Применение комплекса физико-химических методов для изучения мочевых камней и мочи и установления связи между ними (1091749), страница 14
Текст из файла (страница 14)
Чернобровкин, А.А. Натыкан). Разделение катионов и анионовпроведено на колонках «IonPac СS17» (250х4 мм, 5 мкм, 30С) и «IonPac AS11»90(250х4 мм, 5 мкм, 30С), соответственно. Полностью разделены 5 неорганическихкатионов NH4+, Na+, K+, Mg2+, Ca2+ при следующих условиях: скорость потокаэлюента - раствора метансульфоновой кислоты с меняющейся концентрацией вградиентном режиме - 0.5 мл/мин, объем вводимой в хроматограф пробы 25 мкл.Неорганическиеанионы(Сl-,NO2-,NO3-,SO42-, PO43-),атакжецитрат-[(CH2)2C(OH)(COO)3]3-, изоцитрат- [(CH2)CН(OH)(COO)3]3- ионы и мочевая кислота C5H4N4O3 полностью разделены при скорости потока элюента - раствора KOH сменяющейся концентрацией в градиентном режиме - 1.2 мл/мин, объеме вводимой вхроматограф пробы 25 мкл.
Оптимальной оказалась следующая программаградиентного элюирования (изменение концентрации элюента КОН в зависимости отвремени): 0 – 6 мин, 8 мМ KOH; 18 – 25 мин 55 мМ KOH; 26 – 36 мин, 8 мМ KOH.Для определяемых ионов разрешение пиков больше 1.0. Сравнимые результатыполучены в работе [84].С использованием БИХ были определены диапазоны нормальных концентрацийдля исследуемых анионов (Cl-, NO2-, NO3-, SO42-, PO43-, [(CH2)2C(OH)(COO)3]3-,C5H4N4O3, [(CH2)CН(OH)(COO)3]3-) и катионов (Са2+, Mg2+, К+, Na+, NH4+) в моче. Дляэтого проводилось исследование мочи 10 здоровых мужчин в возрасте от 25 до 50лет, не употреблявших лекарственных препаратов и витаминных комплексов.Полученные результаты представлены в табл.
25 в сравнении с нормальнымипоказателями (далее «норма»), используемыми в лабораториях и клиниках.Таблица 25. Интервалы нормативных значений компонентов мочи, использованные вработе.№1ИонCa2NH4+3К1+4Na+5Mg2+2+Норма100-300 мг/сут5100-250 мг/сут1132-296 мг/сут (муж)3200-320 мг/сут6600-1300 мг/сут 1424,8-1179 мг/сут (муж) 3<900 мг/сут6975-4875 мг/сут51500-3000 мг/сут11064,7-2987,4 мг/сут (муж) 3920-5060 мг/сут53000-6000 мг/сут12958-5715 мг/сут (муж) 372.9-121.5 мг/сут5916Cl-789NO2NO3SO42-10PO43-10.1Неорганическийфосфор11Цитрат-ион1213Изоцитрат-ионМочевая кислота14Оксалат-ион55,2-160,8 мг/сут (муж) 3>72 мг/сут63905-8875 мг/сут57000-17350 мг/сут (муж) 30 (муж) 350-140 мг/сут (муж) 32550 – 4050 мг/сут [87]2340-6200 мг/сут (муж) 32000 – 4750мг/сут32720 – 4320 мг/сут [86]1000-6500 мг/сут (муж) 3<3325 мг/сут6 (пересчитанонами)400-1300 мг/сут5400 – 1240 мг/сут1370 – 880 мг/сут3<1085 мг/сут6<400 мг/сут [23]<350 мг/сут [89]460 – 1000 мг/сут (муж) 3>470 мг/сут [86]>472.5 мг/сут6130-380 мг/сут (муж) 3250-750 мг/сут5270-600 мг/cут1247-694 мг/сут [23]252-756 мг/сут2150-700 мг/сут4до 750-880 мг/сут [89]1100-2200 мг/сут (муж) [90]550-1760 мг/сут (жен) [90]800 – 2250 мг/сут (муж) 3<500 мг/сут667 мг/сут (муж) 321-46 мг/сут [23]40 мг/сут2<40 мг/сут [89]30 – 60 мг/сут [87]26,4 – 42,24 мг/сут [86]<44 мг/сут6- Диагностический центр «Лаборатория in vitro»- по данным титриметрического анализа (ТИТР) консультативно-диагностическогоцентра ФГУН МНИИ эпидемиологии и микробиологии им.
Г.Н.ГабричевскогоРоспотребнадзора3- минимальное и максимальное значения, полученные нами для пациентов (мужчины)без МКБ (по результатам хроматографического анализа)4- ЦКП «Аналитическая спектроскопия» (г. Санкт – Петербург)5- Биохимическая лаборатория урологической клиники при ММА им. И.М. Сеченова6- M. Straub.
«Diagnosis and metaphylaxis of stone disease. Consensus concept of the NationalWorking Committee on Stone Disease for the Upcoming German Urolithiasis Guideline» / M.Straub, W. L. Strohmaier, W. Berg; B. Beck, B. Hoppe, N. Laube, S. Lahme, M. Schmidt, A.Hesse, K. U. Koehrmann // World J Urol, 2005, Vol. 23, P. 309–323.1292ДляNO2-,NO3-,иизоцитрат-[(CH2)CН(OH)(COO)3]3-ионовзначениянормальных показателей определены впервые.Значения «нормы» для большинства ионов сопоставимы по своим показателям.Так, при сравнении результатов состава мочи одних и тех же пациентов несколькимиметодами (суточная экскреция, ферментативный метод, безреагентная ионнаяхроматография) оказалось, что содержание Na+, K+, Ca2+, цитрат-ионов (рис. 44),выполненных химическими, физико-химическими и биохимическими методами,принадлежат одному интервалу значений.абвгРис.
44. Содержание цитрат-ионов (а), ионов Ca (б), Na (в), K+ (г) в моче одних итех же больных МКБ по данным различных химических и биохимических методованализа: БИХ – безреагентная ионная хроматография; ФЕРМ. – ферментативныйметод анализа; СЭ – суточная экскреция. Норма – интервал стандартных показателейконкретного иона в моче практически здорового пациента.Однако «нормы» клинического анализа и безреагентной ионной хроматографии2++для РО43- и мочевой кислоты не совпадают (табл. 25, рис.
44 а и б, соответственно).93В моче неорганический фосфор содержится в виде ионов РО43-, НРО42-, Н2РО4-,поэтому его количество при анализе суточной экскреции (СЭ) выражают в единицахмассы или молярности элементарного фосфора (рис. 45 а, голубая стрелка). Приисследованиимочиметодомбезреагентнойионнойхроматографии(БИХ)определяют концентрацию непосредственно перечисленных анионов (рис. 45 а,зеленая стрелка).
При пересчете концентрации ионов РО43-, НРО42-, Н2РО4- наэлементарный фосфор, значения «нормы» этих методов совпадают (рис. 45 а, краснаястрелка).абРис. 45. Сопоставление результатов определения фосфат-ионов (а) и мочевойкислоты (б) в моче больных МКБ различными методами: голубая стрелка – диапазоннормальных концентраций по данным СЭ, зеленая – диапазон нормальныхконцентраций по данным БИХ, красная - «нормы» согласуются в результатепересчета.При определении содержания мочевой кислоты в составе мочи мы сопоставилиинтервалы нормативных значений по разным источникам информации (табл.
25).Оказалось, что эти интервалы совпадают по данным диагностического центра«Лаборатория IN VITRO» (г. Москва), Консультативно-диагностического центраФГУНМНИИэпидемиологииимикробиологииим.Г.Н.ГабричевскогоРоспотребнадзора, [13, 90], но значения нормы ЦКП «Аналитическая спектроскопия»(г. Санкт – Петербург) несколько завышены (табл. 25). Каждая порция мочи намиисследовалась не менее 2-х раз и наблюдалась хорошая сходимость результатов.Мочевая кислота может присутствовать в моче в виде молекулы, диссоциированнойпо первой (С5Н3N4О3-) или второй ступени (С5Н2N4О32-), или в виде уратов натрия и94калия при значениях рН от 5 до 7.
При повышении значений рН мочевая кислотаобразует нерастворимые недиссоциированные молекулы, а ураты натрия и калияболее устойчивы к образованию нерастворимых молекул, поэтому среди уратныхкамней чаще встречаются мочекислые. В хроматографическом анализе (рис. 45 б,зеленая стрелка) определяется мочевая кислота в виде уратов (т.е. ураты калия инатрия нельзя отличить от мочевой кислоты), а в клиническом анализе определяетсямочевая кислота (рис.
45 б, голубая стрелка).953.КОРРЕЛЯЦИИ МЕЖДУ СОСТАВОМ МОЧЕВЫХКАМНЕЙ И СОСТАВОМ МОЧИ3.1. ВЛИЯНИЕ ИОННОГО СОСТАВА МОЧИ НА КАМНЕОБРАЗОВАНИЕМы проанализировали результаты, полученные при комплексном обследовании,лечении и клиническом наблюдении больных МКБ:1. При наличии камня у больных МКБ до его дезинтеграции;2. После проведенного разного вида лечения (различные способы удаления камня илиего самоотхождение);3. После проведения мер метафилактики (лекарственные препараты, минеральнаявода, и др). Метафилактика (от лат. meta - после, за чем-либо и filasso сторожить)–медикаментозногокомплекслечения,мероприятийнаправленныхобщеоздоровительногонапредотвращениехарактераирецидивногокамнеобразования.В результате проведенного анализа был сделан ряд выводов, основанных навыявленных в более 80 % тенденциях или корреляциях между концентрациейотдельных ионов в моче непосредственно до и после лечения, до и послеметафилактики, а также между концентрацией отдельных ионов в моче и видоммочевых камней.Из рис.
46 видно, что после проведения лечения (удаление камня) или егосамоотхождения камнеобразующие ионы в моче больных МКБ стремятся кнормальным показателям.аб96вгРис. 46. Изменение фосфат-иона (а), мочевой кислоты (б) оксалат -(в) ицитрат (г) ионов в моче до и после лечения больного МКБ с соответствующимивидами мочевых камней. Стрелками показана тенденция измененияконцентрации ионов в моче конкретного больного МКБ.Причем, при сопоставлении состава мочевых камней и мочи для одного и тогоже больного МКБ, найдено, что в подавляющем большинстве случаев наблюдаетсякорреляционная связь между содержанием мочевой кислоты (рис.