Автореферат (Клинико-иммунологические возможности оценки активности и прогноза локального и генерализованного вариантов гранулематоза Вегенера)

На правах рукописиЛОПАТИНА ИРИНА АЛЕКСАНДРОВНАКлинико-иммунологические возможности оценки активности и прогноза локального игенерализованного вариантов гранулематоза Вегенера14.01.04 – внутренние болезни14.03.09 – клиническая иммунология, аллергологияАВТОРЕФЕРАТдиссертации на соискание ученой степеникандидата медицинских наукМосква, 20182Работа выполнена в ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинскийуниверситет им. И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации(Сеченовский Университет)Научные руководители:Доктор медицинских наукМоисеев Сергей ВалентиновичДоктор биологических наукМезенцева Марина ВладимировнаОфициальные оппонентыЖиляев Евгений Валерьевич - доктор медицинских наук, профессор, ФГБОУ ДПО«Российскаямедицинскаяакадемиянепрерывногопрофессиональногообразования»Минздрава России, кафедра ревматологии, профессор кафедры;Бляхер Мария Сергеевна - доктор медицинских наук, профессор, ФБУН Московский научноисследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.

Г.Н. Габричевского»Роспотребнадзора, лаборатория по изучению клеточных и молекулярных основ иммунитета,руководитель лаборатории.Ведущая организация: Федеральное государственное автономное образовательное учреждениевысшего образования «Российский университет дружбы народов» Минобранауки РоссииЗащита диссертации состоится «____» _______ 2018 года, в ____ часов на заседаниидиссертационного совета Д. 208.040.13 ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. СеченоваМинздрава России (Сеченовский Университет) по адресу: 119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8,стр. 2. С диссертационной работой можно ознакомиться в библиотеке ЦНМБ ФГАОУ ВОПервый МГМУ им. И.М.

Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) по адресу:119034, г. Москва, Зубовский бульвар, д. 37/1 и на сайте организации www.sechenov.ru.Автореферат разослан «____» _________ 2018 года.Ученый секретарь диссертационного советаДоктор медицинских наук, профессорДроздов Владимир Николаевич3ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность темы исследованияГранулематоз Вегенера – это системный васкулит, характеризующийся развитиемгранулематозноговоспаленияинекротизирующеговаскулитамелкихсосудовспреимущественным поражением верхних дыхательных путей, легких и почек. [Тареев Е.М.,1974,Семенкова Е.Н., 1979,1984]В 2012 году в Чапел-Хилл была пересмотрена номенклатура системных васкулитов.[Новиков П.И., 2005] В настоящее время наиболее часто используется новое названиенозологической формы заболевания: гранулематоз с полиангиитом (ГПА) вместо гранулематозВегенера.ГПА остается одним из самых тяжелых и прогностически неблагоприятных системныхваскулитов[СеменковаЕ.Н.,2001;Клименко,2005].Наиболеечастозаболеваниедиагностируется у людей в возрасте 64-75 лет.

[Buraa Kubaisi, 2016] Заболеваемость ГПАварьируется от 2 до 12 случаев на 1 миллион жителей в год, а распространенность составляет от23 до 160 случаев на 1 миллион жителей.[Mohammad, 2009] В последние годы отмечаетсятенденция к увеличению числа больных ГПА, что может отражать не только улучшениедолгосрочного прогноза в результате иммуносупрессивной терапии, но и истинный ростзаболеваемости [Новиков П.И., 2012, 2015]. Исследование роли цитокинов в развитиииммунопатологического процесса у больных ГПА оправдано с практической точки зрения всвязи с возможностью применения генно-инженерных биологических препаратов у даннойгруппы больных.

[Мухин Н.А., 2012] Цитокины могут выступать в роли эндогенных маркеров, аопределение уровней их синтеза может дать информацию для диагностики нарушенийгомеостаза, изучения патогенеза заболеваний, адекватного назначения иммунотерапии.[Симбирцев А.С., 2011] Изучение цитокинов при активности и ремиссии ГПА позволяетопределить маркеры, которые могут являться потенциальной мишенью терапевтическоговоздействия при обострении заболевания. [Бекетова Т.В., 2010; Насонов Е.Л., 1996]. Кроме того,важное значение в настоящее время придается изменению цитокинового спектра при локальнойи генерализованной формах заболевания [Müller A., 2000]. Определение генерализованныхформ заболевания на ранних этапах с помощью исследования цитокинового профиля можетспособствовать определению тактики лечения и прогноза заболевания в целом.Степень разработанности проблемыВ зарубежной литературе приводятся противоречивые данные, касающиеся механизмовразвития иммуновоспалительного процесса и методов оценки активности и распространенности4ГПА.

[Balding C.E., 2001; Lúdvíksson B.R., 1998; Abdulahad W.H., 2008]. Изучение измененияцитокинов только у больных гранулематозом с полиангиитом (Вегенера) не проводилось. Вотечественной практике нет работ, посвященных определению дополнительных маркеровобострения и наличия генерализованных форм ГПА, а также изучению взаимосвязи органныхпоражений и изменения уровней цитокинов.Цель исследованияИзучить возможности клинико-иммунологической оценки активности и прогнозалокального и генерализованного вариантов гранулематоза с полиангиитом (Вегенера).Задачи исследования1.Исследоватьэкспрессиюгеновипродукциюпровоспалительных,противовоспалительных, регуляторных цитокинов у больных с локальной и генерализованнойформами ГПА, а также у больных с обострением и ремиссией ГПА.2.Изучитьклинико-иммунологическуюмононуклеарах периферической крови и сывороткесвязьизмененияцитокиноввc наличием признаков васкулита игранулематозного воспаления, поражением различных органов и тканей у больных ГПА.3.Оценить возможность использования цитокинов в качестве дополнительныхмаркеров обострения или наличия генерализованной формы ГПА.4.Определить факторы риска обострения ГПА в течение одного года на основеизучения цитокинового профиля.Научная новизнаВпервые в России проводилось исследование цитокинового профиля у больных сразличными формами ГПА.

В российской выборке выявлено отличие экспрессии геновцитокинов в МПК по сравнению со здоровыми добровольцами. Экспрессия генов цитокинов вМПК у больных с локальной формой ГПА достоверно не отличалась от экспрессии геновцитокинов в МПК больных с генерализованной формой ГПА. Показано значение экспрессиигена ИЛ-18 у больных с обострением ГПА. Исследование сывороточного уровня ИЛ-18продемонстрировало, что уровень данного цитокина достоверно повышается у больныхгенерализованной формой ГПА. Исследование сывороточного ИЛ-8 указывает на то, чтоданный цитокин принимает участие в обострении ГПА.Установлена чувствительность испецифичность определения сывороточного ИЛ-18 как дополнительного показателя наличиягенерализованной формы ГПА, а также экспрессии гена ИЛ-18 и продукции ИЛ-8 какдополнительных маркеров активности ГПА. Впервые в России у больных ГПА проводилось5проспективное исследования с целью оценки факторов риска развития обострения ГПА втечение одного года.

Показано, что обнаружение ИЛ-1β в сыворотке крови в диапазоне от 5,1 до19,7 пг/мл является фактором риска повышения индекса BVAS на 2 и более баллов у больныхГПА в течение одного года. Впервые проводилось исследование взаимосвязи пораженияорганов и тканей при ГПА с изменением уровня цитокинов. Определена корреляционная связьмежду наличием критериев гранулематозного воспаления и цитокинов, участвующих в Th1 иTh2 типах иммунного ответа; критериев васкулита и продукцией ИФН-α, ФНО-α, ИЛ-1β иэкспрессией мРНК ИЛ-6.Теоретическая и практическая значимость работыПолученные данные указывают на изменения цитокинов, которые приводят к развитиюиммуновоспалительного процесса у больных гранулематозом с полиангиитом (Вегенера), атакже на участие цитокинов в поражении различных органов при данном заболевании. Изучениемаркеров активности и наличия генерализованной формы гранулематоа с полиангиитом(Вегенера) на основе исследования цитокинового профиля позволяет определить мишенитерапевтического воздействия, что является перспективным при разработке и внедрении влечение генно-инженерных биологических препаратов у данной группы больныхПрактическая значимость исследования определяется выявлением дополнительныхмаркеров обострения заболевания, а также наличия генерализованных форм ГПА, на основеисследования цитокинового профиля.

В результате нашего исследования показано, чтоопределение мРНК ИЛ-18 в МПК у больных ГПА является и может быть использовано какдополнительный маркер активности заболевания. Выявлено, что ИЛ-18 достоверно чащеповышается у больных генерализованным ГПА, а определение сывороточного ИЛ-18 можетбыть использовано как дополнительный маркер развития генерализованных форм ГПА.Установлено, что обнаружение сывороточного ИЛ-1β в диапазоне от 5,1 до 19,7 пг/мл являетсяфактором риска развития обострения ГПА в течение 1 года.Основные положения, выносимые на защиту.1. У больных с локальными и генерализованными формами ГПА наблюдаютсясопоставимые изменения экспрессии генов цитокинов в мононуклеарах периферической крови2.

При обострении ГПА по сравнению со здоровыми добровольцами отмечаетсядостоверное повышение экспрессии мРНК ИЛ-18 в мононуклеарах периферической крови3. Маркером генерализованной формы ГПА является уровень сывороточного ИЛ-18выше 258,5 пг/мл. Поражение почек в рамках ГПА ассоциировано со снижением экспрессии6мРНК ИФН-α в МПК, а поражение легких - с повышением экспрессии мРНК ИФН-γ, ИЛ-6,ФНО-α в МПК и продукции ИЛ-18.4. Достоверным фактором риска обострения ГПА в течение 1 года являетсясывороточный уровень ИЛ-1β от 5,1 до 19,7 пг/мл, а обострение ГПА ассоциировано сповышением сывороточного уровня ИЛ-8, а5.