Диссертация (Особенности иммунитета у недоношенных новорожденных детей с респираторными нарушениями инфекционного и неинфекционного генеза)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯРОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИфедеральное государственное бюджетное учреждение«НАЦИОНАЛЬНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ЦЕНТРАКУШЕРСТВА, ГИНЕКОЛОГИИ И ПЕРИНАТОЛОГИИ ИМЕНИАКАДЕМИКА В.И. КУЛАКОВА»На правах рукописиЖУКОВААнастасия СергеевнаОСОБЕННОСТИ ИММУНИТЕТА У НЕДОНОШЕННЫХНОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ С РЕСПИРАТОРНЫМИ НАРУШЕНИЯМИИНФЕКЦИОННОГО ИНЕИНФЕКЦИОННОГО ГЕНЕЗА14.03.09 – клиническая иммунология, аллергологияДиссертация на соискание ученой степеникандидата биологических наукНаучный руководитель:доктор медицинских наук, профессорВанько Л.В.Москва – 20172СодержаниеВведение………………………………………………………………………………..3Глава I. Обзор литературы…………………………………………………………121.1.Особенности иммунной системы новорожденных детей……………………121.1.1. Характеристика врожденного иммунитета у новорожденных……………...141.1.2.

Характеристика адаптивного иммунитета у новорожденных……………....201.2.Постнатальное становление иммунной системы…………………………….281.3.Особенности иммунной системы у детей с врожденной инфекцией……….32Глава II. Материал и методы исследования……………………………………..44Глава III. Результаты собственных исследований………………………..…….513.1.Общая характеристика новорожденных детей……………………………….513.2.Особенностииммунитетауноворожденныхдетейразличногогестационного возраста……………………………………………………………….553.2.1. Фенотипическая характеристика фагоцитов пуповинной крови……………563.2.2.

Функциональная активность фагоцитов пуповинной крови………………..603.2.3. Субпопуляционный состав лимфоцитов у новорожденных………………...683.2.4. Цитокиновый статус новорожденных детей………………………………….743.3.Иммунологические особенности недоношенных детей сврожденнойпневмонией…………………………………………………………………………….763.3.1.

Фенотипические и функциональные особенности фагоцитов пуповинной ипериферической крови недоношенных новорожденных…………………………...773.3.2. Фенотип лимфоцитов пуповинной и периферической крови недоношенныхноворожденных………………………………………………………………………..833.3.3. Цитокиновыйстатуснедоношенныхдетейприрожденииина 3 сутки жизни………………………………………………………………………86Глава IV. Обсуждение полученных результатов………………………………..93Заключение………………………………………………………………………….105Выводы………………………………………………………………………………107Список сокращений………………………………………………………………..109Список литературы………………………………………………………………...1123ВведениеАктуальность темыБактериальные и грибковые инфекции в раннем неонатальном периодеявляются одной из основных причин возникновения у детей серьезных патологий,зачастую не совместимых с жизнью.

Преждевременное рождение ребенка (до 37полных недель гестации) часто сопряжено с наличием у него врожденныхинфекционных заболеваний вследствие повышенной восприимчивости незрелойиммунной системы к патогенам [36,37]. При поступлении недоношенных детей вотделение реанимации и интенсивной терапии антибактериальные препаратыназначаются в 50% случаев, что приводит к нарушению формированиямикрофлоры слизистых оболочек, снижению функции барьерных тканей,адаптациипатогенныхмикроорганизмовклиническойпрактике.дыхательнойсистемыдыхательныхнарушенийкМорфологическаяобусловливаетпрепаратам,ифункциональнаяразвитиеинфекционногоиспользуемым вилиунезрелостьнедоношенныхнеинфекционногодетейгенеза.Пневмония у новорожденных детей, особенно недоношенных, является одной изглавныхпричиннеонатальнойсмертности[93].Внастоящеевремядифференциальная диагностика генеза дыхательных нарушений осуществляется втечение 72 часов после рождения ребенка [13].

Таким образом, существуетнеобходимостьвдифференцироватьпоискедиагностическихврожденнуюпневмониюмаркеров,отпозволяющихдыхательныхнарушенийнеинфекционного генеза сразу после рождения ребенка, а также выявлять егопредрасположенность к инфицированию в раннем неонатальном периоде.При физиологически протекающей беременности внутриутробное развитиеплода происходит в условиях низкой антигенной стимуляции, поэтому иммуннаясистема здоровых доношенных новорожденных во многом отличается отвзрослой.

Главными эффекторами иммунной системы новорожденных детейявляютсяКлючевуюклеточныерольвигуморальныезащитефакторыорганизмаприврожденногоинвазиииммунитета.патогеновиграют4нейтрофильные гранулоциты и моноциты. Они способны быстро мигрировать кместу бактериальной инвазии, захватывать и обезвреживать клетки патогена. Уноворожденных детей снижена опсонизирующая способность сыворотки крови,хемотаксическая активность, нарушен процесс высвобождения ферментов гранулцитоплазмы, что приводит к нарушению фагоцитарной функции нейтрофилов имоноцитов [64,107].

В процессе активации нейтрофилов и моноцитов важнуюроль играют толл-подобные рецепторы (TLRs). В формировании иммунногоответа новорожденных имеют важное значение TLR4, взаимодействующий слипополисахаридомстенки(Гр–)грам-негативныхбактерийиTLR2,распознающий фрагменты клеточной стенки грам-позитивных (Гр+) бактерий,микобактерийигрибов.Процессфагоцитоза,активацияспецифическихповерхностных рецепторов индуцируют генерацию клетками крови активныхформ кислорода, осуществляющих, наряду с ферментами гранул, бактерициднуюфункцию [121].Функциональное состояние нейтрофильных гранулоцитов и моноцитов,выступающих в роли первой линии защиты новорожденных от возбудителейинфекционных заболеваний, во многом определяет дальнейшее развитиеиммунного ответа на бактериальную и грибковую инвазию. В настоящее время доконцанеизученыособенностисубпопуляционногосоставафагоцитовпуповинной крови, их фагоцитарной активности и интенсивности оксидативноговзрыва в зависимости от гестационного возраста новорожденных и наличия у нихврожденных инфекционных заболеваний.Важнойфункциейиммунорегуляторноемоноцитоввоздействиенаинейтрофиловклеткиадаптивногоявляетсяихиммунитетапосредством секреции обширного спектра хемокинов и цитокинов, действиекоторых направлено на привлечение, активацию, стимуляцию более специфичныхиммунныхклеток[1].Воздействиепатогенныхмикроорганизмовнаформирующуюся иммунную систему плода приводит к изменению соотношениясинтезируемых цитокинов, которое может характеризовать преимущественныйтип иммунного ответа и его интенсивность [126].

Однако в литературе имеется5недостаточно данных об изменении содержания цитокинов в пуповинной кровинедоношенных детей на фоне врожденной пневмонии.Активация врожденного иммунитета служит обязательным условиемразвития антиген-специфического адаптивного иммунного ответа, центральнуюроль в реакциях которого играют субпопуляции Т- и В-лимфоцитов.

Имеющиесяв настоящее время данные позволяют судить о разнообразии популяцийлимфоидных клеток в периферической крови взрослых доноров, однако остаетсянеизученным вопрос о влиянии недоношенности и врожденных инфекционныхзаболеваний на их соотношение в пуповинной крови новорожденных.Гуморальная защита новорожденного ребенка во многом определяетсяколичеством и специфичностью материнских иммуноглобулинов, проникающихчерезгематоплацентарныйбарьер.Синтезсобственныхантителплазматическими клетками начинается лишь на 20-24 неделе гестации [36,37].Интенсивность секреции иммуноглобулинов напрямую зависит от степенидифференцировкиВ-клеток.Известно,чтосоотношениесубпопуляцийлимфоцитов изменяется в процессе взросления [136], однако существуетнедостаточно данных о соотношениисубпопуляций В-клеток в пуповиннойкрови новорожденных детей различного гестационного возраста.

Важную роль Влимфоциты играют в формировании иммунного ответа при попадании в организминкапсулированных микроорганизмов, к числу которых относятся главныевозбудителиврожденныхинфекционныхзаболеваний.Взаимодействиерецепторов В-лимфоцита с полисахаридными структурами поверхности капсулыприводит к синтезу В-клетками низкоаффинных полиреактивных естественныхантител по Т-независимому пути. Во многом интенсивность этого процессаопределяется содержанием в сыворотке крови ростовых факторов BAFF/BLyS (Bcell activation factor/B lymphocyte stimulator) и APRIL (a proliferation inducingligand).

Существуя в свободной и мембраносвязанной формах, BAFF/BLyS иAPRIL воздействуют на В-лимфоцит посредством связывания со специфическимирецепторами на его поверхности: BAFF-R (BAFF receptor, CD268), BCMA (B-cellmaturation antigen, CD269) и TACI (transmembrane activator and calcium modulator6and cyclophilin ligand interactor, CD267). Низкая интенсивность экспрессии данныхрецепторов на поверхности клеток ведет к снижению функциональной активностиВ-лимфоцитов, замедлению их дифференцировки в плазматические клетки. Внастоящее время исследована экспрессия этих рецепторов на В-лимфоцитахноворожденных детей в зависимости от гестационного возраста [83,136], однакоданных о степени экспрессии BAFF-R и TACI на В-лимфоцитах пуповиннойкрови недоношенных детей с врожденной инфекцией недостаточно.Внастоящеевремяпроисходящее в течениедоказано,чторазвитиеиммуннойсистемы,эмбриогенеза, не завершается к моменту рожденияребенка и продолжается в течение постнатального периода.

Сразу после рожденияребенка кожа и слизистые дыхательной, пищеварительной и мочевыделительнойсистем заселяются микрофлорой, что ведет к активации и дифференцировкеиммунных клеток. Адаптация здоровых доношенных новорожденных к условиямвнеутробного существования, сопряженная с высокой антигенной нагрузкой на ихиммуннуюсистему,характеризуетсяповышениемантиген-распознающегопотенциала и функциональной активности иммунных клеток. Однако существуетнедостаточно данных о постнатальном развитии иммунной системы детей,родившихся преждевременно.Цель исследованияОхарактеризовать состояние врожденного и адаптивного иммунитета унедоношенных детей при рождении и в раннем неонатальном периоде с учетомгенеза дыхательных нарушений.Задачи исследования1.