Диссертация (1102418), страница 9
Текст из файла (страница 9)
После связывания происходит фагоцитированиелиганд-рецепторного комплекса с одновременной активацией адаптерных51молекул и ядерных транскрипционных факторов. Совместное связываниелигандов SR-A с TLR-4 рецептором в свою очередь запускает активациюмакрофагов через NF-κB путь [209].1.4.4. Лактозилцерамидный рецептор (LacCer)LacCer является патоген-распознающим рецептором на поверхностинейтрофиловигликосфинголипид,эндотелиальныхкоторыйклетоксодержитипредставляетгидрофобныйсобойцерамидигидрофильный сахарный фрагмент.
Рецепторы формируют микродомены наплазматической мембране вместе с тирозинкиназой Lyn Src семейства и GαiсубъединицейгетеротриметрическогоG-белка.Основные компонентыLacCer – длинные жирные кислоты C24:0 и C24:1 [210].Лигандами к этому типу рецепторов являются β-(1→3)-глюканыбактерий и грибков.
К примеру, β-(1→3)-глюканы клеточной стенкиPneumocystis carinii увеличивают синтез NF-kB, MIP-2 и TNF-α по пути черезпротеинкиназу С [211], что было обнаружено и у Candida albicans,Cryptococcusneoformans,Saccharomycesблокирование CR3 и LacCercerevisiae.Показано,чтоантителами приводит к отсутствиюактивационного ответа нейтрофилов на воздействие β-глюканов. При этом внейтрофилах при связывании LacCer с лигандом стимулируется выработкаактивных форм кислорода через Lyn-киназу по пути MAPK и PI3K, спомощью которых происходит обезвреживание микробов [212]. Такжеопосредованночерезсвязываниелактозилцерамидногорецепторавнейтрофилах регулируется хемотаксис (активация рецептора приводит квыделению хемоатрактанта IL-8), секреция цитокинов, что приводит кусилению противомикробного действия нейтрофилов [213]. К примеру, PGGглюкан, растворимый β-(1→6)-глюкан с β-(1→3) боковыми цепями издрожжей Saccharomyces c., является, при связывании с мембраннымфрагментом LacCer, иммуномодулятором, что выражается в стимуляцииактивации лейкоцитов по противоинфекционному механизму, пролиферации52мегакариоцитов и миелоидных клеток.
Было определено, что различныеполисахариды имеют разную силу связывания с LacCer (в моделиконкурентного связывания) при этом обнаружилась наибольшая аффинностьк лактозилцерамидному рецептору у гликогена – 134% и у β-(1→3,1→6)глюканов – 117% по сравнению с контролем при отсутствии конкурента[214].1.4.5.
Рецепторы системы комплемента (CR)CR-рецепторыявляютсямембраннымигликопротеидаминаповерхности иммунокомпетентных клеток, комплементарными фрагментам ибелкам системы комплемента. Также присутствуют на плазматическихмембранах нейтрофилов, моноцитов, макрофагов, дендритных клеток и Влимфоцитов. Подразделяются такие рецепторы на 4 типа: связывающиемолекулы C1q, C3b, C4b (CR1 или CD35); C3dg, iC3b (CR2 или CD21); iC3b,iC4b (CR3 или CD11b/CD18); iC3b (CR4 или CD11c/CD18).
Однако из всегокласса этих рецепторов пока установлено связывание с полисахаридами типаβ-глюканов только у CR3. При этом CR2 структурно не имеет возможностидля передачи внутриклеточного сигнала из-за короткого внутриклеточногоучастка.Рецептор CR3 принадлежит к семейству адгезионных интегринов,состоит из доменов CD11b и CD18 и распознает широкий спектр лигандов иобладает функцией адгезивной молекулы. У этого рецептора имеются двасайта связывания, один из которых расположен на C-конце и предназначендля β-глюканов, а второй, на N-конце – для фрагмента системы комплементаiC3b.
Связывание iC3b зависит от концентрации ионов Mg 2+. Содержит βсубъединицу (трансмембранный гликопротеин) молекулярной массой 155кДа и ион-зависимый металлсвязывающий сайт (MIDAS), способствующийлиганд-связыванию свободного рецептора [215].При связывании β-глюканов и iC3b рецептор CR3 усиливает адгезию кантигену и запускает комплемент по классическому пути активации, что53приводит к стимуляции цитотоксичности при противораковом действиииммунокомпетентных клеток [216].
Если β-глюканом выступает зимозан, топроисходит стимуляция NK-клеток и усиление их противоопухолевойактивности. Более того связывание β-глюканов вызывает конформационныеизменения домена I на С-конце, зависимые от магний- и протеинтирозинкиназ. Это действие приводит к тому, что CBRM1/5 выставляется иактивируется из этого домена своим эпитопом, который участвует всигнализацииприфагоцитозеицитотоксическомдействиинаопсонизированные клетки. Благодаря этому открытию, β-(1→3)-глюканыстали использоваться в качестве адъювантов в терапии моноклональнымиантителами трансформированных клеток [217].При активации нейтрофильных и моноцитарных рецепторов CR3происходит стимуляция фагоцитоза, секреция реактивных метаболитовкислорода (ROM) и специфических гранул (у нейтрофилов).Рецептор CR3 участвует в антител-зависимом (IgE) цитотоксичномответе эозинофилов, которые секретируют ROM в ответ на распознаваниепаразитарного антигена, а также в выработке NO моноцитами.
Рецепторпринимает активное участие в адгезии лейкоцитов к эндотелиальнымклеткам и их миграцию при воспалении, за счет реорганизации цитоскелетаклетки путем фосфорилирования паксилина (белок цитоскелета). При этомсвязываниерецептораслигандомприводиткфосфорилированиюэндогенных протеинов, активации NADPH оксидазы и фосфолипаз А2 и D.Рецептор CR3 участвует в противораковой активности, связанной сцитотоксичностью при опсонизации трансформированных клеток. Этотэффект был экспериментально продемонстрирован для β-(1→3)-(1→4)глюканов, выделенных из ячменя и применяемых перорально, а также дляWGP-глюкана, который процессируется макрофагами и доставляется ими влимфоидные органы, где они связываются с гранулоцитами [218].
Схожаяактивность была продемонстрирована в случае карциномы почек с участиеммоноклональных антител [219].541.4.6. С-тип лектин-подобные рецепторы (CTLR)Рецепторы семейства ленктин-подобных С-типа (CTL) изначальнорассматривалиськаксвязывающиеуглеводыпосредствомуглевод-распознающего домена (CRD), который за счет концевых аминокислотныхпоследовательностей способен связываться с маннозами и галактозами вразличных структурах с участием ионом Ca2+ и карбонильных групп,расположенных на специфических локусах CRD. Этот же ион связывается и суглеводом. На CRD имеется несколько сайтов регулируемых кальцием, нодля связывания карбогидратов основным является второй.
При этом типсвязываемой сахарной молекулы и его место на рецепторе зависит отаминокислотной последовательности. К примеру, галактоза распознаетсяпоследовательностью Gln-Pro-Asp, а манноза – Glu-Pro-Asn [220, 221].Существуетбольшоеколичестворецепторов(CTLD),имеющихгомологичные структуры CRD домену в своем составе, поэтому ониназываются C-тип лектин-подобными рецепторами (CTLR). Основная петляуглевод-связывающего домена плотно упакована и стабилизируется двумясульфидными мостиками, что делает эту структуру сильно консервативной.Более того, рецептор весьма распространен у животных и структурно, ифункционально очень схож у мышей и людей, единственное отличие –человеческий тип рецептора альтернативно сплайсированный [222].На настоящий момент к семейству CTL принято относить более тысячиразличных рецепторов, которые подразделяются на 17 групп, которые могутсвязывать различные, не только полисахаридные лиганды.
Связываниеприводит к активации различных клеток и запуску разного рода каскадов, засчет чего происходит: распознавание патогенных паттернов; регуляциягомеостаза; миграция кератиноцитов, способствующая заживлению ран[223]; регуляция иммунного ответа через регуляцию уровня цитокинов ихемокинов (TNF, IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-12, CXCL02, CCL-3, GM-CSF и др.[29]); клеточная адгезия; фагоцитоз [224].
Рецепторы этой группы могут55активировать различные сигнальные каскады, опосредуя мотивы ITAM,ITIM, DED и др.Интересдляописаниясточкизренияизученияβ-гликановпредставляет собой кластер рецепторов Dectin-1, по имени одного изрецепторов этого кластера CLEC7A (Dectin-1). Данный кластер включает всебя 7 различных рецепторов: Dectin-1, CLEC-9A, CLEC-2, MICL, MAH,CLEC-1, LOX-1.Кластер Dectin-1 является V группой лектин-подобных рецепторов Стипа, которые содержат один домен CTLD, связанный с внутриклеточнымсигнальным доменом посредством трансмембранного стержня. Каждыйрецептор из этого кластера обладает своим сигнальным каскадом за счетналичия одного ITAM-подобного, ITIM и домена-эффектора смерти (DED)на внутриклеточной части рецептора, при этом активность также связана свлиянием на натуральную совокупность генов киллеров (NKC).
Рецептор, восновном, распределяется на миелоидных типах клеток: макрофагах, [225],нейтрофилах, дендритныхклетках, которыеявляютсяосновнымивузнавании β-глюканов [226]. При этом рецептор CLEC7A также представлени в трансформированных клетках, например, в клеточных линиях ракамолочной железы [227]Рецептор Dectin-1 – небольшой, трансмембранный рецептор типа II,содержит ITAM мотив и внеклеточную лектин-подобную С-типа укладку. Онучаствует в распознавании различных β-глюканов и является основнымлейкоцитарным рецептором для узнавания бактерий, дрожжей, растений игрибов, а также их фрагментов.
CLEC7A способен распознавать β-(1→3)глюканы с минимальным размером 9–10 моносахаридных звеньев, при этомусилению связывания способствуют боковые β-(1→6) связи, которые и самимогут выступать в качестве лиганда [213, 228], при этом значимыми длясвязывания являются His в положении 223 и Trp в – 221 [229]. Рецептордимеризуется, что приводит не только к передаче сигнала, но и кобразованию еще одного сайта связывания глюканов. Также лигандами56являются пока не установленные молекулы не глюканового, но гликановогопроисхождения.Связывание Dectin-1 с лигандом запускает различные клеточныеответы, а его расположение на иммунокомпетентных клетках и способностьсвязывать глюканы предопределяет его роль в иммунной реакции напатогены.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
