Диссертация (1102418)
Текст из файла
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕНАУКИ ИНСТИТУТ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИИМ. В.А. ЭНГЕЛЬГАРДТА РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУКГЕНЕРАЛОВ ЕВГЕНИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧБИОФИЗИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ И ВЗАИМОДЕЙСТВИЕС РЕЦЕПТОРАМИ DECTIN-1 И TLR-6ПРИРОДНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ ИЗ HELIANTHUS TUBEROSUS L.03.01.02 – БИОФИЗИКА03.01.08 – БИОИНЖЕНЕРИЯДИССЕРТАЦИЯ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТАФИЗИКО-МАТЕМАТИЧЕСКИХ НАУКНаучные руководители:доктор биологических наук,профессор П.М. Чумаковдоктор физико-математических наук,профессор Л.В.
ЯковенкоМосква - 2017ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕ .......................................................................................................... 71.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ......................................................................... 171.1.Классификация и строение углеводов ................................................ 181.2.Биологическая активность полисахаридов ........................................
201.2.1. Функции и активности полисахаридов............................................... 201.2.2. Обзор биологически активных полисахаридов, применяемыхв медицине ............................................................................................. 221.2.3. Иммуномодулирующая активность растительных полисахаридов,взаимосвязь со структурой................................................................... 241.2.3.1.Глюканы ................................................................................................. 241.2.3.2.Пектиновые и арабиногалактановые полисахариды .........................
261.2.3.3.Гиалуронаны .......................................................................................... 281.2.4. Механизмы иммуномодулирующей активности полисахаридов .... 291.2.5. Антиоксидантная активность .............................................................. 391.2.6. Противоопухолевая активность растительных полисахаридов ....... 421.3.Взаимосвязь структуры и противоопухолевого воздействияполисахаридов .......................................................................................
441.4.Полисахаридные рецепторы ................................................................ 471.4.1. Толл-подобные рецепторы (TLR) ....................................................... 471.4.2. НОД-подобные рецепторы (NLR) ....................................................... 501.4.3. Рецепторы-мусорщики (SR).................................................................
511.4.4. Лактозилцерамидный рецептор (LacCer) ........................................... 521.4.5. Рецепторы системы комплемента (CR) .............................................. 5321.4.6. С-тип лектин-подобные рецепторы (CTLR) ...................................... 552.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ................................................................. 612.1.Материалы ............................................................................................. 612.2.Методы ................................................................................................... 612.2.1.
Химические методы анализа ............................................................... 612.2.2. Экстракция и ультрафильтрация Helianthus tuberosus L. ................. 622.2.3. Хроматографическое фракционирование .......................................... 632.2.4. Физико-химические характеристики ..................................................
652.2.4.1.УФ-спектроскопия ................................................................................ 652.2.4.2.Инфракрасная спектроскопия .............................................................. 662.2.4.3.ЯМР-спектроскопия.............................................................................. 662.2.5. Анализ моносахаридного состава ....................................................... 662.2.6. Обработка ферментами ........................................................................ 672.2.7. Биологическая активность ................................................................... 682.2.7.1.Пирогенность.........................................................................................
682.2.7.2.Стимуляция антителообразующих клеток ......................................... 692.2.7.3.Культивирование клеток RAW 264.7.................................................. 702.2.7.4.Оценка цитотоксичности HTLP на клетки линии RAW 264.7 ......... 712.2.7.5.Определение МТТ редуктазной активности для исследованиятоксичности HTLP на клетки линии RAW 264.7............................... 712.2.7.6.Влияние HTLP на количество клеток линии RAW 264.7 ................. 722.2.7.7.Иммуномодулирующая активность ....................................................
722.2.7.7.1. Определение активности TNF-α.................................................... 732.2.7.7.2. Определение активности IL-1β ..................................................... 7432.2.7.7.3. Определение активности IL-6........................................................ 752.2.7.7.4. Индукция интерферона in vivo и in vitro ...................................... 752.2.7.7.5.
Стимуляция натуральных киллеров ............................................. 772.2.7.8.Инактивация генов целевых рецепторов ............................................ 782.2.7.9.Посадка антител anti-TLR-6, anti-CR3, anti-Dectin-1 на клеткиRAW 264.7 ............................................................................................. 802.2.7.10.Противовирусная активность ........................................................
812.2.7.11.Противоопухолевая активность .................................................... 812.2.7.11.1. Изучение противоопухолевой активности HTLP in vitro ........... 812.2.7.11.2. In vivo антиметастатическая активность в моделикарциносаркомы Уокера ...................................................................... 822.2.7.11.3.
In vivo противоопухолевая и антиметастатическая активностьполисахарида в карциноме легких Льюиса ........................................ 832.2.7.12.Радиопротекция............................................................................... 832.2.7.12.1. Экспериментальная модель абсолютной выживаемости ........... 842.2.7.12.2. Экспериментальная модель выживаемости гемопоэтическихстволовых клеток .................................................................................. 842.2.8.
Биофизическое моделирование бифуркации ..................................... 853.РЕЗУЛЬТАТЫ ....................................................................................... 913.1.Выделение и очистка полисахарида ................................................... 913.1.1. Выделение грубой фракции из Helianthus tuberosus L. ..................... 913.1.2. Очистка грубой фракции из Helianthus tuberosus L.хроматографическими методами ........................................................ 933.1.2.1.Анионообменная хроматография фракции с молекулярной массойболее 300 кДа полученной из Helianthus tuberosus L. ....................... 9343.1.2.2.Гель-фильтрационная хроматография фракции с анионообменникаиз Helianthus tuberosus L.
...................................................................... 953.1.2.3.ВЭЖХ-ГПХ фракции из Helianthus tuberosus L................................. 963.2.Физико-химические характеристики HTLP ....................................... 973.2.1. Спектральные характеристики ............................................................ 973.2.1.1.УФ-спектр HTLP ................................................................................... 973.2.1.2.ИК-спектр HTLP ...................................................................................
983.2.1.3.ЯМР-спектр HTLP .............................................................................. 1003.2.2. Моносахаридный состав HTLP ......................................................... 1033.2.3. Обработка ферментами, специфичными к β-(1→4) ик β-(1→3)-гликозидным связям .........................................................
1043.3.Биологическая активность ................................................................. 1053.3.1. Стимуляция антителообразующих клеток в селезенках мышейпосле совместного введения HTLP с ЭБ .......................................... 1053.3.2. Стимуляция антителообразующих клеток в селезенках мышейпосле введения HTLP, обработанного литиказой и целлюлазой ... 1053.3.3. Оценка цитотоксичности HTLP для клеток линии RAW 264.7 ..... 1063.3.4. Определение МТТ редуктазной активности для исследованиятоксичности HTLP на клетки линии RAW 264.7............................. 1063.3.5. Влияние HTLP на продукцию TNF, IL-1β, IL-6 в культуремононуклеарных клеток человека .....................................................
1073.3.6. Инактивация генов целевых рецепторов и продукция TNF-α ....... 1133.3.7. Блокирование рецепторов антителами и продукция TNF-α .......... 1173.3.8. Индукция интерферона in vivo и in vitro .......................................... 1183.3.9. Стимуляция активности натуральных киллеров ............................. 12053.3.10.
Противовирусная активность ............................................................ 1203.3.11. Противоопухолевая активность HTLP ............................................. 1223.3.11.1.Противоопухолевая активность in vitro...................................... 1223.3.11.2.Антиметастатическая активность HTLP в моделикарциносаркомы Уокера in vivo ........................................................ 1233.3.11.3.In vivo противоопухолевая и антиметастатическая активность вмодели карциномы легких Льюиса ................................................... 1243.3.12.
Радиозащита ........................................................................................ 1283.3.12.1.Экспериментальная модель выживаемости гемопоэтическихстволовых клеток ................................................................................ 1283.3.12.2.Экспериментальная модель абсолютной выживаемости .........
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
