Диссертация (Изменение реактивности организма животных под действием высокомолекулярного полисахаридного комплекса)

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВАРОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИФедеральное государственное образовательное учреждение высшегообразования «Московская государственная академия ветеринарноймедицины и биотехнологии – МВА имени К.И. Скрябина»На правах рукописиХромова Екатерина ВладимировнаИЗМЕНЕНИЕ РЕАКТИВНОСТИ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ ПОДДЕЙСТВИЕМ ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНОГО ПОЛИСАХАРИДНОГОКОМПЛЕКСА06.02.01 – Диагностика болезней и терапия животных,патология, онкология и морфология животныхДиссертацияна соискание ученой степени кандидата биологических наукНаучный руководитель:заслуженный деятель науки РеспубликиБашкортостан, доктор ветеринарных наук, профессор,Байматов Валерий НурмухаметовичМосква - 20162Содержание:СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ ..........................................................

3ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ .......................................................... 51.1. ОСНОВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯИЗУЧЕНИЯ РЕАКТИВНОСТИ ЖИВОТНЫХ . 91.2. МЕТОДОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ПОВЕДЕНИЯ ЖИВОТНЫХ . 121.3. ОРИЕНТИРОВОЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЕ ПОВЕДЕНИЕ МЫШЕЙ ЛИНИИ БМИ ММ .................................................................................................................... 141.4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ СТРЕСС У ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ РАЗНЫХЛИНИЙ ...................................................................................................................

181.5. ПРИМЕНЕНИЕ КОМПЛЕКСА GG В ВЕТЕРИНАРИИ И МЕДИЦИНЕ .................. 221.6. СВОЙСТВА ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНОГО ПОЛИСАХАРИДНОГО КОМПЛЕКСАGG (ФОРВЕТА) ...................................................................................................... 301.7. МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ ФОРВЕТА ................................................................. 31ГЛАВА 2.СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материал и методыисследования .............................................................................................................. 34ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.................

413.1. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ................................................................... 413.3. Устойчивость мышей линии ММ и БМ к гипоксии ................................. 563.4. Цитопатогенный эффект ПВГ-2 и влияние форвета на организм мышей...............................................................................................................................

583.6. ИЗМЕНЕНИЯ В ТКАНЯХ МЫШЕЙ ЛИНИИ ММ ПОСЛЕ ВПГ – 2 ................... 713.7. МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ОРГАНАХ МЫШЕЙ ЛИНИИ БМ И ММПОСЛЕ ВПГ-2 И ВВЕДЕНИЯ ФОРВЕТА ................................................................. 79ГЛАВА 4. АНАЛИЗ И ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВИССЛЕДОВАНИЙ ................................................................................................ 92Выводы ................................................................................................................

104РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ ..... 106СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ................................................................................ 10623СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙАКТГ – адренокортикотропный гормонАФК – активная форма кислородаАО – антиоксидантыАОС – антиокислительные свойстваБМ – большой мозгБТШ – белки теплового шокаБАВ – биологически активные добавкиВ/б – внутрибрюшинное введениеВ/м – внутримышечное введениеВБН – вирус болезни НьюкаслаВГС – вирус герпесаВПЧ – вирус папиломы человекаВПГ – 1 – вирус простого герпеса 1 – го типаВПГ – 2 – вирус простого герпеса 2 –го типаIFN – интерферонКп – коэффициент подвижностиММ – малый мозгHCT – тест спонтанныйОИА – ориентировочно – исследовательская активностьПОЛ – перекисное окисление липидовП/к – подкожное введениеРДФ – Д – рибулозо – 1,5 – дифосфатСРО – свободно радикальное окислениеСОЭ – скорость оседания эритроцитовCD95 – Fas – рецепторы, воспринимающие сигналы к апоптозу34ФН – физическая нагрузкаФГК – 3 – фосфоглицериновой кислотыХЛ – хемилюминесценцияЦНС – центральная нервная системаЦПЭ – цитопатогенный эффектЭТ – эмоциональная тревожность45ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальностьрезистентностипроблемы.

Совершенствование способов повышенияорганизмаявляетсяоднойизактуальныхпроблемветеринарной медицины [Андреева, Н.Л., 1990; McCall M.R., Frei B.,1999;Sairam R.R., Srivastava G.S., Saxena D.C., 2000; Shekunova E.V. , Mikheiev V.V.,2001; Salvucci M.E., Crafts-Brandner S.J., 2004; McCay P., 1985; Nel A.E., MädlerL., Velegol D., Xia T., et al.,2009]. Несмотря на многочисленные сведения поэтой проблеме, до настоящего времени не полностью изучено влияние наорганизм(форвет),животныхвысокомолекулярногообладающегополисахаридногопротивовирусным,комплексаиммуномодулирующим,цитопротективным действием [Грибенча С.В., Литвин А.А., Кохнович М.А.,Сергиенко В.И. и др., 2009; Stovbun S.V., Kolbukhina L.V., Nosik N.N., et al.,2009].

Растворы GG оптически активны благодаря разнообразным пептидам итриптическим инетриптическимбольшая субъединицы). Форветфрагментов и белка RuBiSco (малая иобладаетактивностью пригерпесе,цитомегаловирусе, гриппе, клещевом энцефалите, кори, бешенства и гепатите С[Stovbun S.V., Skoblin A.A. 2012; Stovbun S.V., Kiselev A.V., Zanin A.M.,Mikhailov A.L., et al., 2012].

Физико-химические свойства растворов GGобъясняюттрехмерно связанныминаночастицами сразмером 350 нм имолекулярной массой M = 108 – 109 Дальтон [Stovbun S.V., Skobin A.A., 2012].Частицы визуализируются в виде сфер, одинакового диаметра, обладающихфармакологической активностью.

В одной терапевтической дозе наночастицсодержится 1010÷1011, что превышает количество вирусных частиц в организме.Экспериментально определен коэффициент растворимости GG (0,13) притемпературе Со 36,6 и pH = 7. Внутреннее их пространство имеет физическиеи химические связи с трехмернойизотропной, однородную молекулярнойрешеткой. Для получения субстанциииспользуютполихронную кинетикусверхмедленных молекулярно–динамических процессов (105 ÷ 107 сек),сфизико- химическими превращениями в диффузионно неоднородных средах[Польшкова Е.В., 2012; Стовбун С.В., Яковенко Л.В., 2014]. Влияние данного56препарата на организм животных остаётся недостаточно выясненным.Цель работы установить изменения физиологической и патологическойреактивностиу лабораторныхидомашних животных после введениявысокомолекулярного полисахаридного комплекса.Для реализации цели были поставлены следующие задачи:1.Оценить влияние высокомолекулярногополисахаридного комплексана поведение мышей линии БМ и ММ, на их ответные реакции привоздействии раздражителей;2.Выявить морфологические изменения в органахживотных, родившихся от мышей – матерей,улабораторныхпереболевших ПВГ-2 ипосле введения гликозидов [GG];3.Определить цитопротективный эффект форвета уживотных приразличной патологии;4.Установить изменения морфологических и биохимических показателей усобак и овец после введениия форвета.Научная новизна.Научно обоснована и экспериментально подтверждена эффективностьвключенияполисахаридного молекулярного комплекса GG – форвет, влечение животных при различной патологии.На основанииклинических, биохимических, морфологических ихемилюминесцентных методов исследований, установлено, что форвет припомощи малой и большой субъединицы фракции RuBiSco активируетобразование белков теплового шока в клетках, обеспечивающих повышениязащитныхмеханизмовпристрессе.Проведенныенаразличныхтаксономических группах исследования показали, что высокомолекулярныйполисахаридный комплекс обладает высокими адаптивными свойствами.Установлено, что высокомолекулярныйполисахаридныйкомплексповышает устойчивость животных к физической нагрузке, гипоксии, стрессу,67снижая показатели свободно радикального, перекисного окисления в печени иголовноммозге.

Одновременнопрепарат повышает активные формыкислорода и фагоцитарное число в лейкоцитах. У кошек, собак и овец форветстимулирует или ингибирует [при патологии] количество лейкоцитовиммуноглобулинов крови, сохраняя, при этом, ихипоказатели в пределахнормы.Теоретическая и практическая значимость.Установлен механизм адаптивного и цитопротективного действияфорвета при физической нагрузке, гипоксии и стрессе, что подтвержаетсякомплексом клинико – морфологических, гистологических и этологическихпоказателей.

Методические подходы и практические рекомендации имеютуниверсальный характер и могут использоваться в ветеринарной медицине вкачестве матрицы проводимых исследований.Полученные данные позволяют использовать препарат форвет принезаразной патологии, проявляющейся цитопатогенным эффектом. Онирасширяютсуществующиезнанияодействиивысокомолекулярногополисахаридного комплекса на реакции, протекающие в организме, а такжеявляются базой для комплексного изучения его влияния на организм какцитопротектора. Установленный цитопротективный эффект форвета позволяетрекомендовать его для широкого использования в ветеринарной практике.Результаты исследований могут быть внедрены в учебный процесс приосвещении вопросов, связанных с действием интерферона и белков тепловогошока на организм.Положения выносимые на защиту.1.