Диссертация (Адаптивное значение для человека бактерий рода Lactobacillus и рода Bifidobacterium)
Описание файла
Файл "Диссертация" внутри архива находится в папке "Адаптивное значение для человека бактерий рода Lactobacillus и рода Bifidobacterium". PDF-файл из архива "Адаптивное значение для человека бактерий рода Lactobacillus и рода Bifidobacterium", который расположен в категории "". Всё это находится в предмете "биология" из Аспирантура и докторантура, которые можно найти в файловом архиве РУДН. Не смотря на прямую связь этого архива с РУДН, его также можно найти и в других разделах. , а ещё этот архив представляет собой кандидатскую диссертацию, поэтому ещё представлен в разделе всех диссертаций на соискание учёной степени кандидата биологических наук.
Просмотр PDF-файла онлайн
Текст из PDF
Федеральное государственное автономноеобразовательное учреждение высшего образования«РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ»На правах рукописиЮнес Роман АбдаллаевичАдаптивное значение для человека бактерий рода Lactobacillus и рода Bifidobacterium03.02.08 – экология03.02.07 - генетикаДИССЕРТАЦИЯна соискание учёной степеникандидата биологических наукНаучные руководители:доктор биологических наук Полуэктова Е.У.доктор биологических наук профессор Орлова В.С.Москва - 2016 г.1СОДЕРЖАНИЕВВЕДЕНИЕ ..........................................................................................................................................
5Актуальность проблемы ................................................................................................................... 51. Обзор литературы .......................................................................................................................... 91.1. Микробиота человека ................................................................................................................ 91.1.1 Общая характеристика микробиоты человека .................................................................. 91.1.2 Микробиота кишечника человека и её состав ..................................................................
111.1.3 Взаимодействие кишечной микробиоты с организмом хозяина ................................... 131.2. Лактобациллы и бифидобактерии – постоянный компонент микробиоты человека 181.2.1 Общая характеристика лактобацилл и бифидобактерий ...................................................... 181.2.2 Местообитание .......................................................................................................................... 191.2.3 Таксономическое разделение ...................................................................................................
191.2.4 Лактобациллы и бифидобактерии - пробиотики и психобиотики ....................................... 251.3 Гамма-аминомасляная кислота .............................................................................................. 291.3.1 Общая характеристика свойств гамма-аминомасляной кислоты ........................................
291.3.2 ГАМК и её рецепторы в организме человека ......................................................................... 291.3.3 Функции ГАМК в нервной системе человека и её связь с заболеваниями......................... 301.3.4 Синтез ГАМК микроорганизмами .......................................................................................... 311.3.5 Характеристика генов и белков, обусловливающих синтез ГАМК .................................... 341.3.6 Функции ГАМК в кишечнике .................................................................................................. 391.3.7 ГАМК-синтезирующие лактобациллы и бифидобактерии из кишечной микробиотычеловека как векторы доставки ГАМК в кищечник.
...................................................................... 391.4 Катехоламины и серотонин ..................................................................................................... 411.4.1 Общая характеристика катехоламинов и серотонина ........................................................... 411.4.2 Роль катехоламинов и серотонина в нервной системе человека ......................................... 431.4.3 Влияние катехоламинов и серотонина на метаболизм бактерий ......................................... 45ГЛАВА 2.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ....................................................................................... 512.1 Микробиологические методы .................................................................................................. 512.1.1 Штаммы бактерий, использованные в работе ........................................................................ 5122.1.2 Среды и условия роста..............................................................................................................
552.1.3 Определение вида лактобацилл ............................................................................................... 572.2 Использованные в работе животные ..................................................................................... 572.3 Молекулярно-генетические методы.......................................................................................
582.3.1 Выделение ДНК ......................................................................................................................... 582.3.2 Конструирование праймеров и проведение ПЦР .................................................................. 582.3.3 Электрофорез ДНК в агарозном геле ...................................................................................... 592.3.4 Секвенирование ДНК................................................................................................................ 592.3.5 Выделение тотальной РНК ....................................................................................................... 592.3.6 Обратная транскрипция ............................................................................................................
602.3.7 Количественная ПЦР в режиме реального времени .............................................................. 612.4 Биохимические методы ............................................................................................................. 622.4.1 Тонкослойная хроматография.................................................................................................. 622.4.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) .................................................. 62ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ............................................................................
653.1 Идентификация и характеристика штаммов лактобацилл, выделенных из трёхбиотопов человеческого тела. ........................................................................................................ 653.1.1 Видовая идентификация изолятов лактобацилл, населяющих кишечник, ротовуюполость и влагалище человека. .........................................................................................................
653.2 Изучение синтеза ГАМК из лабораторной коллекции штаммами лактобацилл ибифидобактерий. ............................................................................................................................... 683.2.1 Отбор штаммов лактобацилл и бифидобактерий, синтезирующих и выделяющих в средуГАМК...................................................................................................................................................
683.2.2 Определение количества ГАМК, синтезируемой лактобациллами и бифидобактериями.693.2.3 Наличие генов глютаматдекарбоксилазы у штаммов лактобацилл и бифидобактерий. ... 723.2.4 Характеристика синтеза ГАМК у 4-х штаммов бактерий, отобранных в качествепробиотиков. ....................................................................................................................................... 753.2.5 Характеристика генов, обусловливающих синтез ГАМК. ...................................................
823.2.6 Изучение экспрессии гена глутаматдекарбоксилазы gad у штамма L.plantarum 90sk. ..... 86Данный раздел работы был выполнен в Институте морфологии человека РАМН совместно сЮ.Е. Козловским. ............................................................................................................................... 903.2.7 Определение влияния штамма L.plantarum 90sk на крыс в условиях холодового холода.9033.3 Изучение влияния катехоламинов и серотонина на рост и транскрипционнуюактивность лактобацилл и бифидобактерий..............................................................................
943.3.1 Оптимизация условий опытов по влиянию нейротрансмиттеров на рост лактобацилл ибифидобактерий. ................................................................................................................................ 943.3.2 Изучение влияния норадреналина, адреналина, дофамина и серотонина на ростлактобацилл и бифидобактерий........................................................................................................ 973.3.3 Изучение влияния норадреналина на транскрипционную активность генов L.plantarum90sk методом ПЦР в реальном времени. .......................................................................................
108ЗАКЛЮЧЕНИЕ .............................................................................................................................. 111ВЫВОДЫ ......................................................................................................................................... 112СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ИСПОЛЬЗОВАННЫХ В РАБОТЕ ......................................... 114СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ............................................................................................................ 115Приложение ..................................................................................................................................... 144БЛАГОДАРНОСТИ .......................................................................................................................
1544ВВЕДЕНИЕАктуальность проблемыСогласно данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) эпидемией21 века стал стресс. Возрастание стрессовой нагрузки на душу населения связано сухудшением экологическоймегаполисах,нездоровымобстановки, высокойпитаниемиплотностью населениядругимисоциальнымивфакторами.Регулярный краткосрочный (острый) стресс идёт на пользу организму и связан свыбросом надпочечниками гормонов стресса (адреналин, норадреналин, кортизол идр.)”. Физиологический смысл этого явления – это инициация реакции “бег илибегство” чтобы избежать опасность. Однако постоянное воздействие раздражителя(хронический стресс) на организм человека может привести к таким психическимрасстройствам как депрессия, тревожное состояние, синдром хроническойусталости и др. В результате, организации по всему миру терпят серьёзныеэкономические убытки.Сегодня большое внимание уделяется изучению адаптации человека к стрессу.При сталкивании организма с хроническим стрессором, в организме происходятфизиологическиеизменения,которыеописываютсяобщимадаптационнымсиндромом (ОАС).
