Диссертация (Патофизиологическая роль свободно-радикальных процессов при невынашивании беременности)

Федеральное государственное автономное образовательное учреждениевысшего образования Первый Московский государственный медицинскийуниверситет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохраненияРоссийской Федерации (Сеченовский Университет)На правах рукописиПокаленьева Мария ШамилевнаПатофизиологическая роль свободнорадикальных процессов при невынашиваниибеременности14.03.03. «Патологическая физиология»14.01.01 «Акушерство и гинекология»Диссертация на соискание ученой степеникандидата медицинских наукНаучные руководителид.м.н., профессор Болевич С.Б.д.м.н., профессор Соснова Е.А.Москва, 20181ОглавлениеОглавление ..............................................................................................

2Введение......................................................................................................... 4Глава I. Обзор литературы ......................................................................... 101.1 Этиология привычного невынашивания беременности ................

101.2 Свободнорадикальные процессы в организме человека ............... 211.2.1 Активные формы кислорода....................................................... 221.2.2 Перекисное окисление липидов ................................................. 241.2.3 Антиоксидантная система организма человека ........................ 261.3 Состояние оксидантной и антиоксидантной систем во времябеременности ...................................................................................................... 28Глава 2.

Материалы и методы ................................................................... 332.1 Характеристика и критерии отбора пациентов .............................. 332.2.2 Математическое моделирование хемилюминограмм кривыхнейтрофилов методом деконволюции .......................................................... 382.2.3 Определение антиоксидантной активности плазмы кровиметодом кинетической хемилюминесценции ..............................................

392.2.3Оценкаоксислительноймодификацииальбуминапотриптофановой флуоресценции..................................................................... 402.3 Статистическая обработка материала .............................................. 41Глава 3. Клиническая характеристика пациентов ................................... 42Глава 4. Результаты собственных исследований и их обсуждение. ...... 484.1 Оценка функциональной активности нейтрофильного звеналейкоцитов методом хемилюминесценции с двойной последовательнойстимуляцией........................................................................................................

484.2 Анализ кривых методом деконволюции ......................................... 6324.3 Оценка антиоксидантной активности плазмы крови методомкинетической хемилюминесценции ................................................................. 694.4 Оценка триптофановой флуоресценции альбумина ......................

73Глава 5. Заключение ................................................................................... 76Выводы ......................................................................................................... 79Практические рекомендации ..................................................................... 81Список сокращений ....................................................................................

82Список использованной литературы ........................................................ 843ВведениеАктуальность. Медицинская и социальная значимость проблемыневынашивания беременности, обусловлена ее влиянием на демографическиепоказатели в РФ. В структуре акушерско-гинекологической заболеваемостиневынашивание заминает одно из первых мест, оказывая влияние на уровеньперинатальной заболеваемости, смертности и репродуктивное здоровьеженщин [1].

Частота невынашивания беременности составляет 15-27% отобщего числа всех выявленных беременностей, при этом на долюпривычного выкидыша (ПНБ) приходится от 5 до 20%. Установлено, чториск потери плода напрямую зависит от исхода предыдущей беременности исоставляет 13-17% после первого выкидыша и около 55% у женщин, ужеимевших 3 последовательных выкидыша [2].По данным различных авторов впервом триместре беременности частота спонтанных выкидышей составляетоколо 80% [3, 4].Кнаиболееэндокринные,частымпричинамиммунологические,ПНБотносят:генетические,гемастазиологическиенарушениярепродуктивной системы, бактериальные и вирусные инфекции [2, 5, 6].Зачастую, ПНБ вызывается стразу несколькими этиологическими факторами,одни из которых могут быть предрасполагающими, другие разрешающими. Всвою очередь к прерыванию беременности приводят те факторы, которыевызывают изменения и гибель плодного яйца, а также нарушают связьплодного яйца с материнским организмом [7].Однако,генезневынашиваниязачастуюостаетсянеясным(идиопатическое ПНБ), составляющего около 50%.

Несмотря на успехе вдиагностике и лечении самопроизвольных прерываний беременности,частота ПНБ остается достаточно высокой и не имеет тенденции к снижению[8]. Это обусловлено отсутствием точного понимания причинных факторов ипатогенетических звеньев, приводящих к прерыванию беременности.4Эмпирический подход к выбору терапии в результате не позволяетспрогнозировать и снизить частоту ПНБ [9].Вопрос об этиологической роли свободнорадикальных процессов приневынашивании беременности широко дискутируется в литературе [10, 11].Изменения в тканях плаценты процессов свободнорадикального окисления(СРО), вызывающие повреждения структуры и нарушение проницаемостиклеточных мембран играет немаловажную роль в патогенезе невынашиваниябеременности [12].

Данные деструктивные процессы возникают вследствиепроявляющегося дисбаланса между интенсивностью СРО и эффективностьюсистемы антирадикальной защиты [13]. Однако вопросы, связанные сизучением механизмов генерации активных форм кислорода (АФК) иактивностью антиоксидантной защиты у женщин с ПНБ остаютсяпрактически не изученными.В связи с этим представляет научный и практический интерес изучениемеханизмовгенерацииактивныхформкислорода,состояниеантиоксидантной системы у женщин с ПНБ, а также оценка долиокисленного альбумина, как маркера системного оксидативного стресса. Этиисследования позволят внести ясность в патофизиологические механизмы,приводящие к прерыванию беременности, а также возможно помогутразработать диагностические и прогностические параметры.Цельисследования–Выяснениесвободно-радикальныхпроцессовбеременностиэтойинаосновеприпатофизиологическойпривычномпредложитьролиневынашиваниидиагностическиеипрогностические параметрыЗадачи исследования1.Исследовать радикал-продуцирующую функцию нейтрофиловкрови у женщин с привычным невынашиванием беременности (ПНБ).2.Определить антиоксидантный профиль плазмы крови у женщин сПНБ.5Оценить степень системного оксидативного стресса у женщин с3.ПНБ по степени окисленно-модифицированного альбуминаСопоставить полученные показатели окислительного стресса с4.клиническими данными и предложить диагностические и прогностическиепараметры.Научная новизна1.

Проведенное исследование впервые выявило, что во времябеременности, как физиологической, так и протекающей на фоне угрозыпрерывания, нейтрофилы находятся в состоянии прайминга, о чемсвидетельствует повышенный уровень базальной продукции свободныхрадикалов и повышенный ответ на стимулы.2.Впервыеустановлено,чтоуженщинснеразвивающейсябеременностью ответ нейтрофилов на стимулы был снижен, что указывает наиммуносупрессивноесостояние,препятствующеесамопроизвольномупрерыванию беременности.3. Впервые установлено, что антиоксидантная активность плазмыкрови снижена после самопроизвольного аборта, что свидетельствует орасходовании антиоксидантов крови из-за развивающегося окислительногостресса в момент прерывания беременности.4.

Впервые установлено, что при неразвивающейся беременностиантиоксидантнаяприсутствиевактивностькровиплазмыповышена,специфическихчтомолекул,указываетнаобладающихантиоксидантными свойствами.5. Впервые установлено, что у здоровых беременных, беременных сугрозой прерывания нет системного оксидативного стресса, затрагивающегобелковое звено.Теоретическая и практическая значимость1.Продемонстрирована потенциальная возможность использованиялабораторных критериев окислительного стресса в качестве прогностических6маркеров преждевременного прерывания беременности и неразвивающейсябеременности.2.Доказана эффективность кинетической хемилюминесценции дляоценки функционального состояния нейтрофилов и антиоксидантнойактивности плазмы крови у женщин с угрозой прерывания.3.Доказанаэффективностьопределениядолиокисленногоальбумина в качестве параметра, характеризующего транспортную функциюальбумина и маркера системного окислительного стресса у беременныхженщин.4.Полученныеданныеподтвердилинеобходимостьперсонифицированного подхода к выбору антиоксидантной терапии во времяугрозы прерывания и дозирования гормональных препаратов.Личный вклад автораАвторупринадлежитведущаярольввыборенаправленияисследования, анализе и обобщении полученных результатов.