Автореферат (1140302), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Н.И. Пирогова, 10летию кафедры травматологии, ортопедии ИПК ФМБА России (Москва,2013);наIVМеждународнойнаучно-практическойконференции«Современные концепции научных исследований» (Москва, 2014); на IIIМеждународной научно-практической конференции «Научные перспективыXXI века. Достижения и перспективы нового столетия» (Новосибирск, 2014);наВсероссийскойинновациивнаучно-практическойтравматологиииконференцииортопедии»,«Классикапосвящённойи75-летиюпрофессора А.П. Барабаша (Саратов, 2016); на Всероссийской научнопрактической конференции с международным участием «Технологическиеинновации в травматологии, ортопедии и нейрохирургии: интеграция науки ипрактики» (Саратов, 2017). Апробация диссертации состоялась в ФГБУ«ПФМИЦ» Минздрава России (г. Нижний Новгород) 12 декабря 2017 года.Объём и структура диссертацииДиссертация состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов,практических рекомендаций и списка литературы.
Текст диссертацииизложен на 122 страницах компьютерного текста, иллюстрирован 35рисунками и 39 таблицами. Список литературы содержит 108 работотечественных и 139 зарубежных авторов.СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫОбщий дизайн исследования предусматривал выполнение трёх основныхэтапов работы: экспериментальные исследования in vitro & in vivo,исследования в клинике (рис.1).7Определение in vitro фармакохимической совместимости компонентов смеси растворов дляинъекцийОпределение количественного содержания отдельныхсоставляющих смеси и их совместимостиТеоретическое обоснованиеИзучение in vivo действия смеси растворов для инъекций и её компонентов на мягкие тканиколенного сустава крыс.
Всего: 149 животных.95 животных с острым модельным артритомколенного сустава54 животных со здоровым коленным суставомАнализ клинических результатов лечения 79 мужчин после артроскопического вмешательства наколенном суставеI группа – 38 пациентов, лечившихся по авторскойметодикеII группа – 41 пациент, которым проводилосьтрадиционное лечениеРисунок 1 – Схема общего дизайна исследованияПосле оперативных вмешательств на коленном суставе формируетсяцелый комплекс патологических нарушений, требующий своей коррекции.Процесс развития патологических нарушений в оперированном суставеможно представить в виде схемы (рис. 2).ОПЕРАТИВНОЕ ВМЕШАТЕЛЬСТВОРЕАКТИВНОЕ ВОСПАЛЕНИЕНарушенияУсилениемикроциркуляцииперекисногоИстощениеантиоксидантнойсистемыокисленияУсилениеноцицептивнойимпульсациилипидовТканеваягипоксияТоксическоедействие наткани суставаНеконтролируемоесвободно-радикальноеокислениеПОВРЕЖДЕНИЕ ТКАНЕЙ СУСТАВАРисунок 2 – Схема патологических изменений в оперированном суставеНесмотря на упрощённый вид данной схемы, она позволила намопределить патологические процессы – «мишени» для последующегоцеленаправленного воздействия: расстройства микроциркуляции, активация8перекисного окисления липидов, истощение антиоксидантной системы,наличие болевого синдрома.
Выбор отдельных компонентов лекарственнойсмеси осуществлялся нами с учётом возможности их мультифокальноговоздействия на определенные нами «процессы-мишени». Отобранные намипрепаратыоказываютвыраженноетерапевтическоедействие,имеютбольшой стаж применения в клинике, минимальные побочные эффекты иотносительно низкую стоимость.На основании изучения литературных данных и собственного опытабыли предложены изотонический (1,4%) раствор натрия гидрокарбоната дляпромывания полости оперированного сустава и смесь для внутрисуставноговведения, включающая следующие компоненты:1. 5% раствор аскорбиновой кислоты;2. 5% раствор унитиола;3. 0,5% раствор новокаина.В первой части экспериментальных исследований с целью изученияфармакохимической совместимости компонентов смеси для инъекций in vitroопределяли количественное содержание в ней отдельных составляющих:аскорбиновой кислоты, унитиола и новокаина.
При этом учитывали, что всмесисодержаниеотдельныхкомпонентовдолжносоответствоватьвыбранному 1:1:1, чтобы объём для интраартикулярного введения былминимальным.В ходе количественного анализа смеси, включающей 5% раствораскорбиновой кислоты, 5% раствор унитиола и 0,5% раствор новокаина,установлено отсутствие химического взаимодействия между ними, чтосвидетельствует об их совместимости.Нами был определён водородный показатель смеси и её компонентов, атакже гипо-, изо- и гипертонических растворов натрия гидрокарбоната.
Приэтом принимали во внимание литературные данные по физиологическимзначениям рН синовиальной жидкости коленного сустава и его изменениям9после травмы и после операции (Павлова В.Н., 1980; Иванов Л.И., 1997;Бобков В.А. и соавт, 1999; Долгов В.В. и соавт., 2006; Матвеева Е.Л., 2007).Былоустановлено,чторНизотоническогорастворанатриягидрокарбоната (8,01–8,07) и смеси (5,3–6,6) мало отличается от водородногопоказателя нормальной синовиальной жидкости (7,29–7,80), в отличие от рН0,5% раствора новокаина (3,8 – 4,5).Во второй части экспериментальных исследований in vivo изучаласьместная реакция мягких тканей на внутрисуставное введение отдельныхкомпонентов и смеси. Эксперименты проводились на 149 белых крысахлинии Wistar весом 150,0±3,8г, возраст которых составлял два месяца. Всеэксперименты выполнены в соответствии с правилами бережного обращенияс лабораторными животными (Приказ № 755 Министерства здравоохраненияСССР от 12.08.77г.
№ 755; ГОСТ Р 53434-2009 «Принципы надлежащейлабораторной практики»).Эксперименты проводились с целью изучения местной реакции тканейна внутрисуставное введение препаратов (1-ая группа, включающая 54крысы) и с целью оценки эффективности предлагаемой методики лечения (2ая группа, включающая 95 крыс).54 крысам, которые были разделены в случайном порядке на шестьподгрупп по девять животных в каждой, под наркозом с соблюдением правиласептики инсулиновым шприцем в коленный сустав вводили по 0,3 млизотонического (1,4%) раствора натрия гидрокарбоната, растворов 5%аскорбиновой кислоты, 5% унитиола, 0,5% новокаина и смеси.Контролем служили крысы с интактными коленными суставами безинтраартикулярного введения медикаментов.Из макропрепаратов коленного сустава готовили гистологическиепрепараты, которые окрашивали гематоксилином-эозином.
Для микроскопиииспользовали бинокулярный микроскоп ЛОМО МИКМЕД-2 с увеличениемх100 и х400, проводили оценку состояния синовиальной оболочки сустава ирассчитывали клеточный индекс по отношению10количества клеток-резидентов(синовиоцитов,макрофагов,гистиоцитов)кклеткам-нерезидентам (лейкоциты). О преобладании воспалительных измененийсудили по значениям клеточного индекса менее 1.Анализ полученных результатов показал отсутствие клиническихпризнаков воспаления во всех подгруппах животных.
На протяжении 5 днейдостоверных различий между средними значениями окружностей коленныхсуставов после введения препаратов и интактных суставов выявлено не было.При микроскопии в синовиальной оболочке патологические изменения(воспаление, некроз) не наблюдались. Гистологическая картина практическиничем не отличалась от картины интактного коленного сустава (рис. 3).абвгдеРисунок 3 – Гистологическая картина синовиальной оболочки интактногоколенного сустава (а), после внутрисуставного введения изотонического(1,4%) раствора натрия гидрокарбоната (б), растворов для инъекций кислотыаскорбиновой 5% (в), унитиола 5% (г), новокаина 0,5% (д), смеси растворовдля инъекций кислоты аскорбиновой 5%, унитиола 5% и новокаина 0,5% (е)на 1-е сутки. Окраска гематоксилин-эозином, ув.
х100У 95 крыс 2-ой группы вызывали острый артрит коленного сустава,вводя субплантарно в подошву задней правой лапки 0,1 мл 3% водногораствора формалина по методике Н.А. Юсиповой и соавт. (1980). Через деньклинически оценивали выраженность острого модельного воспаления. А длягистологическойверификациибылиизученымикропрепаратыпятиживотных, выведенных в эти сроки из эксперимента. Оставшиеся 90 крысбыли разбиты на три подгруппы по 30 животных, которым препаратывводилисьвнутрисуставноподнаркозомсоблюдением правил асептики и антисептики.11инсулиновымшприцемсВ I подгруппе крысам в полость правого коленного сустава вводили 0,1мл изотонического раствора гидрокарбоната натрия и по 0,2 мл препаратовпредлагаемой смеси в соотношении 1:1:1. Во II подгруппе животнымвнутрисуставно вводили 0,3 мл 0,5% раствора новокаина.
В III подгруппеинтраартикулярное введение препаратов не проводилось (контроль течениямодельного артрита).У крыс с развившимся модельным острым артритом при осмотреколенные суставы были отёчны, увеличены в объёме, с ограничением иболезненностью пассивных движений. Наблюдалось достоверное нарастаниеотёка мягких тканей сустава до 57±2·10-3 м (n=95) по сравнению ссимметричным – 46±1·10-3 м (pM-U<0,001), а клеточный индекс составил0,35±0,04<1(n=5),чтоуказываетнапреобладаниевоспалительныхизменений. При гистологическом исследовании выявлялась выраженнаядиффузная полиморфноклеточная инфильтрация синовиальной оболочки спреобладанием нейтрофильных лейкоцитов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
