В.А. Голиченкова, М.Л. Семёнова - Практикум по эмбриологии (1121117), страница 37
Текст из файла (страница 37)
PAБoтA с жиBЬlM MATEPиAЛoM(PAзBитиЕ эMБPиoHA КУPицЬl)Hепoсpедстtsе}Iн ЬIенaблro.цения Кypинoгo зapo.цьrllIa MoХнo Пpo -BoдиТЬ paзлиLIЕ{ЬIМи спoсoбaми : oTКpЬIB .цoсTyП К ЗapoдЬl IIry yДа,tе HиrМ чaсTи сKopЛyПЬI иЛи ПpoиЗBoДя сняTиr ЗapoДЬIIIIeBoгo ДисKaс ПoBrpхнoсTи )KrЛTKa' Пoсле.цний спoсoб ПoЗBoЛЯеT Лy{II]е изу_чиTЬ сTpoенИе ЗapoДЬIшIa F{a cТaДИIl инкубaЦии 2__4 cутoк, B ToМ\IИСЛe Лyчrше paссМoTpеTЬ сoKpaЩеЕ{ИЯ cepДЦa'.цBиxеHие КpoBи ПoсoсyдaМ' пoсKoЛЬKy эмбpиoн, снятьrй с пoBеpxнoсTи xеЛTKa, Moxнo xopolllo oTМЬITЬ oT >t<еЛТKa и ПoМесTиTЬ B TеПЛoМ физpaствopеПoдt МиKpoсKoп .цЛя ДеTzulЬнoгo ИЗУЧeНИЯ B Пa.цalощеМ и Пpoхo.цяLIIеM свеТr.Cнятие зapo.цЬIlllеBoгo.цисKa с ПoBrpхнoсTи )KrЛTKa МoХFro Пpo_изBo.циTЬ сЛr.цyloщиМ oбpaзoм.1.
Bьtнyгь из инкryбaтopa яйцo и пoлo><иTЬ егo нa гopиЗo}ITzulЬнylo ПoBсpхнoсTЬ нa 1 2 мин. Зa этo BpеМя хaIIaЗЬI paЗBrpH}"T )KеЛToК' и зapo.цЬIlII oКaxrTся B BеpхнеМ ПoЛo)(ении (pис. 88, ,4).2. Bзять яйЦo .цвyмя pyKaМИ и, F{е MеtIяя егo opиrнтaции (непoBopaчиBaя), пoднести К чaIIIKе Петpи' paзбить сКopЛ}rПy с ниЖней стopoньt яйцa oб ее кpaй. H1rкнaя сTеПrнЬ paзpylIlеHия сKopЛyПьI oIТpr.цеЛЯa.ГСЯ Пo инTенсиBнoсTи BЬITеКaния белкa из яйЦa: беЛoK .II'oЛ)KrH BьITеKaTЬ МrДЛенHo.З. еpxa яйuo двyмя pyКaМи I4 He МеHЯЯ егo пoлoxеHИЯ, ПoМеcTиTЬ егo нa.ц цrнTpoМ чaIIIKи Петpи Ha МиниМaЛЬHo BoЗMo)K_HoM paссToЯHИ|4 oT ее ДЕ{a и бьтстpo paсКpЬITЬ яйцo с ни>l<неЙсTopoнЬl' не paЗдaBиB Лpи эToМ сKopЛyПy. B BЬIПaB[IrМ B ЧaI.tlКyПетpи )KеЛTKе Зapo.цьIlII .цoЛ)(еF{ ЛеЖaTЬ нaBеpХy' B ЦrнTpr )КеЛTка (pис.
88, 6).4. Bьtpезaть кoЛЬЦo из фильтpовaльнoй бyмaги и ПoМrсTиTЬ rгoнa Зapo.цЬIшI TaKиМ oбpaзoм, чтoбьr B oTBrpсTИи KoЛЬЦa бьtл ви.ценBrсЬ зapo.цЬIlII' a шIиpиHa б},ъlаxнoй ЧaсTи KoЛЬцa сoстaвлялa бьt3-4 мм. Ha зapoдьtrшax B сTa.ции инкyбaции 3-4 сутoк бyмaxнaячaсTЬ KoЛЬцa ДoЛЖнa ПoЛHoсTЬIo ЗaКpЬITЬ BсIo KpoBенoснyЮ c|4сTeMy )KrЛToчнoгo Mе[IКa' ЧTo пpе.цoTBpaTит слyvайнoе paзp}.lшениrсoсy.цoB и BЬITrКaниr иЗ них KpoBи' инaчr сoКpaщrния сеpДцa бьrсTpo tlpеKpaщarTся (pис. BB, B).5.
Чеpез 3-4 мин (зa этo BpеMя KoЛЬЦo пpисoxнrT к xелтoчнoйoбoлovке) сЛеДyеT сД'rЛaTЬ 2-3 paзpезa B )KrЛToчнoй oбoлoчKr Пoбoкaм )кеЛTKa. Хелтoк BЬITечеT' егo .цaBЛеF{иr нa oбoлovкy бyдетr90Рис 88. Ilpt,tгoтoв,тениеToТaЛЬHoгo пprпapaTa эмбpиoнa кypиl.1ьtДHя иHкуoaцИи:'l4l'oинкyбиpoвaннoгo яЁlua; 6- зapoдьlпrевьtй.циск нa >кс;l l.кс; /lб},мaxttoгo KoЛЬLlэ нl] зxрoДI,lшеBьtЙ Диск (стpелкaми уКll3il||l,| ]vlссTll,._. сr-poениеllit-П(]-'t"еt!llelJl(()|opЬlх llul/lo li:lДpеЗaTь oбo-'lo.tку )КеЛТKa; ПунКTl,lp _ Л|7|1|4я, по ко.гсl1ltlЙ с.rlс/tусГIlllllpсзаТЬ oбoлoнкy жсJ|гKa Лo Пеpиl,lеТpу бyмaxнoгo кoльцa); /- скop,;tуttlt; 2l](u1сKopЛуI]oBьте oбoлo.tки; .? _- вoздуtшнaя кaМеpa; 4бeлoк;.i - xсltгllк; 6l.:l)оDсtloснЬlс сoсyДЬI зltpoilЬllUеt}oгo .llискa; 7- тeлo зapo.цЬIшa; 8 кplrй oбрас.гeltltя 9 бyмaхнoе KoЛЬцoUlI}l'Io И Пpи ДаЛЬHе}ttl]Иx МaI{ИПуЛяциях oн не сМo)кrT ПOПасTЬ HeкoЛЬL[O и ЗaToПиTЬ ЗapoI(ЬItll.6.
tТo Bне]ш}IеMy кpaю бyмоKнoГo КoлЬЦa сДeЛaTЬ HoХI{ИцaMИli1lуговoй paЗpез )Kелтo.tt.loЙ обoЛo.IКи, не oсTaвЛ'IЯ Пpl,l ЭToМ Hе_l)llЗpеЗaннЬIx yчaсTKoB oбoлO.tки'7" Bзяв l\,tеTаЛЛичеCкий tшtlателЬ' сMoЧиTЬ егo в белке иЛи t]oi,Iс и!l(utRести еГO Пo,] бyмaxнoе KoЛЬцo с зapoДЬIlIIеM' ПpИДеp)KИBa'| Г|pИ,)ГOM Пt{t{цетoм б}п,taxнor KoЛЬцo с ПpoTиBoПoлoxнойoT шI-IаTеIT'Itl.t tl1lotiьt. Глубинa ПoГpy)(еHия lIIПaTеЛя пo.ц KoЛЬIlo1__2 мм.-l9tйB. ПoДняв шПaТеЛем с ЖeЛTKa ЗapoДЬIlx с КoЛЬцoм' ПеpеHесTИеto B чaUIKy Петpи ИЛИ It бoлее глyбoкylo ПoсуДy, нaПoЛHrнHy}O.C)TеПЛЬIl\,{ (з840физиoлoГИческиM paсTl]opoм.
oпустить шrrll_TеЛЬ B paсТBop TaKиМ oбpaзoм, чтoбьt бyмaxнoе KoЛЬLцo с ЗapoдЬIrrlеМ paсПoЛaГaпoсь Ha ПoвеpхЕloсTИ paсТBopa (кoльцo Hе ДoЛxHOнaмoкaть), a шIПaTеЛЬ с )КеЛTКoM .цoЛ)КHЬI бьlть пoгp1rкснЬI B pa-сTBop. Пpидеpxивaя б},п,lalкнoе КoЛЬцo с )KеЛToчнoй oбoлoчкoй пин_цеToМ' }IaLIaTЬ IrpoизI]ol1иTЬ lliПaТеЛrМ КopoТKllе кoлебательH Ь]е .цt]и_ЖеHИЯ B ГopИ]oHТальнoЙ ПЛoсKoсTи9. Чеpез 30-60 с' Пo-Пpе>кнеMy ПpиДepХиBaя KoЛЬ,Llo с oбoлoч_KoЙ ПинЦrToМ Ha ПoBеpxHoсTt4 paсTBopa' oсTopo)КHo OTBесTи lIIПa_TеЛЬ B сTopoЕry и BниЗ oT KoЛЬцa' нo нr BеpTиl(ttЛЬнo BHиз, a ПoДиaгoHaЛи B сTopoнy' ПpoTиBoПoЛo)КHyto пиHЦеTу.
Пpи этoм >кел_ToK oTДеЛиТся oТ ЗapoДьtrпa. Пoсле ПpеKpaщенИя yДеpЖИBaHИЯ ГIИHцеToМ кoЛЬцa ЗapoД'ЬIl.lj И КoЛЬцo .цoЛ)KнЬI oсТaTЬся ПЛaI]aTЬ т{a Пo_BеpхF{oсTи paсTBopa.Если б},ътaжHoе кoЛЬцo c эмбpиoнoм нaМoKЛO и нaчaПo ToH),,TЬ,сЛеДyеT rТoДдrp)KиBaTЬ егo ШIПaTеЛrM' Hе дaBaTЬ oПyсTиTЬся Ha.цHoи пpo.цoлKaТЬ oTМЬIBKy /цo ПoЛl]oГo oT.цсЛсFIиЯ )КсЛTKa (pис. 89, ,4).l0. ПoДвесTи Пo.ц пЛaBaloщееКoЛЬцo ПprДМеTнoc сTrКЛo и BЬlнyTЬ rгo BМесTе с ЗapoДьIlIIеМ иКoЛЬцoм (pис.
89, Б, R). ПoместитьсTеKЛO B vaшKy Петpи и ПoсTaBиTl,ПoД МиКpoскoп. PaссмаTpиBaя зapo_ДьlШI' сЛе.цует обливaтЬ егo TеIIЛЬIМфизиoлoгиtIесKиM paсTBopoМ иЗПиПеTKи \IЛИ HaJII4TЬ ЭToT paсTBoI)B чaшкy Петpи.B yслoвияхПpaKTиKTМa BМесToфизиoлo гиLIrсКo Гo paсTBopa Мo)КнoиспoЛЬЗoBaTЬ TrПЛylo BoДy, чTo ГIo_зI]oЛяrT нaблюДaть сеpДеЧIIЬIе сo_Кpaщения B TечеHие HесKOЛЬKихМиF{yT.Cтaдии HopмaлЬнoгo paзBv|тИЯ цЬlплeнкa (oт нaчaлaи дo 5 сyтoк иHкyбaции) (пo M.
H. Paгoзинoй)КЛaссиЧеский oбr'ект эмбpиoлoгии' иМеHбoЛЬUIaя I{aсTЬ иссЛеДoвaниЙ loI]ьIfloЛнrнaoбЪrКTеll() IIa ЭToM(Gаllus Doшеsti,сus) OTH6сиTся KKуpицaптиц.|)llЗBиTиIoД'oмaшняяссt'lействy Gallidaе. Пopoдьt Куp нrсKOЛЬKo paЗЛиlIaIoTся тТo ПpoинlOЛ )KиTrЛЬI-Ioсти эмбpиo HitЛ ЬHo Гo pa зB] tTия. Taк, .цлителЬнoсТЬЛopoд сoсTaBЛяеT 20 сугoк, a МясЕIЬIхкyбаuии яиц Kyp2l сутки'tйцеЕloсKиxlIOPoД.oвyлиpoвaвtшaяt яЙЦеKЛrl'Ka KуpицьI o.цеTa ToЛЬКo )KeЛToI{нoиtlболoчкoй.
Пoсло ol]yЛЯции oнa бьtстpo ПrprЗprBarT и, пo неKo.ГopЬlп4д{aннЬIN,{, TеpяrT спoсoбнoсTЬ OПЛoД'oTBopяTЬся у)Kе чrpез40 мин ПoсЛr oByЛяции. СпеpмaтoзoиДЬ| ПrTyхa спoсoбHЬI сoxpal]яTЬся I] пoЛoвЬIx ПуTях Kyp oT l2 дo 35 дней. B вopoЕIKу яйцевo,цa'Эмбpиoн Kypr4uЬIJI/lе ПpoисхoДиT oПЛoДoTBopениr' сПеpМии ПoПад'aЮT нa TprTЬи с},TKиПoсЛr сПapИI]aHия I4III4ИCКУCCTBrI{нoГo oсrМrнеHия. B яйцo BсrГДa!tpOниKаrT MнoГo сПrpМaToЗoи,цoв. Этo яBЛrHие ЕIaЗЬIBaеTся физиo-paЗBи'ЦoГиЧrсKoй ПoЛисIIеpМиеЙ, oна Hе HаpyшaеT HopМaЛЬнoГo.i.ия. Пеpвaя бopoздa дpoбления oбpaзyется uеpез 3 Ч пoсЛе oByЛя_стaдии 8 блaстомеIlиИ, BТopaя- чrpеЗ 20 мин ПoсЛr пеpвoй.
[o1loв эмбpиoн ДBиГaеTся пo яйцевoдy (этo зaниМaеT 3-6 т), a ПoсЛеДytoщие ДrЛения яйцa вплoтЬ Дo сTaД'ии 128 бластoмrpoB Пpoис_хollяT B <<МaTKс)>. B <.MaTKr,> И КЛoaKe яйцo нaxoДиTся oT |6 дo 24 ч.Paзвитис llЬIПЛrнKa oT I]aчaЛa инкyбaции .цo BЬIЛyпЛrни'I .це_.ГаЛЬнo изyleнo, ИдЛЯ l{eгo сoсTaBЛеl:tЬI Пoдpoбньlе тaблицьl нopMtlпЬFIoгo paЗBиТия (M.H.PaгoЗинa, l96l). B Дaннoм пoсoбии мьl||l)ИBoД.ИМ ТoЛЬKo BЬIД.еp)KKИ vIз ЭтИX таблиц, oхBаTЬlBаЮItIие Пеpи-oT HaЧfu.Ia инкубaции Дo 5-гo.цня инкyбaции BKЛIoчиTоЛЬHo, T' l.llcpиoДЬI ГaсTpуJI'tции, нейpуляl ЦИLL L4 paннегo opгai{oГrHеза (всегo2'7 из 46 cтaДиil' HopмaЛЬнoГo paЗBИTия) для эмбpиoнoв яtйЦенoс_t] I]идy'ttoЙ пopoДьI Kyp- белoгo ЛегГopнa.
Cлсдyет, o.цЕIaКo, иМеl.Ь(|.Гo oПpе.ц.eЛеннoс BpеМЯ П()Д.oГpеt]а яЙцa не ГapaI{TиpуrT lIoЛУtIеHия.l.oчHo зaД.aннoй сТaДИИ pазBИТия Зapo.цЬIшa. Этo мoxеl.Зal]ИсcТЬ oTl\,t}{oгиx пpиtlИн. K нaибoлее сyщeсTI]eнHЬIМ иЗ них oT1loс'll.с'l сЛеД'y-(),ц}oЩие :Pис. 89. Пpи гoтoвltсн иc ToT.LП ЬHoГoПpеПltpaTa эмбpиoIlli KypицЬt 4_гo дtlrlи н,1-кyбации:oтмьIвка oт xеJlТKа заpo/цЬIшlil KypИL(ЬtB KpисТiLrIЛlJЗаТоpе с теплoй воДoЙ ttпи физиo,цoГиЧссКI,{М paсТBoрo\l; 6, B- пrpснoс пpсB192Пapaтa Ha llреl1\lеTнoе с.гeK]loгeнrTиЧrсK'IЗ2lKprГIЛ с Hньtй oпpеделенньrй TеМ П paЗ|]И.ГиЯ зa-po,цьttлей y paЗнЬIх rropo/l Kуp; paЗЛиLIия B сTa.цияx paзRИTИ'l зapoДЬrIшеЙ B МoМснT иx ПoГIаД.аHИ'I |] иHKyбаTop; paЗЛиtlиЯ t.} сpOKах и TrMrtеparypе xpaI{еHи't яицl1o иttкyбaЦии.
Cю.цa>ке ol.Hoс'lTс'l тaкиr (laк_.гopЬI' KaК paЗЛиtlия ТrMllсpzlTypьI BtЦ"Tpи инкyбaтoрlr' TиП инкубaT.opa И МесTo B неM яйцa. orlpcДеЛеннoе ЗI{aЧrI{ие МoГ},Т иMеТЬ TilКХеи}lДИBИД.у{rЛЬHЬlе pa]ЛИtlИ'l pil]Меpoв и фopмьt ltЙшlt' ТoЛtllИHa ЛИItевoй скopл1тtЬl и .цp. Tипи.tнo paЗBИТЬIМи зapoд(ЬlПlllMt't Д,Tя Ka)KIlЬlХПoЛHЬIх с},ТoK ИHKубaции M|,I СllИТilЛИ Те' tlИсЛO KOТopЬlх H[l ДllHHoЙСТallИи paзBиTИя и ДЛ'I ДaHHoГo BpeMени бьtлo M[lKCИMzшЬI]ЬlМ.l9зCmаdшя 1. Пoсле omклrldкu яйца. Стaдuя дo oбрaзoBaнI,lя ПеpBиtl_нoй пoлoски. <.ЭмбpиoнаJIЬнЬIй ЩИToK> Мo)KF{o BиДеТЬ блaгoДapянaКoПЛе}IиIo IсlrToK в зaдней ПoЛoвине по.ц блaстo,цеpмoй.Cmaduя 2. Hачальная сmаduя oбpазoванuя nеpвuuнtэti |l0лoск!| (сlбыu-нo 6--7 u uнкубацuu).
ПepвиЧнaя ПoЛoсKa BПеpвЬte ПoяI]ЛяеТсЯBвиДе KopoTКoГo КoничrсKoгo },ToЛЩения y зaДHеГO Кpa'I сBеTЛOГOлoля (аrео pеlluсidа). Егo шиpиrla у oснoвaнИЯ ГIoЧTи рatsIla ДЛиt{c(0'3-0,5 мм).rcuСmаduя 3. Пpoмeэrcуmoчнaя сmаduя oбpазoванuя пеpвttaноЙ пaл0с(l2- IЗ u). ПepвИЧI7aЯ ПoJIoсKa ПpoсTИpaeTся oT зaДHеГo KpaЯэМбpиoнаЛьнoгo щиTкa Дo цrнTpa сBrTЛoГo пoля.
oнa ДoBoЛЬHotIIиpoKa нa BсеМ сBoеМ ПpoTяxrFtl4lд oсoбеннo на гpaHице с .ГеI\4_нЬIМ ПoлеМ (arеа opаque). Пеpвиvнoй бopoздки HrT.Сmоduя 4. СmaОuя dефuнutltuвнoЙ nеpвuaнoti naLloскu {1B- 19 ч).Пеpвиvнaя пoЛoсKa .цoсTигaеТ свoей МаKсИМаЛЬнoй длиньt (сpед_71ЯЯ NIИlнa paBTIa l,BB мм). Имеются ПеpBиIIнaя бopoздкa, ПCpI]иI|_НaЯ ЯN|Ka- ГензrнoBский узелoк.
Cветлoе IToЛе сTatjoBиTся ГpyllJе_Bи.цнЬIМ' ПrpBичнaя ПoЛoсKa ЗaниМarT oт 2/З дo З/4 еГo дlЛиI{ЬI.Сlпаdшя 5. ГoлaвнoЙ ompoсmott (19- 22 и). Хоpда' l,lлtr головlloЙoTpoсТoК' B BиДе сTpе)KH']' oбpaзoваннoГo HaКoПЛеAtи0M MrЗOДеpМЬI' ПpoсTИparTс'I t]пеpеД oТ геHЗенoBсKoГo yЗrЛKa. Голoвнaя сю'IадКarще F{е ПoЯBиJIaсЬ. Taк кaк ДЛИнa гoЛol]HoГo OTpoс-ГКa yBсЛИчиBaеTcЯ, ДЛЯ бoльпrей ToчFIoсTи oПprДеЛrниЯ сТaДИИ сЛrДyеT yKaЗьII]aTЬегo paзMеp. {ля дaннoiт.
стaД,ии дЛИHa ГoЛoBнoгo oTpoсTKa I]aBHa0,2 мм.Спаdшя 6. Гoлoвная склаdка (23-25 и). Bпеpеди oT хopД'ЬI oбpaЗoBzulaсЬ хopoшo вЬIpa)Kеннaя ЭKToДеpMzlJlЬI{а'I сКЛaДКa, Ko].opa'Ioбoзнaчaет TепеpЬ пеpедьtий KoF{ец сoбственнo заpoДьI шIir. TyлoBищнaя МrЗo.цеpMa еще Hе сегМrнТиpoвaнa. Этa СТaДИЯ сytцОсTByеТKopoTKoе BpеМя' TaK KaК ГoЛoBнaя скЛаДКa И Г7еpBa'I Пapa сoi\,IиТoBбьlстpo сЛе.цyIoT.цpyГ зa Дp}ТoМ.Haибoльrшее KoЛичесTBo ЗapoДЬIlПей, тroлyvеннЬIх чеpез 24 ч вyсЛoвиях ПpoМьIlпЛrннoй инкубaции, сooTBеTсTByот 6- J_ft стaДияМ' МиT{yс-вapиaHTЬI K эToмy BprМеHи нaхoДЯTся нa 5-й С,TaДI4И, aПЛЮс-BapиaI]TЬr МoГyг ДoсТиГaTЬ бoльшей сТегIеF{и диффеpенци_poBKи, BПЛoTЬ дo 9-й cТaI\ИIт BКЛIоLIиTеЛЬHo.Bьtделение cтaДиil, c 7 -Й пo 14-ю oснoвaнo в ПCI]ByIо oltеpеДЬ нaчисЛr пap сфopпlиpoBaннЬIx и xopol]lo BиДиМЬIХ сoMИToB.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
