Оксид азота и его физиологические комплексы в системах, моделирующих карбонильный стресс и их динамику в организме (1104205), страница 4
Текст из файла (страница 4)
12), с нормировкой на массу ткани в активной зоне резонатораспектрометра. Значения таких параметров (N), усреднённые для всех животных изконтрольной группы, представлены на рис. 13.Максимальные значения параметра N получены для образцов ткани печениживотного. Но нельзя исключить, что этот эффект связан с более высоким содержаниемловушки NO в ткани печени, по сравнению с другими органами, вследствии болееэффективногопереносакомпонентовкомплексов Fe3+-DETC2 из крови в печень.504540Рис.
13. Усреднённые значения параметраN (отношение амплитуды высокопольнойкомпоненты спектра ЭПР NO-Fe2+-DETC2к массе образца ткани в активной зонерезонатора спектрометра). 1 – сердце, 2 –лёгкое, 3 – печень, 4 – почка,5 – скелетная мышца.ОбразцыполучавшихтканиоргановингаляциюN (контр.)3525201510крыс,воздухом305с01высоким содержанием NO, исследовались192345по аналогичной методике.
В результате ингаляции наибольшее увеличение содержанияоксида азота регистрируется в сердце, лёгких и печени животного, а для почки искелетной мышцы данный эффект практически отсутствует (рис. 14.). В целом можносделать вывод, что в результате длительной ингаляции воздухом с повышеннымсодержанием оксида азота наблюдается существенное увеличение содержания NO вгидрофобных областях клеток органов малого круга кровообращения (сердце, лёгкое) и впечени.120Вразделе6.380N, отн.ед.Рис.14.Усреднённыезначенияпараметра N (отношение амплитудывысокопольной компоненты спектраЭПР NO-Fe2+-DETC2 к массе образцаткани в активной зоне резонатораспектрометра),соответствующиеорганамживотныхизобеихэкспериментальных групп.КОНТРОЛЬИНГАЛЯЦИЯ NO1006040200описаноСЕРДЦЕ ЛЁГКОЕ ПЕЧЕНЬ ПОЧКА МЫШЦАисследование изменения уровня NO ворганизме в результате внутривенного введения препарата ДНКЖ с лигандамиглутатиона.
На рис. 15 представлены характерные спектры ЭПР цельной кровиживотного непосредственно после инъекции препарата ДНКЖ (спектр 1), а также в концеопыта (спектр 2). Полученные в начале опыта сигналысоответствуют ДНКЖ,связанными с высокомолекулярными тиол-содержащими лигандами (альбумин,гемоглобин). К концу опыта регистрировались компоненты остаточного парамагнитногоДНКЖ. При этом положение и форма линий этого комплекса соответствовали сигналу,полученному в начале опыта, а его амплитуда была ниже, что отражает распад этихкомплексов в крови и/или их выход из кровотока в ткань органов.
Кроме этого, в спектре2 (рис. 15) в области g=2,03 регистрируются три узкие эквидистантные линии, которые,как известно, принадлежат парамагнитному спиновому аддукту NO-Fe2+-DETC2,образующемуся в результате взаимодействия спиновой ловушки и радикала NO.Вероятно, что после введения в организм спиновой ловушки, в липидных компонентахэритроцитов формируются комплексы Fe3+-DETC2, которые далее переходят в NO-Fe2+DETC2, в результате взаимодействия с NO. Следовательно, в ходе эксперимента, после20инъекции низкомолекулярного ДНКЖ в кровоток, происходит его переход навысокомолекулярные лиганды с последующим медленным распадом этих комплексов, врезультате чего часть молекул ловушкипереходит в форму парамагнитногоРис. 15. Спектры ЭПР цельной кровиживотного после введения ДНКЖ (1)и через 30 мин (2).
a, b, c –компоненты спектра ЭПР NO-Fe2+ДЭТК2.Сигнал ЭПРаддукта NO.1bàc2310315320325330Магнитное поле, мТлЗначения этих соотношений, соответствующих всем органам, представленына рис. 16.8070Видно,введениячтоДНКЖN (ДНКЖ) / N (контр.)Рис. 16. Влияние введения ДНКЖна уровень NO в ткани различныхорганов.1-сердце; 2-лёгкое;3-печень; 4-почка;5-скелетная мышца.6050403020результате10происходит0в12345интенсивное увеличение уровняNO в тканях всех исследуемых органов, но наиболее сильно этот эффектвыражен для сердца и печени животного. Меньший эффект наблюдался дляпочки, а для лёгкого и скелетной мышцы увеличение уровня NO, в результатевведения ДНКЖ, было минимальным, по сравнению с другими органами.Взаключенииподведеныитогидиссертационной работы.21исформулированывыводыВЫВОДЫ1. Показано, что тиол-содержащие динитрозильные комплексы железапроявляют антиоксидантные свойства в различных модельных системах,реагируя с супероксидом и органическими радикалами.2.Показано,карбонильногочтопристрессавзаимодействииметилглиоксалемL-лизинавсусловияхинтермедиатомблизкихкфизиологическим, происходит неферментативное образование органическихсвободных радикалов и супероксидного анион-радикала.3.
Установлено, что продукты взаимодействия L-цистеина и L-лизина cметилглиоксалем могут быть лигандами для новых типов динитрозильныхкомплексов железа.4. Показано, что новый тип динитрозильных комплексов железа, лигандомкоторого являются модифицированный метилглиоксалем цистеин, привведении в кровь образует белковые динитрозильные комплексы скомпонентами плазмы, но не с эритроцитами.5.
Установлено, что в результате длительной ингаляции воздухом сповышеннымсодержаниемоксидаазотанаблюдаетсясущественноеувеличение содержания NO в гидрофобных зонах клеток органов малогокруга кровообращения (сердце, легкое) и в печени.6. Показано, что в результате введения глутатионовых динитрозильныхкомплексов железа происходит интенсивное увеличение уровня NO в тканивсех исследуемых органов, наиболее сильно этот эффект выражен для сердцаи печени животного.22Результаты диссертационной работы изложены в следующих публикациях:1.Шумаев К.Б., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Лакомкин В.Л., Топунов А.Ф.,Ванин А.Ф., Рууге Э.К. Взаимодействие связанных с альбуминомдинитрозильных комплексов железа и активных форм кислорода //Биофизика 2007.
Т. 52 (3). С. 534-538.2.Гудков Л.Л., Шумаев К.Б., Каленикова Е.И., Губкина С.А., Ванин А.Ф.,Рууге Э.К. Антиоксидантное и прооксидантное действие доноров иметаболитов оксида азота // Биофизика 2007. Т. 52 (3). С. 503-509.3.Шумаев К.Б., Губкин А.А., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Свиряева И.В.,Тимошин А.А., Топунов А.Ф., Ванин А.Ф., Рууге Э.К. Взаимодействиединитрозильных комплексов железа с интермедиатами окислительногостресса // Биофизика 2006. Т. 51 (3). С. 472-477.4.Шумаев К.Б., Космачевская О.В., Губкина С.А., Топунов А.Ф.Модификация гемопротеидов метилглиоксалем.
Влияние активных формазота // Материалы XVI международной конференции и дискуссионногонаучного клуба «Новые информационные технологии в медицине,биологии, фармакологии и экологии (Ялта-Гурзуф, 31 мая-9 июня 2008) С.386-387.5.Тимошин А.А., Дроботова Д.Ю., Губкина С.А.,Цкитишвили О.В.,Серебрякова Л.И., Лакомкин В.Л., Рууге Э.К., Ванин А.Ф. Исследованиединитрозильных комплексов железа в организме млекопитающих методомЭПР // Материалы XVI международной конференции и дискуссионногонаучного клуба «Новые информационные технологии в медицине,биологии, фармакологии и экологии» (Ялта-Гурзуф, 31 мая-9 июня 2008) С.384-386.6.Шумаев К.Б., Гудков Л.Л., Губкина С.А., Кумскова Е.М., Рууге Э.К.,Космачевская О.В., Топунов А.Ф., Ванин А.Ф.
Роль метаболитов оксидаазота в условиях моделирующих окислительный и карбонильный стресс //Международной научная конференция и 8-ой съезд Белоруссокогообщественного обединения фотобиологов и биофизиков «Молекулярные,мембранные и клеточные основы функционирования биосистем» (Минск,25-27 июня 2008) Сборник статей.
Т. 2. С. 164-166.7.Тимошин А.А., Дроботова Д.Ю., Губкина С.А., Орлова Ц.Р., ЦкитишвилиО.В., Серебрякова Л.И., Рууге Э.К., Ванин А.Ф. Парамагнитныединитрозильные комплексы железа в организме млекопитающих //Международная научная конференция и 8-ой съезд Белорусскогообщественного объединения фотобиологов и биофизиков (Минск, 25-27июня 2008). Сборник статей. Т. 2. С. 143-145.238.Timoshin A.A., Dobrotova D.Yu., Gubkina S.A., Vanin A.F., Ruuge E.K. Effect of NOdonors and acute regional cardiac ischemia on NO level in rat organs: an EPR study // VIIthInternational Workshop on EPR (ESR) in Biology and Medicine (Krakow, 3-6 October2007).
Abstracts. P. 76.9.Шумаев К.Б., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Топунов А.Ф., Ванин А.Ф., Рууге Э.К.,Ланкин В.З. Возможные механизмы регенерацииоксида азота из продуктов еговзаимодействия с активными формами кислорода // Материалы XV международнойконференции «Новые информационные технологии в медицине, биологии,фармакологии и экологии» (Ялта-Гурзуф, 31 мая-9 июня 2007). С. 403-405.10. Губкина С.А., Шумаев К.Б., Рууге Э.К., Космачевская О.В., Ланкин В.З., ТопуновА.Ф., Ванин А.Ф. Действие оксида азота на модификацию аминокислотметилглиоксалем // 5-я национальная научно-практическая конференция смеждународным участием «Активные формы кислорода, оксид азота,антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 18-22 сентября 2007).
Сборниктрудов. С. 22-23.11. Тимошин А.А., Орлова Ц.Р., Губкина С.А., Ванин А.Ф., Рууге Э.К. Регистрацияоксида азота в ткани органов после инъекции динитрозильных комплексов железа, атакже ингаляции NO // 5-я национальная научно-практическая конференция смеждународным участием «Активные формы кислорода, оксид азота,антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 18-22 сентября 2007). Сборниктрудов. С.
191-193.12. Рууге Э.К., Свиряева И.В., Губкина С.А., Шумаев К.Б. Митохондрии сердца: ответна патологический стресс // Научная конференция МГУ «Ломоносовские чтения»,секция физики (Москва, 17-27 апреля 2006). С. 107-108.13. Рууге Э.К., Шумаев К.Б., Губкин А.А., Губкина С.А., Гудков Л.Л., Свиряева И.В.,Топунов А.Ф.
Влияние ионов железа и железосодержащих белков навзаимодействие метаболитов оксида азота с активными формами кислорода //Международная научная конференция «Молекулярные, мембранные и клеточныеосновы функционирования биосистем» (Минск, 21-23 июня 2006). Сборник статей.Т. 2. С. 236-238.14. Свиряева И.В., Рууге Э.К., Губкина С.А., Шумаев К.Б. Ответ митохондрий сердца напатологический стресс // Международная научная конференция «Молекулярные,мембранные и клеточные основы функционирования биосистем» (Минск, 21-23июня 2006). Сборник статей, Т. II.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
