Диссертация (1102418), страница 19
Текст из файла (страница 19)
Максимальныйуровень КТР достигал 15%. В силу особенности метода не было учтено, чтовоспалительная реакция и некротические процессы влияют на вес опухоли.Темнеменее,существенные.морфологическиеВконтрольнойотличиягруппемеждугруппаминекротическиебылипроцессывцентральной части начались лишь на 14-ый день после перевивки, а вопытных группах – на 11-ый день, причем к 20-му дню прогрессировали ибыли широко распространены.Известно,интенсивнымичторазвитиепроцессамикарциномыметастазированияЛьюисвхарактеризуетсялегкие,которыепрослеживаются, начиная уже с 4 суток после трансплантации опухоли.Метод позволяет макроскопически подсчитывать количество колонийопухолевых клеток в легочной ткани.
Которые хорошо регистрируются после10-ти суток развития опухоли.Косвенным показателем развития метастазов в легких могло служитьувеличение массы легких по мере развития опухолевого процесса. Динамикаизменения массы легких у контрольных и опытных животных представлена втаблице 25. Четкой динамики в изменениях показателей массы легких уконтрольных и опытных животных не прослеживается. Максимальныйантиметастатический эффект наблюдался к 20-ым суткам в группе животныхс дозой 0,5 мг/кг, пятикратное введение, который составил 42,4%.
Очевидно,данный показатель не является достаточно информативным для оценкипроцессов метастазирования первичной опухоли карциномы Льюис.124Таблица 24. Влияние полисахарида на вес первичной опухоли вмодели карциномы легких Льюиса in vivo.Группа Доза и курс Вес опухоли, мг (M ± м) / (КТР, %)Рост,HTLPразы5 день 11 день 14 день 17 день 20 день10,5 мг/кг790 ±4465 ±однократное 264 /652 / (введение(13,2%) 12,1%)5780 ±735 / (7,0%)5682 ± 7472 ±965 /441 /(14,5%) (13,4%)9,520,5 мг/кг853 ±пятикратное 216 /введение(6,3%)3811 ±603 /(4,3%)5546 ±839 / (2,7%)7506 ±603 / (13,0%)7335 ±278 /(15,0%)8,635,0 мг/кг845 ±однократное 149введение(7,1%)4413 ±455 / (10,8%)5362 ±70 /(0,7%)7475 ±738 / (12,5%)7920 ±857 /(8,2%)9,445,0 мг/кг905 ±пятикратное 347введение(0,5%)4287 ±660 / (7,6%)5042 ±424 /(6,6%)5045 ± 7533 ±563 /481 /(24,0%) (12,7%)8,35Контроль3983 ±5125401 ±3816643 ±3819,5910 ±1108630 ±313Таблица 25.
Влияние полисахарида на изменение массы легких уконтрольных и опытных животных карциномы Льюиса.Группа**Доза и курсвведенияHTLPВес легкого, (M ± м) / (Торможение, %)5 день11 день14 день 17 день20 день10,5 мг/кг159,0 ±Однократное 7,4 / (3,2%)157,3 ±26,5 /(0,9%)165,7 ±13,6 / (31,5%)114,0 ±11,3 /(21,5%)*150,0 ±1,7 /(36,4%)*20,5 мг/кг155,0 ±Пятикратное 15,8 / (0,6%)158,7 ±13,4 /(0%)142,7 ±7,6 / (13,3%)147,0 ±7,0 / (1,2%)136,0 ±9,9 /(42,4%)*35,0 мг/кг152,5 ±Однократное 13,4 /(1,0%)155,7 ±11,1 /(1,9%)142,0 ±5,7 / (12,7%)152,0 ±14,9 / (4,6%)147,3 ±4,7 /(37,6%)*45,0 мг/кгПятикратное156,3 ±11,9 /(1,5%)164,3 ±32,4 / (30,4%)155,0 ±35,4 / (6,7%)166,0 ±4,0 /(29,7%)*139,5 ±51,6 /(9,4%)12556Контроль154,0 ±20,4158,7 ±7,4126,0 ±25,2145,3 ±6,4Нативныемыши* Статистически значимое (p<0,05) отличие от контроля236,0 ±10,3148,0 ±16,0** Среднее по 5-ти животнымДанные прямого подсчета количества метастазов в легочной тканиконтрольных и опытных животных представлены в таблице 26.Таблица 26 демонстрирует влияние полисахарида из Helianthustuberosus L.
на процесс метастазирования. К 14-му дню после введениялегочной карциносаркомы Льюиса обнаруживалось до 11-ти колонийраковых клеток в легких контрольной группы. Уже, начиная с 14-го дня,введение HTLP эффективно тормозит процесс метастазирования. Введениеполисахарида в дозах 25 и 5 мг/кг, однократно тормозит процессметастазирования на 60–75% по сравнению с контролем.Отчетливый антиметастатический эффект прослеживается и в болеепоздние сроки развития процесса.
На 17-ые сутки роста опухолиантиметастатический эффект наблюдается во всех группах животных.Ингибирующий эффект варьирует в зависимости от дозы в пределах 30–50%.Таблица 26. Влияние полисахарида на процесс метастазирования влегкие карциномы Льюис (прямой подсчет колоний).Группа Доза и курсКоличество колоний опухолевых клеток в легкихвведения HTLP на различные сроки после трансплантациикарциномы Льюис14 день17 день20 день125 мг/кгОднократное4,0 ± 1,216,7 ± 9,4-20,5 мг/кгоднократное14,7 ± 1,513,0 ± 4,214,5± 9,230,5 мг/кгПятикратное10.3 ± 5.927,3 ± 5,331,0 ± 5,612645,0 мг/кгОднократное5.3 ± 2.011,7 ± 1,121,3 ± 3,255,0 мг/кгПятикратное9.7 ± 1.115,0 ± 7,124,5± 0,76Контроль11.3 ± 4.123,3 ± 1,558,0 ± 8,2* в таблице представлены данные, усредненные для трех животныхНа последний срок наблюдения – 20-ые сутки, антиметастатическийэффект полисахарида оказывается наиболее выраженным. Данные поантиметастатическому эффекту представлены на диаграмме.Торможение процесса метастазирования к 20-ым суткам составляет 50–75%, колеблясь в этих пределах, в зависимости от дозы и режимаприменения полисахарида.Необходимо подчеркнуть, что максимальный антиметастатическийэффект полисахарида проявляется при однократном введении HTLP, как вмалой 0,5 мг/кг (2-ая группа), так и в дозе 25 мг/кг (1-ая группа), чтонаглядно видно на рисунке 22.
В указанных дозах HTLP ингибирует процессметастазирования в легкие на 75 и 65 % (соответственно на 20-ые и 14-ыесутки развития опухоли). Следует отметить, что у животных, получавшихданныедозысущественнополисахарида,меньшееметастатическиеколичествоопухолевыхколониисодержаликлеток,посколькурегистрируемые метастазы были значительно меньшего размера, чемнаблюдаемые у контрольных мышей [275].127Влияние HTLP на процесс метастазирования70,0060,0050,0040,0030,0020,0010,000,005 мг/кг однокр.5 мг/кг пятикр.0,5 мг/кг однокр.0,5 мг/кг пятикр.КонтрольРисунок 22.
Влияние HTLP на количество колоний метастазов в моделиLLC. По оси Y – количество колоний.3.3.12.3.3.12.1.РадиозащитаЭкспериментальная модель выживаемости гемопоэтическихстволовых клетокРезультаты опыта по оценке противолучевой активности полисахаридапо тесту выживаемости гемопоэтических стволовых клеток, формирующихселезеночные колонии (КОЕ-С) на 8-ые сутки после облучения мышейгибридов F1(CBA×C57B1/6) приведены в таблице 27.128Таблица27.Результатыопытапотестувыживаемостигемопоэтических стволовых клеток.Группа ГруппаМасса селезенки, КоличествомгКОЕ-СM ± m.в группе, M± m.1Контроль, облучение 600 рад.31,5 ± 1,50,8 ± 0,12Введение за 3 ч до облучения32,1 ± 0,51,6 ± 0,2*3Введение за 1 ч до облучения33,8 ± 1,81,9 ± 0,4*4Введениепосле34,7 ± 1,41,9 ± 0,3*Введение через 24 ч после33,0 ± 1,31,6 ± 0,3*через1чоблучения5облучения*Cтатистическизначимое(р<0,05)различиеспоказателемконтрольной группы по числу КОЕ-С.Как можно видеть по тесту выхода КОЕ-С в подопытных группахобразуется в 2,0–2,3 раза больше колоний спленоцитов, чем в контрольнойгруппе.
Это свидетельствует о наличии у исследуемого полисахаридаспособности защищать гемопоэтические стволовые клетки от действияионизирующейрадиации,подобнотакназываемымпрепаратамс«биологическим» механизмом противолучевого действия.3.3.12.2.Экспериментальная модель абсолютной выживаемостиРезультаты опыта по оценке терапевтических и радиопротективныхсвойств HTLP в опытах на мышах при внутривенном способе введения вусловиях острого облучения приведены в таблице 28.129Таблица 28. Результаты опыта по оценке противолучевой активностиполисахарида HTLP.ВремяДоза800 радвведенияпрепарата,ЧислоВыжилоЧислоВыжиломкг/мышьживотныхАбсживотныхАбс12013652000,0102016802015,010020126019315,8120168020420,0102016802000,0100161487.520210,0120199520210,01019178520210,0100191684.22015,0Через 24120168020735,0часа1020168020840,010020168019631,6За 1 часЧерез1часЧерез6часов850 рад%%При этих дозах облучения выживаемость мышей в контрольных группахбыла равна 20% и 0%, для 800 и 850 рад соответственно.Из таблицы 28 видно, что HTLP обладает радиопротективнымисвойствами.
Максимальная выживаемость при облучении 800 рад составила95% при введении через шесть часов после экспозиции в дозе 100мкг/животное, что выше контрольных значений почти в 4,8 раза, аминимальная – 65%, что выше контрольных значений почти в 3,3 раза. Приэтом для дозы 850 рад значения составили – 40% и 0%, соответственно, призначении в контроле – 0% выживших подопытных животных.Результатысвидетельствуютотом,чтовданныхусловияхполисахарид HTLP обладает противолучевой активностью.
Исследованныедозы 1, 10 и 100 мкг/животное проявляют одинаковую активность, что еще130больше увеличивает терапевтическую широту. Обращает на себя вниманиевысокий терапевтический радиозащитный эффект полисахарида в течениесуток и это очень важное качество соединения дает возможность оказатьэкстренную помощь практически в любой точке земного шара. Так какприменение полисахарида в качестве радиопротектора обеспечивает высокийрадиозащитный эффект, было предположено, что этот эффект основываетсяна стимуляции роста колоний гемопоэтических стволовых клеток ицитокиновой активности.Поскольку гемопоэтические стволовые клетки формируют клеткикрови, обеспечивая жизнедеятельность организма, стимуляция роста колонийгемопоэтических стволовых клеток приводит к повышению порога дозыоблучения, необходимой для деструкции критического количества стволовыхклеток и уменьшению кровообращения, как следствие – к снижениювыведенияметаболитов,продуктоввзаимодействияγ-облучениясорганизмом и снабжению тканей полезными веществами.Цитокины (лимфокины, монокины, интерфероны, IL-1) проявляютпротиволучевое действие, основанное на их гемо- и иммуностимулирующейактивности,атакжеспособностиповышатьэндогенныйфонрадиорезистентности, сохраняя его длительное время.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
