 17) аппликационной формы на основе Ареспола 1,5% исодержанием Жэтривис, глицерина, ПГ и ПЭО-400 по 10%.Состав «Жэтривис-гель» на 100,0 гКомпонентыЖидкий экстракт I.viscosaАреспол (ТУ 2219-005-29053342-97)Трометамол (ЛСР-001567/08-140308, 2008)Глицерин (ФС.2.2.0006.15)Пропиленгликоль (Ph.Eur.)Полиэтиленгликоль-400 (ТУ 2483-007-71150986-2006)Вода очищенная (ФС.2.2.0020.15)Содержание, г10,01,5До рН 6,0-7,010,010,010,0до 1004.3.2.
Разработка технологии «Жэтривис-гель»Технологическая схема получения «Жэтривис-гель», представленная нарисунке 4.3, согласно современным требованиям организации производства,включает подготовительный и производственный этапы.На подготовительном этапе предусмотрены вспомогательные работы:получениеводыочищеннойисанитарнаяподготовкапроизводства(подготовка производственных помещений, персонала, оборудования). Такженеобходима подготовка сырья и отвешивание компонентов.Для получения «Жэтривис-гель» необходимо подготовить действующеевещество и вспомогательные компоненты основы.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
