Главная » Просмотр файлов » Диссертация

Диссертация (1140928), страница 13

Файл №1140928 Диссертация (Репаративные и предраковые процессы при ВПЧ-ассоциированной патологии шейки матки) 13 страницаДиссертация (1140928) страница 132019-05-31СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 13)

Раковые СЭМС построены израковых клеток и характеризуются высокой экспрессией маркера пролиферацииKi67, онкомаркеров р16, C-MYC, р53, маркеров стволовости ALDH1, CD34, Vim,и маркера гипоксии HIF-1.В неопластических и раковых СЭМС определяются атипичные клетки,экспресирующие одновременно онкомаркеры и маркеры стволовости.С целью создания групп было проведено клинико-морфологическоеисследование материала от 4672 женщин в возрасте от 17 до 56 лет (средний115возраст 36,5±4.5 лет), проходивших обследование и лечение в ФГБУ «Научныйцентр акушерства, гинекологии и перинатологии им.

академика В.И.Кулакова»Минздрава РФ в 2013, 2014 и 2015 годах. Обследование всех 4672 женщинпроводили по общепринятому протоколу - клинический осмотр, взятие мазков вSurePath виалы (BD, США), приготовление цитологических препаратов,окрашенных по Папаниколау, с помощью TriPath процессора (BD, США), оценкамазков по системе ―Bethesda‖ [114]. В результаты были отобраны 3 группыженщин:1) 91 женщина для оценки эффективности ВПЧ-тестирования методом ПЦР-НВи жидкостной цитологии при выявлении ВПЧ-ассоциированной цервикальнойпатологии у женщин до 30 лет и старше.2) 148 женщин для оценки эффективности комплекса методов: жидкостнойцитологии, двойного иммуноокрашивания p16/Ki67 и ВПЧ-тестированияметодом ПЦР-НВ при ВПЧ-ассоциированной цервикальной патологии.3) 61 женщина для изучения морфологических и иммуногистологическихособенностей СЭМС разных видов.Ткань фиксировали в 10% нейтральном формалине, готовили серийныепарафиновые срезы, которые окрашивали гематоксилином и эозином ииспользовали для иммуногистохимических реакций по общепринятым методикам(Петров С.В., Райхлин Н.Т., 2004), В качестве первичных антител применялисьмоноклональные антитела к онкомаркерам -- P53 (RTU, клон DO-7 RTU,N158187-2, DAKO), C-Myc (clone Y69, Abcam), антитела для двойной окраски116p16/Ki67 (CINtec PLUS cytology kit, Рош); антитела к маркерам гипоксии иангиогенеза -- HIF1-alpha (клон 241812, R&D Systems), VEGF (clone EP1176Y,ab52917, Abcam), к маркерам стволовости - Oct-4 (MRQ-10, 309M-15,CELLMARQUE CORPORATION), Aldh1A1 (clone EP1933Y, cat.

GTX61645, GeneTex),CD34 (Class II, clone QBEnd 10, DAKO), Vimentin (clone V9 RTU, DAKO), а такжеNF-kB (cloneE379, Abcam). Ядра докрашивали гематоксилином. Ставилисьположительные и отрицательные контрольные реакции. Результаты оценивали поколичеству окрашенных эпителиальных клеток СЭМС и прилежащего плоскогоэпителия в процентном соотношении из расчета на 300 клеток. Статистическаяобработка накопленных данных, их группировка, построение графиков идиаграмм проводилась при помощи пакета статистических программ IBM SPSSStatistics 23.0 и Microsoft Excel 2010. Морфометрическое исследование проведенос помощью программы CellSens Standard. Для оценки эффективности методовиспользовался ROC-анализ.

Для поиска связей между показателями использоваликоэффициент корреляции Пирсона и коэффициент ранговой корреляции Спирмена,для сравнения показателей в группах использовали непараметрический критерийМанн-Уитни. Различия считали статистически достоверными (статистическизначимыми) при р.<0,05.На первом этапе оценивалась диагностическая значимость ВПЧ-тестированияметодомПЦР-НВ,жидкостнойцитологииприВПЧ-ассоциированнойцервикальной патологии у женщин до 30 лет и старше.

Обследовалицитологический, биопсийный и операционный материал от 91 пациентки, из117которых 35 женщин были в возрасте до 30 лет и 56 пациенток старше 30 лет.Использовались методы ПЦР-НВ, жидкостной цитологии, гистологии и ИГХр16(INK4A)/Ki67. Эффективность выявления ЦИН2+ у пациенток до 30 лет истарше30летсиспользованиемчувствительность - 81,8% и 90,5% ,ДНКВПЧ-тестированиясоставила:специфичность - 30,4% и 47,2 %; сиспользованием жидкостной цитологии: чувствительность - 65,5% и 71,4%,специфичность - 100,0% и 97,2 %.На втором этапе оценивалась эффективность двойного окрашивания p16/Ki67в сочетании с жидкостной цитологией и ВПЧ тестированием при выявлениицервикальнойинтраэпителиальнойнеоплазиишейкиматки.Обследовалицитологический и биопсийный материал 148 женщин с патологией шейки маткиметодами жидкостной цитологии, ИЦХ с двойной окраской р16/Ki67 иВПЧ-тестирования.

Максимальная эффективность цитологического метода былавыявлена при диагностировании ЦИН ≥ II (чувствительность 95,31% испецифичность 100%), ВПЧ-тестирования - ЦИН <II (97,14%, 50,0%), ЦИН ≥ II(98,48%, 100,0%), ИЦХ – при диагностировании хронического цервицита (92,68%,100,00%), ЦИН<II (94,73%, 100,00%), ЦИН ≥ II (98,48%, 100,00%).На третьем этапе изучались морфологические и иммунофенотипическиеособенности СЭМС при ВПЧ-ассоциированном плоскоклеточном предраке и ракешейки матки.

Проводилось гистологическое исследование материала от 61пациентки с цитологической и ПЦР диагностикой ВПЧ-ассоциированнойпатологии шейки матки: хроническом цервицитом (15 женщин), ЦИН<II (12118женщин),ЦИН≥II(25женщин)имикро-инвазивнойплоскоклеточнойкарциномой шейки матки (9 женщин).В ходе гистологического и ИГХ исследований были выявлены разные видыСЭМС. СЭМС были идентифицированы при ИГХ реакции по экспрессии Oct-4,экспрессия этого маркера наблюдалась во всех клетках сфероидов.По структурными особенностями и экспрессии биомаркѐров СЭМС былиразделены на три вида: репартивные, неопластические, раковые.Репаративные СЭМС формировались вблизи и на территории акантотическихтяжей вокруг сосудов, имели небольшие размеры и состояли из крупныхэпителиальных клеток типа базальных.

Обнаруживались СЭМС 1 вида, прихроническом цервиците и ЦИН<II. При морфометрическом исследованиирепаративные СЭМС имели наименьший размер, их средняя площадь составила1141.1±305.0 mkm2. При двойной окраске p16/ Ki67, эпителиальные клеткирепаративных СЭМС экспрессировали только Ki67 в 20% клеток и не содержалир16. В эпителиальных клетках репаративных СЭМС не выявлялась экспрессияр53 и CD34, но экспрессия CD34 были выявлены в цитоплазме эндотелиальныхклеток капилляров в центре СЭМС, а также в эндотелии сосудов подслизистогослоя.ОбнаруживаласьэкспрессияHIF-1в25%эпителиальныхклетокрепаративных СЭМС, VEGF - в 35%, C-MYC - в 30%, Vim - в 40% и ALDH1 - в0.25%.Неопластические СЭМС имели более крупные размеры, в центре не всегдаопределялись сосуды, в составе СЭМС имелись эпителиальные клетки с119признаками атипизма.

Они обнаруживались при ЦИН<II, ЦИН≥II, а также примикроинвазивной карциноме в окружающей ткани. При морфометрическомисследовании неопластические СЭМС имели большие размеры по сравнению срепаративными (Р.<0/001), их средняя площадь составила 2553.9±656.2 mkm2.При двойной окраске p16/ Ki67 в эпителиальных клетках неопластических СЭМСнаблюдалась экспрессия одновременно двух маркеров в 40% клеток. ЭкспрессияC-MYC определялась в 45% эпителиальных клеток СЭМС, р53 - в 10%, HIF-1 - в60% и VEGF - в 50%, ALDH1 - в 30%, и Vim - в 70%.

В эпителиальных клеткахнеопластических СЭМС экспрессия CD34 не определялась.Раковые СЭМС имели крупные размеры, часто сливались между собой и былиобразованыатипичнымираковымиклетками.Приморфометрическомисследовании раковые СЭМС обладали наибольшими размерами по сравнению срепаративными и неопластическими СЭМС - 7308.7±3031.3 mkm2 (Р<0/001) инередко сливались друг с другом. Раковые СЭМС обнаруживались примикроинвазивной карциноме. При двойной окраске p16/ Ki67 в клетках СЭМС 3вида одновременная экспрессия p16/ Ki67 выявлялась в 72.5% атипичныхэпителиальных клеток, C-MYC - в 55%, р53 - в 70%, HIF-1 - в 70% и VEGF - в92,5%. В наблюдаемых нами случаях, обнаруживалась диффузная экспрессияALDH1 в 40% клетках раковых СЭМС и Vim - в 75%.

При микроинвазивнойкарциноме, экспрессияCD34была выявленане тольков цитоплазмеэндотелиальных клеток, а в 50% эпителиальных клеток раковых СЭМС.120ВЫВОДЫ1. Проблему диагностики и скрининга предрака и рака шейки матки можноэффективно решить за счет использования комплекса методов – жидкостнойцитологии, ВПЧ тестирования и ИЦХ с двойной окраской р16/Ki67,чувствительность и специфичность которых возрастает до 98,48% и 100%соответственно.2.

Ранняя диагностика патологии шейки матки, ассоциированной сВПЧ,должна базироваться на возрасте женщин. У женщин моложе 30 летобследование должно начинаться с жидкостной цитологии, старше 30 лет – сВПЧ-тестирования.3. КанцерогенезиморфогенезВПЧ-ассоциированнойплоскоклеточнойкарциномы шейки матки связан с последовательным развитием структурныхизменений, характеризующихся образованием Оct4-позитивных репаративных,неопластических и раковых СЭМС.4. Репаративные СЭМС встречаются при хроническом цервиците и ЦИН<II,средняя площадь их составляет 1141.1±305.0mkm2, они формируются вблизи ина территории акантотических тяжей вокруг сосудов. Характеризуютсяотсутствием клеточного атипизма, отсутствием экспрессии р16, р53, CD34, атакже низкой экспрессией маркера пролиферации Ki67, маркера стволовостиALDH1, и умеренной экспрессией C-MYC,Vim и маркера гипоксии HIF-1.5.

Неопластические СЭМС, средняя площадь которых составляет 2553.9±656.2mkm2, встречаются при ЦИН<II и ЦИН≥II и формируются вне зависимости от121расположения сосудов, их клетки характеризуются признаками клеточногоатипизма, отсутствием экспрессии CD34, низкой экспрессией онкомаркера р53,умеренной экспрессией маркера пролиферации Ki67, онкомаркеров р16,маркера стволовости ALDH1 и высокой экспрессией C-MYC, Vim, маркерагипоксии HIF-1.6. Раковые СЭМС обнаруживаются при микроинвазивной карциноме, их средняяплощадь составляет 7308.7±3031.3 mkm2. Раковые СЭМС формируются внезависимости от расположения сосудов, построены из раковых клеток, нередкосливаются в крупные конгломераты, характеризуются высокой экспрессиеймаркера пролиферации Ki67, онкомаркеров р16, C-MYC, P53, маркеровстволовости ALDH1, CD34, Vim, и маркера гипоксии HIF-1.7.

Характеристики

Список файлов диссертации

Репаративные и предраковые процессы при ВПЧ-ассоциированной патологии шейки матки
Свежие статьи
Популярно сейчас
Как Вы думаете, сколько людей до Вас делали точно такое же задание? 99% студентов выполняют точно такие же задания, как и их предшественники год назад. Найдите нужный учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6358
Авторов
на СтудИзбе
311
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее