В.А. Голиченков, М.Л. Семёнова - Практикум по эмбриологии (1135413), страница 33
Текст из файла (страница 33)
B тaкoй ПoлнoсTЬю зpелoй IТJTaцrнTе пpaKTичrсKи нr сoxpa}IяIoTся КJIеTKи цитoтpoфoблacтa. Ha пpепapaтaх зpелoй IIлaцентЬIхopoшo Bи.цIIЬI KaIIиJI,'IJIpЬI, ПpиMЬIKaIoIциr l{rПoсpr.цсTBrннo K сЛoloсинциTиoTpoфoблaстa.Пpи мaлoм УBeЛуTlelнИИ BиднЬI ЭЛrМенTЬI сц)orIIи'I мaтеpинскoйчaсTи lrЛaцeнтьI (деuилyzUIЬH Ьlе KлеTKи. сoсyД.Ьl MaTеpи HсKo Й чacтттIUIaцеI{TЬI' фopменньIе элеMеHTЬI Кpoви МaTrpи' oМЬIBaIoщей вop-Pис. 81.
Пpепapaт плaценTЬI челoвrKa:сц)oеI{иr мaтеpинскoй и плo.цнoй чaстей гrлaцентьr; 6- сTpoениr BopсиIlьl- хopиoFla;1- плo.цнaя чaсTЬ плaцrнтьl; 2 - Maтеpиl{скaя чaсTЬ I]лaцеЕITЬIсинЬI хopиoнa), гшloднoй чaсти (вopсиньl xopиoнa' сTBoлoBЬIr' KoI{еЧHЬIе и якopньrе)' a TalОl(e вI{еKJIrToчньrе эoзинoфII,TЬньIе сTpyК-.rypьI (фибpинoид).Пpи бoльtпoМ уъеличении КpoMе КpoBенoсFIЬIx сoсyДoB сTBoлoвoй воpсиньr (венa И apTepИЯ вopсин) Мoxнo paЗЛиЧиTЬ эЛеМrнTЬIКaПиЛЛяpl{oЙ ceти KoнцrBЬIx Bopсин, чaсTo paспoЛoxенIlЬIе пpяМoПoД сЛorМ синЦиTиoтpoфoблaстa.iPЬlБЬl.
PAБoтA с жиBЬlM MAТЕPиAлoM(PA3витиЕ эMБPиoHoв BЬюHA)ll(.(. tpcЛЬlr яйЦеклетки BЬ]онa (кaк и y бoльtпинсTBa ПoзBo}IoчнЬIx,t' t l l ttll-гt ЬIx) нaхoДяTся Ha cTaДИ.o.l метaфaзьr BTopoгo мейoтическoгo]|(']|сIlИя. Зpельtе безaкpoсoмнЬIе сПеpМии иМеIoT B ДиaМеTpе oKoЛo' мr км (pис. 82, B). oбoлoчкa иKpиHoK сoсToиT иЗ .II'B}x сЛoеB: xopo|||() l)ltЗBиToЙ 7oпа rаdiаtа и ПЛoTнo ПpиЛегalощей к ней нapy;кнoйIl{)l)сиt]LIaToЙ oболoчки. Bopсинки МеЛКие и paспoЛo)KrнЬI TaKиМПpи бoльtшoм yBеЛичении oбoлoчкa KaxеTся яЧeисlrlri.
l-lpи ПoПaДaнии яЙЦa в BoДy Bopсинки нaбyxaloT, paсТ]paBЛя|(r|с,l И сTaнoBяTся KЛейКими, чTo сJ]y)I(иT.цЛя ПpикpеIIЛe:нИЯ ЯИЦK(|()|)il']oп4' ЧToПpедстaвитrЛЬ KoсTистьtх pьtб- BЬтoн Мisgumus fossilш - пpинa.цЛежиT к сeмействy BЬIоI{oBЬIх Сobitidaе' oTpЯдy кapпooбpaз ньtхCyprinifoгmеs' нa.цoTpяДy KoсTисТьtx pьtб Tеlеostеi. Эти небoльtлиеt v[lсгpaтy.(пoлoвoзpельrе oсoби иМеIоT 25-з0 сМ B .цлинy) pе.tньtе pьtбкинa всrй TеppиТopии Poссии.[ля эмбpиoЛoГoB BЬIоFI дaBF{o сTfu'I лaбopaтopньrм oбъектoм всBяЗи с BoЗМo)KHoсTЬIo ДaTиpoBaЕt нoгo ПoЛ),п{еI{ия эмбpионaлЬн oгoМaTepиaЛa B ПеpиoД с oктябpя пo мaй.Ha икpr BЬIоI{a ПpoBo.циTся М}Io)КrсTBo ЭKсПrpиМентaльнo-эмбBo.Г{яTся ПoчTиpиoЛoгичесKих иссЛе.П'oвaний с ПpиBЛrЧrниrм биoхиMичесKиx'MoJlеKyЛяpнo_биoлoгичесКих' биофизиuесKих' Iиa't'еМal.ичеcкИX иtlpoчиx МеToДoB.
Этo, в чaсTнoсTи' ЭКсПеpиMенTЬl пo ПеpесaДКrя.цеp' ПoЛ}^{ениIo ТpaI{сгеннЬIх )КиBoTнЬlх, иссЛедoBaниIo poЛи КЛеToItнЬIх нaтяя<eниiц в эмбpиoгенrЗr' ДисTaHTнЬIх взaимoДействиЙMе)KДy paзtsивaloщИ|iИCЯ ЗapoДЬI[IaМи и МHo)(есTBo дцpyгих..{ля вьrorla сoсTaBленЬt тaблицьr нopМtulЬt{oгo paзBиTия (A.A. KoсToМapoвa, |91 5), сoДеpХaщиr pисyнKи и oIIисaние oПprДеЛеI{нЬIxcтaДиrt paЗBиТия зapoДьttшей oT oпЛo.цoТBopeния дo сTaДии tlеpехo_15 с},,ToK paЗBиTия B ЗaBисиМo_.цa Ha aKTиBнor ПиTaние (oкoлo l0-сТи oT тeмпеpатypьl).oтловленнЬIХ B Пpиpo.цr сaМцoB и сaмoК BЬIoнa сoДrp)(aT B хolIo.П.иЛЬниKе" B семенниКaх сaМцoв в сентябpе-oктябре },т<r сoДrp-ЗpеЛaя спepМa. Caмкaм BЬIoнa .ЩIя ПoЛучения ПoЛoBЬIx ПpoДyКToB .цеЛaIoT иF{ЪеKциIO гopМoнaЛЬHoгO tlpеЛapaTaнеpез 36-48 ч oни ,цaIoT Зpехopиot{ичесKoгo гoнa.цoTpoПуIЕIa,'IсrМенниKи' иЗMеЛЬчaIoTЛyIо иKpy.
Caмцa Хе yсЬIпляIoT, BЬIдrЛяIoТих и гoToBяT Bo.цн},To сусIIенЗиro сПrpМЬI. Пpoцедypa исKyссTBеI{ъ{oгo oсеМенения oЧrнЬ ПpoсTa: иKpy ПoЛиBaIoT l]pИГoTоыrенной сyспенЗиrЙ, и B IТеpвЬIr )Kr сrKyнДЬI ПpoисXoДиT Пpoцесс ollЛo.цoTBo>KИ.|cЯ ПoЛI{oсTЬIopения.Яйца вьtoнa Пo КoличесTBy )KеЛTKa oTнoсяTcЯ К noлuлецumaль_ны'M1 a Пo ХapaKTеpy егo paсПprдеJIеHИ'I I] КЛеTKе- K mелollецu.бoлее 1 мм в дtтаметpе. HаmальI7ьl'M' Икpинки.цoBoЛЬtlo Кp}ТIнЬIraниМaЛЬЕtroМ ПoЛIoсе в oбoлoчке нaхo.циTся ]|IuKpo|Iuле (pиc.
82, А,6)в виде сПиpаЛЬнo ЗaKpучrннoй вopoнки, диaМrТp BнУTprнЕ{eгooTBеpсTия кoтopoй paBrн ДиaМеTpУ ГoЛOBKИ сЛrpмaToЗoиДa, чToспoсoбствyеT Пpе.цoTвpalдrнI4}o ПoЛисПrpМии. B шloмеHT oByляции\72I,rrс. lJ2. Пpoникнoвение спеpMатoЗoидa сKвoЗЬ oбoлoякy ooциTa y pьrб:IN4ИKpoпИ.пe ooциTa I1oД' сBеToBЬllv'tNlII|(|)()I|иЛeМиКрoсKolloм' ГисToЛoгичeский сpeз; 6в oбoлo.tке ooциTа выoнaIl()tll!|nй N4ИKpoскoП,ув. l2000;(fulisgu,rn,us fossilis);скaниpуюциЙ элекr.-сltrpматoЗoид BЬIoнa; сKaHиpуЮщий элекr.-poнньtй-BMиKpOсKoЛ! ув. 12000|7Зтeмe зaнятия <<oплoдoтвopeниe).oзнaкoмлeHиe стyдeHтoв с пpoцeссaмиКи Gия I4 v|cl<Усств e н н o йaктивaции икpЬl кoстистЬlx pьlб(нa пpимepe вЬюHa- Misgurnus fossflЬ)кyс ствeHHoгooce мeнeнB зaдaну BхoДиT пpиx<иЗt{еЕ{нoе нaблro.цеHие зa pеaКциеil' aктиг,aЦИ:,l яйЦеклетoк' oT.цrЛеI{ием oболoчки oПЛo.цoTBoprF{ия' oбpa-зoBaниеМ ПеpиBиTrЛЛинoBoгo ПpoсTpaнсTBa' KoнTaKToМ BoсПpи}lиМaIoщrгo б1тopкa и BopoнKи МиKpoПиЛе, oбpaзoвaниеM BTopoгoпoЛяpнoГo TrЛЬцa.
KaxДьlй сTy.це}IT иMrrT BoЗМo)KF{oсть нaблio.цaтьПеpечисЛеннЬIе ПpoЦессЬI ин.циBиДyаJIЬнo с ПoМoщЬIo сBrToBoгoMиКpoсKoПa.Ha зaнятии кшKцьrй сTyДенT ПoЛ1пlarT Пpr.цMeTнoе сTrкJIo с Лyнкoй' в KoTopУIo ПoМrщеЕ{ЬI несKoЛЬKo ToлЬКo чTo oсеМеHеннЬIх(илтл aктивиpoBaннЬIx) икpинoк. B блиxaйшиr ПoЛчaсa Bсe иЗМеIIс-lнИЯ, КoToрЬrе Mo>кнo yBи.цеTЬ в светoвoй MиKpoсKoП, сoBеplIIеннo o.цинaКoBЬI y oПЛoДoTBopеннЬIх и исKyссTBеЕIнo aКTиBиpoBaннЬIх яиц. Aктивaция ПpoиЗBo.циTся oтстoеннoй вoДoй (вoдoПpoвo.цнylo Bo.цy B oткpьtтoй пoсУДе oTсTaиBaIoT .цBor суToK Пpикoмнaтнoй TеМпеpaTypе).
Haблroдеtlие ЗaниМaет 15 20 мин (пpипpoизoйдеT сняTиrз siEPF A 9Ёь]ц|Ji'' -нЦv|х9Е^ч .q*ЕxЕ.,' .-z' lЁ *н Y= *-!'.l.iБ G ф.ёЁЕ.Е.gv"t ЕoЕБ:Е;" ts.б|j9 !!Aa: Е i:..PчЕЦ:tsчEsЕ66Ё 9FЕ*а5lч, Е Еёt* tм O L'-ЦУ*бFд^ }Е о Б+2= Я:rEЁts::tii:]*!тfia99 РэЦ-. E s|(R E,!=Ё,EYo^чiцnвЁяE,;'*Ч:я5лЁф|-F *У)\5o.^)1'J 9rr|^*ЕчхaБблoкaTrМПеpaTуpe |,I- 19.с). Зa этo BpeМяМейoЗa, Пpo.цoDKaTcЯ И ЗaBeplIIaTся мейoтические пpеoбpaЗoBalнИЯ B aКTиBиpoBaннoй икpе.Bo вpемя нaблro.цения Мo)Кнo }rBи.цrTЬ сЛе.цyloЩие пpoцrссЬI.Cpaзy пoсЛr МoMенTa aKTиBaции oT aниMzLIIЬнoгo пoЛIoсa нaЧинaеTся KopтиКaЛЬн aЯ peaKЦИЯ яйЦекltетoк.
oнa paспpoсTpaняеTся B TечrHиr пеpBЬIX 2-З мин пo всей ПoвrpхF{oсTи яЙЦеклeтки.Икpинки, пoХoХиr B МoМrнT пoмrщrния B Bo.цy нa сПyrцrннЬIeф1тбoльньte N|ЯЧИ, нaчинaloT пpиoбpетaтЬ oKpуГЛylo фopмy. B этoBprMя Пpoисхo.циT экЗoцumoЗ oгpoMF{oгo KoЛичесTBa кopmurcaльньtх альвеoл, paспoлo)КеннЬIx B КopTиKaЛЬнoМ сЛor яilЦa. Пoвеpx}IoсTЬ ИKqИIIKИ BсЛе.цсTвиr эToгo бьrвaет бyгpистoй, co Мнo)кrсTBoМ <(KpaTrpoB)> paзличнoгo .циaМrTpa (oт 5-7 дo 20- 25 мкм),oбpaзyloщихся нa oбoлoчке Bo BpеМя эКЗoциToЗa zLIIЬBеoЛ.
Bo вpеМя эKзoциToЗa КopTиKzuIЬтIЬIx 2ЦIЬBroЛ BЬI.целяеTся' B чaсTF{oсти'глиKoПpoTеид, бьlстpo нaсaсЬIBaющий Bo.цy B ПpoсTpaнсTBo Мех(.цy циToПлaЗМaTичесKoй oбoлoчкoй икpинки и oбoлoчкoй oплoДoTBopения (pиc.8З, А, Б).oбoлoчкa oПЛo.цoTBopения oTДеЛ ЯeТcЯ И oбpaзyется ITpoзpaчHoе,бьrстpo yBrЛичиBaIoщееся nеpuвumеллI,lнoв oе npoсmpaнс mсo. ПoвepхнoсTЬ иKpиFlKи пoсTrПеннo сГлaХиBaеTся' пoсКoЛЬKy Пo.цF{иМaloщиr ся .цoнЬI[rКи zl,'IЬB еoЛ BсTp aиBaюTся B ПЛaзМ aTиче сI(yIo м е мбpa нy (pис. 83' B).174r75Чсpез4-6мин нa aниMaIIЬнoМ пoЛтoсr МoxнoBи.I1еTь тесньtЙKOI{TaKT и ПoсTrПенI{oе paсХoЖДeНИe вopolll{ц 'uuкponuле И вoсnpu_IIuл|aЮще2o буzoprcа, Пpе.цсTaBЛЯIoЩеГo сoбoй яЗЬIчoK пpoзpauнoйсвoбo.цнoй oT )KrЛTKa циToПЛaзМЬIэTo oтoбpaxениr пpoцессa-IlpoHиКЕ{oвrния сГICpмaTo]oиДa в яЙЦo.
Hеoбхo.цимo oTМеTиTЬ' чTooПЛo.цoTBopеF{нaя (или aктивиpoвaннaя) иKpa хoporшeгo KaчесTBa'KzrК ПpаBиЛo, oбpaщенa aниМaЛЬI{ЬIМ пoЛIoсoM BBrpx' ПoЭToМy ДЛянaблro.цения неoбxoДимo нaйти B IтoЛе ЗprnИЯ иKpинKy' aниМzlJlЬl{o_BегrTaTиBнaя oсЬ кoтopoЙ ЛеЖиT ПapaЛЛrЛЬнo ДoнЬrшIКy сTеKlIaс лyнкoй. B этoм сЛ}д{ar ЛегKo yдarTся нaЙти B ПoЛе зpеHI4Я oблaстьKo}ITaKTa вopoнКи МИKpoПиЛе и бугopкa и B Teчrнt{е 2-3 минpaсхo)Kц eния. fIepиBиTUI,тIиI lpoсЛе,циTЬ ДиI{aMиKy их пoсTеПенt{oгoyBеЛичиBaTЬся' I{o в oбoлoчбьtстpoI]oBor ПpoсTpa}rсTBo Пpo.цoЛхаетKе oПЛoДoTBopr}Iия B Tече}lие несKoЛЬKиХ Mин},Т еще мo>кнo бyДетlrИДеTь Bсr yМеI{ьIIIaIoЩyIoся Bopoнкy МикpoПиЛr (цв. вю'r.
YIII, А- B).B течrние ПoсЛе.цyЮщих7- 10 мин Ha aниМaЛЬнoМ ПoЛloсr иКаЗJ|4 (] m u ч е сlс uй бyгopoк. У>ке в иДнa ДoBoлЬнo|] инI.И oбpaзyется цu m o nлtlеTKaя ГpaHиЦa MеxДy пpoзpaннoй циToПлaЗМoй и плoтньIМ )KсЛT_i:;tvt (\B. вк.п.хV[II, B, Г).|4-\6MиI{ oT МoМе[ITa aKTиBaции нaчинaеTся ПpoцrссtrбpaзoвarrиЯ вmopoeo noЛяpt7o?o (uлu pеdукцuoннozo) mельца' KoTo_1loе бyдrэт BиДHo нa al{иMaЛЬнoМ пoЛЮсе Ha ПoBеpХHoсTи IIЛaЗMa_r'ическoй мембpaньt' {иaметp Пoляpнoгo TеЛЬцa Bсегo 10 мкм(ll 100 paЗ МrF{Ьшrе .циaМeTpa икpинки), пoэToМy еГo Мo>l<нo oбнa_I)y)KиTЬ не сpаЗу' TaK BrлиK KoнTpaсT Мe)KДy ДB}^,{я сесTpиHсKиMиpя.цoМ сoI(J|еTКaMи- яйцеклеткoй и пoляpнЬrм TелЬцrМ.
ИнoгДaIrгopЬIМ ПoляpнЬIМ TrлЬЦеМ Мo)Kt{o Bи.цеTЬ и ПеpBoе' КoTopoе oсTa]loсЬ <<си.цеTЬ)> нa МеМбpaне яйцеклеTКи пoсЛr ПеpBoгo меЙoтичес_l(OГo.цеЛrния (цв' вю'т. VIII, Л).Ha этoм Пpoцесс нaблюДения зaKaнЧиBaeTСЯ. AктивиpoвaнЕ{ЬIе||KpиI{Kи в TечеF{иr 2-З ч oT МoМенTa aKTивaции пoгибaют. ИкpaесКoмy paзBиTиrо : к.ltетoчньrйl I,Ю H a не спoсoбнa K П apTеIIoгеF{eTИL-IЧеpезIlPис. 84. ГистoлoгичосКИr сpеЗЬl аIlиMаJtЬ}Ioгo ПoЛIoсa иKpинoк BЬIoнa(Misgurnus fossiiш) в paЗJlИчl-lЬlс сpoКи пoсЛе oЛлoДoTвopеЕ{ия:метaфaзa втopoГo мейoти.tсскогo деЛениЯ(3-5пlин пoсЛе oЛлo.цoтвopения);спrpМaToЗoиДa (l0t', B- aIlaфaзa BTopoГo пlейor.ическoгo .IlеЛения и ГoЛoвКal ] мин пoслr оплoдoтвopения); Л rс;loфaзa tsтopoгo мейoтическогo деления, oбpai()l|illlие BTopoгo пoЛЯpнoГo TеJlЬЦa (l.5 мин ПoсЛе olrлo.цoтвopения); ,[l - кoнl:lКТ ]\ly)KсКoГo и жеHсКoГo ПpollУIсlсусoB (30 мин ПoсЛе ollЛo'цoтвopения); t -пrсгet[aзa пrpвoгo делrниЯ дpoблеtlt,tя (60-70 i\'ин пoсЛе oПЛoДoTBopе]lия); Х( *'rlllt(laзa ЛepвoГo ДеЛе}lия 'Цpoблснияt (80 пrиlr ПoсЛе oпЛoдoтвopения); З - нa.llt.lttl(i{)I)1lfoBaниЯ бoрoз.цьt ПrpвoГo llеJlсHия.Цpoблeния (l00- lI0 пlин ПoсЛе oПJ|o.rlo-176.гltoDeH и'Iспlt71ътянцrнTp' нroбxo.циМЬ:Й ДЛЯ oбpaЗoBaния МеTaфaЗнoГo вrprTенa ДpoбЛe11ИЯ, BнoситсЯ B яйцекJlеТКy сrТеpМaТoЗoидoМ, сBorГo кЛеToчHOгo цeнтpa B яЙцеKJIеTKO BЬIонa FIеT.У oплo.цoтBopеHнЬIx яйцек.ltетoк ПpиMrpнo vеpез 80-90 миtlпoсЛr oбpaзoвaния BToporo ПoЛяpr{oгo TrлЬцa (uеpез l00- l10 минпoслr oсrМeнения) нavнется дpoбление.
Пpoцессьr, КoTopЬIе Пpo_исхo.цят внytpи oпЛo.цoтBopенrroй яйцеклетки BЬIoнa B IIеpиo.ц ol.МoМентa oIIЛo.цoTBopr}IиЯ .цo нaчаJIa обpaзoвaния бopoздьr ПrpBoгoДeЛeНИЯ.цpoбления, пpе.цcTaBЛrнЬI }Ia pис. 84.^fiФv9ц.dOIс.lЁ>|*l#\.'ч U>я Ёнxк у:^*тeмe зaнЯтИЯ <[poблeниe>.Haблюдeниe зa пpoцeссoм дpoблeния икpЬl вЬюнaКflемoнстpaциoнньIй ПprПapaT с иKpинКaМи ПoMrщarTся B ПoЛезprния бинoкyляpнoгo МиKpoскoпa. CryденTЬI Moг},T yBидеTЬ paзBиBaIoщихся зapo.цьIrшей нa paзнЬIх эTaПax дpoбления (2-4 блacтoмеpa' MopyЛa pa|1|1ЯЯ, сpе.цняя и Пoз.цняя блaсryлa) и сpaBниTЬ )Ки'BЬIx зapo.цЬIrпей вьroнa нa сTaдиpI двyх блaстoМеpoB и сpедней блaсTyЛЬI с гистoЛoгичесKиМи сpезaМи зapoдьrшей нa ЭTих сTa.цияХ.Bьtoн, Кaк и Bсе KoсTистьtе pьtбьr, oTнoсиTся K ЖиBoTнЬIМ смepoблаcmuчеclduм| TипoМ .Цpoбления.
Ha пpедьI.цyщeМ зaняTии сTy.ценTЬI Мoгли нaблю.цaть нa oсеМене}IнЬIx 74Л'1 ИCКУaсTBrнHo aK.ГИBиpoBaннЬIx яйцеклетKaХ BЬтонa Пpoцесс фopмиpoвaшИЯ цumonлaЗoбpaзoвaния нa aниMаJIьrИаmuчeскozo буеopка, uлu бласmoduсrcа,oт xелTKa циToПЛaзМЬI.свoбoднoйзoнЬIпpoзpauнoй,нoМ пoЛIoсrCтpoeние яйцeюtетoк TaКoBo' vтo в дpoбЛrFiиr BoBлеКaеTсЯ ЛИIIJЬэTa зoнa, тoгДa KaK oснoBнaЯ чaсть яйцa' сoсToящaЯ ИЗ TaК нaЗЬIвaемoй x<елтoчнoй K]IеTКи' oсTaеTся инеpтнoй.