Автореферат (Экспериментальное обоснование возможности применения 68Ga - цитрата для визуализации воспалительных процессов методом позитронно-эмиссионной томографии), страница 4

Далее (для удобства) по текстурастворы лиофилизатов с различной концентрацией цитрата натрияназываются растворами Цигалина, а цитрата трехвалентного железа –растворами Фероцита.На протяжении всего исследования острой токсичности летальностьотсутствовала во всех группах мышей с введенным раствором Цигалина –определить значение ЛД50 не представилось возможным.

Введение невызвало отрицательного воздействия на поведение и внешний вид. В течение14 суток наблюдения животные выглядели здоровыми, без выраженныхпризнаков интоксикации. Иную картину наблюдали для Фероцита:летальность отсутствовала только в группах ЭД и ЭДx5; в группах (ЭДx10,ЭДx20, ЭДx40) общая летальность (по самцам и самкам) составила 30%, 60%и 80%, соответственно. В группе ЭДx50 летальность самцов и самоксоставила 100%. Значение полулетальной дозы LD50, рассчитанное по логитрегрессии, составило 30 мг/кг массы мыши при внутривенном введении, чтопримерно равно 17-кратной дозе ЭД. При аутопсии различий междуконтрольной и опытными группами для Цигалина и Фероцита (всех16Цигалин, ЭДх10Цигалин, ЭДх10Фероцит, ЭДх10Фероцит, ЭДх10**Тромбоциты, 109/лЛейкоциты, 109/лвыживших животных) выявлено не было. Расположение внутренних органовсоответствует норме.

У павших животных после внутривенного введениявысоких доз Фероцита отмечали незначительное потемнение печени всравнении с контролем.При исследовании хронической токсичности общее состояниеживотных было в норме, отклонений не обнаружено, павшие животныеотсутствовали. По результатам контрольных взвешиваний, во всех группахживотных отмечена положительная динамика.

Следует отметить отсутствиестатистически достоверной разницы по половому признаку междузначениями показателей ОКА и БХА крови. Более того, введение крысамраствора Цигалина в десятикратной дозе не приводило к значимым(достоверным) изменениям показателей крови.

Напротив, введение Фероцитав 10-кратной дозе привело на 5 сутки к резкому повышению лейкоцитов (рис.11) и понижению тромбоцитов (рис. 12), однако скачки имелифункционально-обратимый характер – к 10-15 суткам между значениями дляразных групп лиофилизатов и контролем не было статистически достовернойразницы.(А)(Б)27*18*91301007040051015Время, сутки20051015Время, сутки20Рисунок 11. Динамика изменения значений концентрации лейкоцитов (А) итромбоцитов (Б) в цельной крови крыс после введения десятикратных дозЦигалина и ФероцитаВ исследуемых дозах растворы Цигалина не приводили к статистическизначимым изменениям показателей БХА плазмы крови в сравнении сконтрольными животными. Напротив, резкое повышение концентрациижелеза в крови после введения Фероцита в десятикратной дозе запускаломеханизмы утилизации лишнего количества железа из крови посредствомсоединения железа с транспортными белками и их аккумуляции в печени, чтоявилось причиной резкого снижения уровня общего белка в крови (рис.

12).Излишнее накопление железа в печени привело к увеличеннойметаболической активности гепатоцитов, смещению равновесия между17концентрациями трансаминаз (рис. 12), а также резкому повышению уровняЩФ и ЛДГПри вскрытии у крыс во всех группах кожа была чистая, подкожножировой слой развит умеренно. Внутренние органы не увеличены,расположение правильное; гидроторакс отсутствует; слизистая трахеи ибронхов чистая, влажная, блестящая, просвет свободен.Фероцит, ЭДЦигалин, ЭДЦигалин, ЭДх10 Фероцит, ЭДх10**12090*****6030051015Время, суткиЦигалин, ЭД**6040** *20210Фероцит, ЭД9060* *21Фероцит, ЭДЦигалин, ЭДх10 Фероцит, ЭДх10*250АСТ, Е/л120* *51015Время, суткиЦигалин, ЭДЦигалин, ЭДх10 Фероцит, ЭДх10АЛТ, Е/л800030Фероцит, ЭДЦигалин, ЭДх10 Фероцит, ЭДх10Общий белок, г/лЖелезо, мкмоль/лЦигалин, ЭД200150***051015Время, сутки1005000051015Время, сутки2121Рисунок 12.

Динамика изменения значений б/х показателей в плазме кровикрыс после введения различных доз растворов Цигалина и ФероцитаВведение Фероцита крысам в десятикратной дозе приводило ксимптомам токсического гепатита, однако носящего функциональнообратимый характер – к 15-20 суткам после введения не фиксировалистатистически достоверной разницы между значениями в экспериментальныхи контрольной группах.Аллергизирующее действие растворов лиофилизатов было оценено дляэквивалентных доз.

После введения тест-препарата отмечено покраснение на18лапке, скорее всего, являющееся следствием укола. Разницы в толщине обеихлапок не выявлено, отечности не было.Таким образом, установили хорошую переносимость, отсутствиевыраженных симптомов, аллергизирующего действия. Гибель животныхотмечали лишь для высоких доз введения Фероцита. Лиофилизаты врекомендуемых для клинического применения дозах не оказывалитоксического эффекта, влияющего на статистически значимые измененияосновных гематологических и биохимических показателей крови.

Послевведения десятикратной дозы Фероцита наблюдали симптомы токсическогогепатита, носящие функционально-обратимый характер.Глава 6 посвящена исследованию специфической токсичности –оценке радиационной безопасности применения 68Ga-цитрата. Результаты,представленные по прогнозному расчету поглощенных доз с использованиемпрограммы OLINDA/EXM 1.0 (одобрена МАГАТЭ) (табл. 6), являютсявероятностными, так как экстраполированы с организма лабораторныхживотных на человека, и могут служить для оценки общей дозиметрическойкартины. Важно отметить, что создаваемые поглощенные дозы в организмечеловека крайне индивидуальны, поэтому в условиях клиники припроведении диагностических и терапевтических мероприятий с применениемРФП необходимо вести учет создаваемых лучевых нагрузок и безопасностиперсонально.Таблица 6Прогноз поглощенных доз на критические органы и все тело человека приприменении 68Ga-цитрат (ККМ – красный костный мозг)Орган/тканьКишечникСтенкажелудкаСтенкасердцаПочкиПеченьЛегкиеККМСелезенкаСтенка м.пузыря■Удельная поглощенная доза, 10-3мГр/МБкОбщееБета, β+Гамма, γ∑( + + )Поглощенная доза ■,мГр46,7±5,112,5±1,459,2±6,523,7±2,65,2±0,83,8±0,69,1±1,33,6±0,55,1±0,73,7±0,58,8±1,23,5±0,518,4±4,910,1±2,25,7±1,03,3±0,614,0±2,710,6±2,910,4±2,23,6±0,616,3±2,811,2±2,129,0±7,820,5±4,49,3±1,719,6±3,425,2±4,811,6±3,18,2±1,83,7±0,77,8±1,410,0±1,941,0±13,04,9±1,645,9±14,618,4±5,9Примечание: при рекомендуемой вводимой диагностической активности 400 МБк19Вклад позитронного β+-излучения в большинстве органов и тканейвыше, по сравнению с γ-излучением, что обусловлено высокой энергией β+излучения и ЛПЭ для изотопа галлия-68, а также малым пробегом позитроновв тканях.

Наибольшие поглощенные дозы (суммарные) регистрировались вмочевом пузыре и почках в связи с его интенсивным выведением икишечнике в силу близкого расположения к органам мочевыделения.Как отмечается в МКРЗ, признавая потенциальную значимостьнаблюдений за пациентами после облучения в медицинских целях, Комиссия(МКРЗ) решила, что имеющиеся в настоящее время данные не позволяютвключить в оценку вреда облучение в малых дозах, не превышающих около100 мЗв (МКРЗ 103, 2009).

Этот вывод согласуется с мнением НКДАР ООН(2008), который указал на небольшое число доказательств наличия какоголибо избыточного риска при облучении в дозе менее 1 Гр (Mettler F.A. et al.,2008). Исследуемые значения оказались намного меньше (табл. 6).Рассчитанные в настоящем исследовании лучевые нагрузки,создаваемые препаратом 68Ga-цитрат в организме человека, сопоставимы споглощенными дозами других известных РФП для визуализации воспалений(табл. 7), применяемых в ПЭТ и ОФЭКТ.Таблица 7Сравнение поглощенных доз, создаваемых в организме человека, настоящегоисследования (отмечено: ▲) с поглощенными дозами других РФП длявизуализации воспаленийОрган/тканьКишечникСтенкажелудкаСтенкасердцаПочкиПеченьЛегкиеМышцыККМСелезенкаМ. пузырь68Gacit▲59,2Удельная поглощенная доза, мкГр/МБк6799mGaGa- 99mTcTc■18FDGcit■cit■HIG■WBC■8814866,54,668111InWBC■1609,1141369–42908,8136067–317029,020,59,39,219,625,245,927271213213622201617111337190110110615912014090531048873515112,93,54,222350900160100650590064Примечание: cit – цитрат, HIG – иммуноглобулины человека, WBC – лейкоциты■Значения поглощенных доз заимствованы из Stabin M.G.