Автореферат (1140885), страница 3
Текст из файла (страница 3)
С., 1985).12Измерение31параметрапроводилосьспомощьюнониусногоштангенциркуля с ценой деления 0,1 мм и транспортиром (для измерения углов).Все наружные размеры, а также толщину рогов и пластинок определяли путемприкладывания губок штангенциркуля для наружных измерений к дистальнымконцам, основаниям рогов или к середине рогов для измерения их толщины.Измерение внутренних размеров поводили по крайним внутренним точкамверхних, нижних рогов ЩХ.
Величина угла соединения пластинок ЩХ допересечения перстне-щитовидных суставов и отделения щитовидного хряща отостального органокомплекса была определена с помощью транспортира и двухлинеек.Рентгенологический методБыли исследованы 130 рентгенограмм ЩХ лиц мужского пола различноговозраста. Исследование проводилось в передней проекции, при помощи рентгенаппарата SRI, модель SR-130 SDU при следующих параметрах: KVP-40, MAS-0,7,TIME-0,05, L-86 cm, с записью результатов в графические файлы формата DICOMспоследующейконвертациейвjpgформат.Полученноеграфическоеизображение рентгенограммы ЩХ исследовалось с помощью программыграфическогоанализаизображений(AdobePhothoshopCS6).Алгоритмисследования включал определение следующих параметров: общей площади ЩХ,вычисление площади костной и хрящевой ткани в процентах и их соотношениеотносительно друг друга на рентгенограмме.Гистологический методОбъектом для микроскопического исследования явились фрагменты ЩХ.Перед изъятием проводили его внешний осмотр с изучением макроскопическихпризнаков, далее осуществляли скелетирование и отслойку надхрящницы споследующим забором части правой пластинки, размерами до 1,5 см.
Фрагментыфиксировали в 10%-м растворе нейтрального формалина, декальцинировалираствором азотной кислоты, подвергали стандартной гистологической проводке и13заливали в парафин по общепринятой методике (Д. С. Саркисов и др., 1996). Изблоков изготавливали срезы толщиной 5 – 7 мкм с последующей окраскойгематоксилином и эозином.
При помощи микроскопа «Биолан Ломо», «Leica DM1000», объектива «Leica HIPLAN 10x/0.25», «HIPLAN 20x/0.10» изучалиполученные микропрепараты. На каждом препарате производили качественное иколичественное исследование. Срезы документировались с использованиеммикроскопа Leica DM2500 с цифровой камерой с матрицей 5МПикс.
Дальнейшиеколичественные морфомерические измерения проводили с использованиемграфического редактора (Adobe PhotoShop СS6) и программного комплексаMegamarph12 (ГистоЛаб, Москва, Россия). Морфометрическое исследованиепроводилось в соответствии с имеющимися рекомендациями (Автандилов Г. Г.,1980, 1992; Федулова М.В., 2004; Волков А.В. и др., 2013, 2014, 2016; DempsterD.W. и др., 2013).
В каждом объекте в трех полях зрения микроскопа с пропуском2 – 3 поля зрения осуществляли измерение таких параметров, как: площадькостной ткани, площадь хрящевой ткани, средняя площадь костной ткани в полезрения, средняя площадь хрящевой ткани в поле зрения, средняя ширинахрящевой пластинки, толщина кортикальной пластинки, количество трабекул впрепарате и в поле зрения микроскопа, средняя площадь трабекул, средняя длинатрабекул, максимальная толщина трабекул, минимальная толщина трабекул,средняя толщина трабекул, количество молодых хондроцитов, количество зрелыххондроцитов, ширина зоны молодого хряща, ширина зоны зрелого хряща,соотношение зон зрелого и молодого хряща, площадь ретикулярной и жировойткани и их соотношение.Статистические методыСтатистическая обработка полученных данных выполнена с помощьюпрограммы Microsoft Excel и IBM SPSS Statistics 21 с применением методаописательнойстатистики(среднееотклонение,стандартноеотклонение,процентное распределение), метода параметрической статистики с последующим14построением регрессионной модели диагностики возраста.
Результаты сравненийсчитались достоверными при уровне значимости р <0,05.Результаты исследования и их обсуждениеВ результате антропометрического исследования и измерения 31метрического параметра были получены данные о половых особенностях егостроения. Максимальное значение коэффициента корреляции метрическихпараметров ЩХ и возраста было у показателей ширина правой и левой пластинокснизу (r=0,4) и длина линии смыкания пластинок (r=0,4); эти показатели имелиформально достоверные, но слабые связи. При дальнейшем сравнении исопоставлении полученных значений обратили внимание на сильную зависимостьрядапараметровотполовойпринадлежностиобразца.Врезультатестатистической обработки были выделены наиболее значимые параметры: уголсмыкания пластинок (r=0,9), ширина и высота правой и левой пластинок (r=-0,8),позволяющие отнести образец к определенному полу.
Все остальные 28 размеровпо коэффициенту корреляции имели сильную или среднюю силу связи. При этомразмеры нижних рогов с обеих сторон имели наименьший коэффициенткорреляции с полом (-0,283 и -0,328). Антропометрическое исследование ЩХпоказало наличие наиболее значимого гендерного различия – углов смыканияпластинок ЩХ и размеров пластинок. Полученные результаты подтвердилипредставление о гендерном отличии ЩХ, но не нашли оснований дляутверждения о возрастной изменчивости его метрических параметров.При изучении рентгенограмм ЩХ обнаружено, что в возрасте до 18 летЩХ представлен только хрящевой тканью. Так как хрящевая ткань плохоотражает рентгеновские лучи, поэтому в данном возрастном периоде хрящигортани достаточно плохо визуализируются, видны только наружные ивнутренние контуры (очертания) щитовидного хряща. С 19 и до 35 лет в нижне заднем углу и нижних рогах ЩХ появляются первые очаги костной ткани(костная ткань занимает до 29% площади хряща).
Среднее значение площади15костной ткани для возрастной группы 19 – 35 лет составляет 19±8%. Сувеличением возраста к уже имеющемуся окостенению присоединяется костнаяткань в нижней части пластинки: она занимает сначала ¼ ее высоты, затемполовину пластинки. На рентгенограмме начинают достаточно ясно и четковырисовываются основные анатомические элементы щитовидного хряща ввидуего прогрессирующего окостенения. Очаги кальцификации у нижнего краяпластинки с возрастом увеличиваются в направлении направо и налево, вверх ивниз, приобретая «костную рамку» или «краевое» окостенение.В возрастной группе от 36 до 60 лет отмечается окостенение заднихкраев пластинок, при этом максимальная площадь костной ткани составляет до 59% площади ЩХ.
На рентгенограмме обнаруживаются массивные бесформенныетени окостеневшего хряща внизу пластинок с образованием «выроста». Ввозрасте старше 61 года костная ткань распространяется вглубь пластинки изатрагивает всю толщину верхних рогов и большую часть пластинок (до 100 %площади). Среднее значение площади окостенения для этой группы – 68±9 %.Обызвествление костей и хрящей в пожилом возрасте создает прекрасныевозможностидляпрослеживанияегоанатомическихструктурнарентгенограммах.Отмечается значительное усиление интенсивности теней окостеневшиххрящей и повышение резкости их контуров. При исследовании совместногораспределения возраста образцов и доли костной ткани на рентгенограмме былополучено, что между ними имеется сильная прямая связь, близкая к линейной(r=0,8).Обработка полученных результатов позволила вывести формулу дляопределения биологического возраста по рентгенограмме щитовидного хряща:AGE =17,594+0,705Процент костной ткани на рентгенограмме,где AGE – предполагаемый возраст трупа.
Среднеквадратичная величина ошибкипрогнозирования равна ±8,4 года. Полученные результаты дают возможность16использовать анализ рентгенограмм ЩХ в качестве экспресс-метода установлениявозраста при судебно-медицинский ИЛ.Пригистологическомисследованиищитовидногохрящабылообнаружено, что процесс окостенения начинается после 19 лет с появленияединичных трабекул, а с возрастом происходит постепенное увеличение объема иплощади, занимаемой костной тканью.
Отмечены количественные и качественныеизменения ее основных структур (жировой и ретикулярной ткани), которая почтиполностью замещает хрящевую ткань в пожилом и старческом возрасте.Соотношение костной и хрящевой ткани меняется в различные возрастныепериоды от 0:1 в самой младшей группе до 9:1 в самой старшей группе.В возрастной группе до 18 лет ЩХ состоит из хрящевой ткани,состоящей из одиночно расположенных молодых хондроцитов небольшогоразмера правильной округлой и овальной формы, расположенных диффузно повсему препарату в слабо окрашенном межклеточном веществе. К концу данноговозрастного периода появляется зона зрелого хряща, что сопровождаетсяуменьшением количества молодых хондроцитов, появлением отдельных изогруппсостоящих из 2 – 5 клеток – зрелых хондроцитов.В возрасте 19 – 35 лет молодые хондроциты в небольшом количествеобразуют зону молодого хряща.
Процесс окостенения хряща в большинствеслучаев начинается в нижнем сегменте и на препарате костная ткань представленаединичными трабекулами с ретикулярной тканью. По сравнению с предыдущейвозрастной группой можно отметить достоверное увеличение площади костнойткани, уменьшение площади хрящевой ткани, и уменьшение зоны молодого изрелого хряща. На препаратах щитовидного хряща в возрасте 36 – 60 лет зоназрелого хряща присутствует почти во всех полях зрения, зрелые хондроцитыпреобладаютнадединичнымимолодымихондроцитами,составляющимиуменьшенную зону молодого хряща. На фоне увеличения площади костной тканив препарате увеличивается количество трабекул и площадь межтрабекулярногопространства. По сравнению с более молодыми возрастными группами, можно17отметить заметное увеличение толщины трабекул и их количества в поле зрения,пространство между костными балками частично заполнено жировой тканью вотличие от более молодого возраста, где наблюдается ее полное отсутствие илипреобладание ретикулярной ткани.
В возрасте более 61 года хрящевая тканьсохранена в единичных препаратах только в верхней трети и представленазрелыми и единичными молодыми хондроцитами, в остальных случаях ЩХпредставлен костной тканью с костномозговым пространством, заполненнымжировой тканью.Анализ полученных качественных признаков позволил выделить рядмикрометрических параметров для их дальнейшей количественной оценки. Врезультате выбрано 27 метрических параметров костной и хрящевой ткани, покоторым проводили дальнейшие морфометрические измерения. Наибольшуюположительную корреляционную зависимость от возраста имели следующиепоказатели: площадь костной ткани в % (r=0,82), площадь хрящевой ткани в %(r=-0,8), средняя площадь жировой ткани (r=0,76), средняя площадь ретикулярнойткани (r=0,7), максимальная длина трабекул (r=0,67), ширина зоны зрелого хряща(r=0,54), толщина кортикальной пластинки (r=0,5), среднее количество молодыххондроцитов в поле зрения (r=0,5).
Такие признаки, как соотношение зон зрелогои молодого хряща, количество молодых хондроцитов, количество трабекул,имеют слабые корреляционные связи и слабо зависят от изменения возрастачеловека.Проведенное исследование доказало, что ЩХ подвергается возрастнымизменениям, выраженным в увеличении доли костной ткани и измененииколичественных характеристик костной и хрящевой ткани, что подтвердилообщепринятую теорию о росте и развитии организма человека, основанную намнении,чтоорганизмпроходитфазыциклическихпреобразований,складывающихся в циклы роста и асинхронные циклы обновления органов.Возрастные преобразования костно-хрящевой структуры ЩХ совпадают сосновными закономерностями теории развития скелета человека (Пиголкин Ю.И.18и др., 2012; Глыбочко П.В.















