Диссертация (Особенности иммунитета у недоношенных новорожденных детей с респираторными нарушениями инфекционного и неинфекционного генеза), страница 5

Синтез рядацитокинов (TNFα, GM-CSF) у новорожденных снижен незначительно, для IL-3,IL-4, IL-5, IL-12, IFNγ различия существенны. Некоторые цитокины (IL-2, TGFβ) срождения вырабатываются иммунными клетками на уровне, соизмеримом свзрослыми. Установлено, что секреторная активность цитокин-продуцирующихклеток изменяется с возрастом, однако данные о различиях в содержаниицитокинов в крови детей различного гестационного возраста противоречивы[76,96].23Гуморальная защита новорожденных детей во многом определяетсяколичеством и специфичностью материнских иммуноглобулинов класса G (IgG),активно проникающих через плаценту в последние недели беременности.

Вотличие от IgG, концентрация иммуноглобулинов других классов в крови плодаизменяется незначительно, поскольку они не способны проникать через плацентупо причине большой молекулярной массы и отсутствия рецепторов для них наклетках трофобласта. Синтез собственных антител классов G и M В-клеткамиплода начинается на 20-24 неделе гестации. Низкое содержание IgM в сывороткекрови новорожденного объясняет недостаточную защищенность его организма отграмотрицательныхбактерий[36,37].Интенсивностьсекрециииммуноглобулинов напрямую зависит от степени дифференцировки В-клеток.Степень зрелости В-лимфоцитов определяют по наличию на их поверхности CDмаркеров и иммуноглобулинов, образующих антиген-распознающий комплекс(BCR).

Для наивных В-клеток наряду с основным маркером CD19 характернавысокая интенсивность экспрессии мембранного IgM, CD10, CD38. Зрелые Вклетки теряют поверхностные молекулы CD10 и CD38, однако начинаютэкспрессировать мембранный IgD [56,110]. В крови новорожденных выявляетсявысокое содержание CD19 В-лимфоцитов, большая часть которых имеет фенотиппереходных и наивных клеток [110,136].Созревание В-клеток происходит под влиянием цитокинов, наиболеезначимыми из которых являются IL-4, IL-5, IL-6, IL-2, IL-1, IL-10. На поверхностиВ-лимфоцитов экспрессированы также рецепторы для цитокинов семейства TNF:BAFF-R (CD268) для BAFF, TACI (CD267) и BCMA для BAFF и APRIL. Данныецитокины играют ключевую роль в поддержании гомеостаза В-клеток, защите ихот апоптоза, переключении синтеза иммуноглобулинов с IgM на другие классы,формировании иммунологической памяти в ответ на Т-независимые антигены.Тип поверхностных рецепторов на В-лимфоцитах зависит от степени ихдифференцировки: экспрессия BAFF-R характерна для наивных и В-клетокпамяти, TACI и BCMA – для плазматических клеток [92,113,124].24Т-зависимоепереключениесинтезаиммуноглобулиновсIgMнаиммуноглобулины других классов осуществляется после связывания CD40 на Вклетках и CD40L на Th-лимфоцитах.

Поскольку на неонатальных В- и Тh-клеткахинтенсивность экспрессии костимуляторных молекул CD40 и CD40L снижена посравнению с взрослыми, продукция IgG и IgA также низкая. У недоношенныхноворожденных снижение экспрессии CD40 и CD40L еще более выражено [83].ЗначительнаячастьВ-лимфоцитовуноворожденныхотноситсяксубпопуляции В1 клеток, маркером которых является молекула CD5. Ониспонтанно секретируют полиреактивные низкоаффинные IgM антитела кбактериальным антигенам и не способны продуцировать иммуноглобулиныдругих классов. Данная популяция лимфоцитов активируется без взаимодействияс Т-хелперными клетками и, таким образом, играет важную роль в развитиииммунногоответанаТ-независимыебактериальныеполисахаридныеилипополисахаридные антигены [108].НеонатальныеВ-лимфоцитыобладаютнизкойспособностьюдифференцироваться в плазматические клетки и секретировать иммуноглобулиныв ответ на вирусные и бактериальные инфекции [141].

Однако сравнениепролиферации, экспрессии HLA-DR, CD86, интенсивности секреции хемокинов ииммуноглобулинов при связывании анти-IgM антител с BCR на лимфоцитахпуповинной и периферической крови взрослых не выявило значимых различий.По-видимому, низкая функциональная активность неонатальных В-лимфоцитовсвязана с нарушением межклеточных взаимодействий в процессе иммунногоответа [148].Имеющиеся в настоящее время данные позволяют судить о разнообразиипопуляций В-клеток в периферической крови взрослых доноров, однако остаетсянеизученным вопрос о влиянии гестационного возраста и наличия врожденныхинфекционныхзаболеванийнаихсоотношениевпуповиннойкровиноворожденных.Существенный вклад в сдерживание чрезмерного иммунного ответа вноситнебольшая популяция Т-хелперных клеток, экспрессирующих с высокой25интенсивностью рецептор к IL-2 (CD25), с низкой – рецептор к IL-7 (CD127) исодержащих внутриклеточный фактор FOXP3.

Ингибирующее действие данныхрегуляторных Т-клеток (Трег) обусловлено наличием на их поверхностиингибиторной молекулы CTLA-4, их способностью связывать IL-2, необходимыйдля созревания и дифференцировки эффекторных Т-клеток, и секретироватьпротивовоспалительные цитокины TGFβ, IL-10, IL-35. Влияние Трег наиммунный ответ заключается в подавлении продукции провоспалительныхцитокинов, функции АПК, цитотоксической активности NK клеток и CD8+лимфоцитов, снижении пролиферации Th1 и Th2, индукции апоптоза [41].Содержание Трег лимфоцитов в пуповинной крови новорожденных ниже, чем впериферической крови взрослых, они имеют фенотип наивных клеток и обладаютменьшей способностью ингибировать иммунный ответ. У недоношенных детейсодержание Трег в пуповинной крови выше по сравнению с детьми, родившимисяв срок.

Поскольку иммуносупрессивное действие данной популяции Т-клетокснижает эффективность иммунного ответа, недоношенные дети по сравнению сдоношеннымиболееподверженыдлительнойперсистенциивозбудителяинфекционного заболевания в организме и хронизации процесса [8,128,129].Отличительной чертой адаптивного иммунитета является способностьформировать клетки памяти в ответ на контакт с антигеном. Клетки памяти неучаствуют в иммунном ответе, в ходе которого они образовались, но приповторном поступлении специфического антигена их реакция оказывается болеебыстрой и эффективной, чем ответ наивных лимфоцитов.

На поверхности Тклеток памяти экспрессирована изоформа CD45R0 с укороченным внеклеточнымдоменом, облегчающая активацию клетки. Низкий уровень экспрессии CD45R0на CD4 и CD8 Т-клетках новорожденных может свидетельствовать о неразвитой уних иммунологической памяти.

Установлено, что содержание CD4+CD45R0 иCD8+CD45R0Т-лимфоцитовнижеунедоношенныхноворожденныхпосравнению с детьми, родившимися в срок [115,118,125]. Напротив, высокаяинтенсивность экспрессии молекулы CD45R0 и низкая – CD45RA на NKTклеткахноворожденныхможетсвидетельствоватьовнутриутробном26взаимодействии их со специфическим лигандом. Клетки данной популяциисочетают признаки естественных киллерных клеток (экспрессия CD56, CD16,KIR, NKG2D) и Т-лимфоцитов (комплекс TCR-CD3), они способны распознаватьантигенные детерминанты без участия АПК.

Интенсивная продукция IL-4, IL-10,IL-17, IL-21, IFNγ NKT-клетками обусловливает их иммунорегуляторную роль, асодержащиеся в цитоплазме перфорин и гранзимы обеспечивают их участие вцитотоксических реакциях. Существует мнение, что NKT-клетки могут игратьроль в сохранении толерантности ИС матери к плоду [151].Помимо клеточной памяти, существует конститутивная и индуцибельнаягуморальная память. По сравнению с первичным гуморальным ответом, приреинфицировании иммунный ответ развивается быстрее, спектр секретируемыхплазматическимиклеткамииммуноглобулинамиПредсинтезированныеклассаантителG,представленобладающимидолгоживущимипреимущественновысокойаффинностью.плазматическимиклеткамиспецифические антитела обеспечивают эффективную защиту от возбудителейинфекционных заболеваний, если их концентрация в месте повторногопроникновения патогена достаточно велика – в этом случае речь идет оконститутивной гуморальной памяти.

Индуцибельная гуморальная памятьзаключается в быстрой активации В-клеток памяти с последующим синтезом исекрецией ими специфических антител. В-лимфоциты памяти – популяцияклеток, образующаяся при первичном иммунном ответе на патоген. Ониэкспрессируют В-клеточный рецептор, что позволяет им распознавать патогены ибыстро дифференцироваться в плазматические клетки. Маркером В-клетокпамяти является CD27, относящийся к надсемейству рецепторов TNF.Развитие В-клеток памяти при иммунном ответе на Т-зависимые антигеныможет происходить как в герминативном центре, так и вне его. В данном процессевелика роль фолликулярных Th-клеток (TFH) на границе В- и Т-клеточной зонлимфатических узлов: образование долговременного тесного контакта TFH и Вклеток позволяет В-лимфоцитам дифференцироваться в В-клетки герминативногоцентра. В данной области в В-лимфоцитах происходит переключение классов27иммуноглобулинов, что обеспечивает гетерогенность образующихся В-клетокпамяти герминативного центра [130].

В случае, если контакт клеток данныхпопуляций недостаточен, В-лимфоциты дифференцируются в клетки памяти внегерминативногоцентра.иммуноглобулинов,Внихданныенепроисходитклеткипереключениясекретируютклассоввысокоаффинныеиммуноглобулины класса М [86,139].Таким образом, иммунная система новорожденных обладает рядомхарактерных особенностей по сравнению с иммунной системой взрослых.Отмечается фенотипическая и функциональная незрелость эффекторных звеньевврожденного и, в большей степени, адаптивного иммунитета.

Следствием этогоявляется повышенная восприимчивость детского организма к инфекционнымзаболеваниям.Функциональнаяактивностьклетокиммуннойсистемыповышается в процессе эмбриогенеза, поэтому риск развития инфекционновоспалительных заболеваний существенно возрастает при преждевременномрождении ребенка. В настоящее время пристальное внимание уделяется изучениюособенностей иммунной системы новорожденных различного гестационноговозраста, однако результаты исследований часто оказываются противоречивыми.Фенотипические и функциональные особенности клеток иммунной системынедоношенных детей в настоящее время изучены недостаточно.1.2.Постнатальное становление иммунной системыПосле рождения ребенка происходит существенное повышение антигеннойнагрузки на его иммунную систему, поэтому недостаточность иммунного ответа вэто время имеет особое значение.

Период новорожденности является первымкритическим периодом в постнатальном развитии иммунной системы, так как вэтовремяпроисходитадаптацияребенкакусловиямвнеутробногосуществования. Мощным источником антигенов в это время являютсямикроорганизмы, в том числе патогенные, заселяющие слизистые оболочкидыхательной,пищеварительной,мочевыделительнойсистем.Переходнаэнтеральное питание также сопряжен со стимуляцией иммунной системы28новорожденного [106]. В настоящее время установлено, что кишечная флораиграет важную роль в постнатальном развитии иммунной системы.