Диссертация (Грипп, ОРВИ у беременных - особенности течения и патогенетические механизмы формирования осложнений беременности), страница 9

324 новорожденных, рожденных в родильных домах г.Саратова: из них 226 — рожденных от матерей, Сплошное продольное ретроспективно е исследование 48 У этап Анализ влияния медико-социального статуса беременных на степень выполнения рекомендаций врача по профилактике гриппа и оценке значимости серодиагностики в надзоре за циркуляцией вирусов гриппа и возможной передачи специфических антител от матери к ребенку ое проспективное исследование Пе вый аз ел иссле ования был посвя ен анализ акто ов иска азвития тяжелых о м иппа и ОРВИ о ми ования осложнений в ви е ви сно- бакте иальных пневмоний и анализ возможности использования ма ке ов ос ой воспалительной еак ии я их своев еменной иагностики.

Для решения поставленных задач под наблюдением находилось 605 женщин с гриппом, вызванным вирусом А(Н1М1)рйп09, 174 — с непандемическим гриппом, 188 беременных с ОРВИ и 308 небеременных перенесших грипп, 98 детей — контрольной группы. 386 беременным женщинам проводилось анкетирование знания методов профилактики гриппа, готовности к их выполнению.

Значение серологических методов в диагностике гриппозной инфекции у 219 женщин, из них 98 небеременных и 53 беременных с подтвержденным гриппом А(Н1М1)рйп09 методом ПЦР, 50 небеременных и 18 беременных, госпитализированных с диагнозом ОРВИ в этот же период.

20 новорожденных рожденных от матерей перенесших грипп А(Н1М1)рйп09 Рандомизи рова нное продольное сравнительное ретроспективн Рандомизирова нное продольное сравнительное исследование 49 женщин с различными формами заболевания. Всем больным проводили вирусологическое обследовании с использованием полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ПЦР) и/или иммунохро мото графии носоглоточных смывов слизи из зева и носа. При непандемическом гриппе у бб (37,9%) беременных обнаружена РНК вируса гриппа А(Н1Х1) сезонный, у 12 (6,9%) человек — грипп А(НЗМ2), у 96 (55,2%) — грипп В. Диагноз ОРВИ у 188 беременных был установлен на основании клиникоэпидемиологических данных, результата отрицательных исследований на грипп. Этиологический диагноз расшифрован в 34,5% методом ПЦР носоглоточных смывов.

В 8,4% случаев был диагносгирован пара1рипп, у 22,5% — риновирусная инфекция, у 5 беременных (3,5%) — аденовирусная инфекция. Таким образом, наиболее чаще причиной госпитализации беременных с ОРВИ была риновирусная инфекция. Беременные поступали в стационар на 2,5 + 0,5 день от начала заболевания, в первые 24-48 часов — в основном беременные со средне-тяжелой формой гриппа. Наиболее поздние сроки поступления были у женщин с тяжелыми формами болезни — на 4,45 + 1,8 день от начала болезни.

Диагноз «грипп» ставился по общепринятой классификации В.И. Покровского (139). Форма тяжести гриппа и ОРВИ соответствовала общепринятым критениям [44, 45, 1391. Распределение по тяжести больных с гриппом А(Н1М1)рйп09: всего 605 беременных, из них 481 (79,5%) с тяжелой формой, 86 (14,2%) со средне- тяжелой и 38 (6,3%) с гипертоксической формой гриппа. Летальный исход регистрировался только в первую волну в 2009-10г у беременных с гипертоксической и тяжелой формами болезни и составлял 2% от всех наблюдаемых в этот период (248 человек). При непандемическом гриппе из 174 больных тяжелая форма встречалась у 61 (35,1%) женщины, средне-тяжелая у 113 (64,9%) человек, 50 гипертоксическая форма гриппа не регистрировалась.

Из 188 беременных с ОРВИ тяжелая форма регистрировалась у 58 (30,9;4) женщин, средне-тяжелая у 130 (69,1;4) пациенток. У обследованных нами беременных пневмония была выявлена у 161 пациентки, из них при гриппе А(Н1М1)рдпт09 у 138 чел, что составляет 85,7',4, при непандемическом гриппе у 9 пациенток (5,6'.4), на фоне ОРВИ у 14 человек (7 4о4). Для оценки значимости маркеров острой воспалительной реакции в дифференциальной диагностике вирусно-бактери альных пиевм опий у беременных женщин было обследовано 246 больных с тяжелой формой гриппа А(Н1И1)рйп09, которым проводилось рентгенологи ческое исследование легких для исключения пневмонии.

В 1 группу вошло 108 беременных, у которых не была выявлена пневмония, во 2 группу — 138 чел, у которых рентгенологически диагностирована пневмония. В качестве контрольной группы выступали 18 проб сыворотки у женщин без гриппа и ОРВИ с физиологическим течением беременности. С-реактивный белок определяли полуколичественным методом. Принцип данного метода состоит во взаимодействии СРБ исследуемой крови со специфической антисывороткой, в результате чего образуются преципитаты, что говорит о положительной реакции. Крупные преципитаты (агрегаты) соответствуют высокой концентраци СРБ, мелкие преципитаты 1агрегаты) соответствуют концентрации СРБ — б мг/л, равномерно-гомогенная взвесь — уровню СРБ < б мг/л. Уровень неоптерина в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа с использованием реактивов ЗАО «БиоХимМак» (г. Новосибирск) 11691.

Концентрация лактоферрина в крови определялась методом ИФА [971 основанном на содержании поликлональных антител к лактоферрину с 51 применением наборов «Лактоферрин-стрип» (ЗА О «БиоХим Мак», Новосибирск). Результат оценивался в нг/мл. Для исследования уровня прокальцитонина использовался ЭТ иммунохроматографический метод. Данные тесты выпускаются в виде наборов «Иммунохроматографический Прокальцитонин Экспресс — Тест» (ВКАНМЯ РСТ-ф Германия). Кровь больного наносится на тест-полоску.

При наличии в крови ПКТ метка (моноклональные антитела) соединяется с ПКТ в образце и в дальнейшем образуется соединение антиген-антитело. На тестовой полоске формируется «сэндвич-комплекс». Если уровень ПКТ~0,5нг/мл «сэндвич- комплекс» становится красно-розового оттенка. Чем выше уровень ПКТ, тем интенсивнее окрашивание. Концентрация ПКТ оценивается при сравнении цвета полосы исследуемой крови с референсным окрашиванием: больше 0,5нг/мл; больше 0,5нг/мл, но меньше 2,0нг/мл; больше 2,0нг/мл, но меньше 10,0нг/мл.

Чувствительность теста — 90-92'Ъ. Согласно имеющимся данным, у здоровых беременных концентрация ПКТ в крови < 0,5нг/мл, при различных бактериальных инфекциях уровень ПКТ >2,0нг/мл [1б51. Вто ой аз ел иссле ования был посвя ен анализ соотношений мея овнем итокинов и тяжестью клинического течения иппа аз аботке количественного по хо а к о енке их взаимо ействия. Соотношение клинических проявлений и содержания цитокинов анализировалось у беременных с различными формами тяжести гриппа А(Н1М1)рйп09. Цитокиновый профиль изучали у беременных с гриппом А(Н1И1)рйп09 методом рандомизированного поперечного исследования «случай — контроль» с января по март 2010г. Под нашим наблюдением находилось 40 беременных, из них 18 со средне-тяжелой формой, 22 с тяжелой формой гриппа с развитием вирусно-бактериальной пневмонии, 52 подтвержденной рентгенологическим методом обследования.

При тяжелой форме гриппа мы выделили 2 группы больных: 1 группа (и=17) с благоприятным течением болезни, 2 группа (п=5) с неблагоприятным (летальным) исходом заболевания. Уровень цитокинов определялся в периферической крови. Взятие крови проводилось из кубитальной вены в утренние часы натощак. Забор крови проводился при поступлении и в период реконвалесценции перед выпиской больных из инфекционного отделения. Определение цитокинов проводили в лаборатории ФГБУ «Саратовский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии» Минздрава России (директор института — И.А. Норкин). Определение цитокинов проводилась методом И ФА с использованием тест-систем российской компании ЗАО «Вектор-Бест» (Россия) [261.

Контролем служили показатели цитокинов у 11 беременных без признаков гриппа, ОРВИ и соматических заболеваний. Наблюдение за здоровыми беременными проводилось в женской консультации ГУЗ СГКБ№10. Т етий аз ел иссле ования был посвя ен анализ соотношений тяжести течения ОРВИ иппа с показателем гемо еологии ССВО и состоянием стоила ента ного к овооб ения бе еменных. Методом рандомизированн ого продольного про спективного исследование с октября 2009 года по апрель 2010 были проведены реологические исследования крови. Вязкость крови и морфологические свойства тромбоцитов, уровень Д-димеров изучалась у 137 беременных с гриппом А(Н1Х1)рйп09, 69 беременных с ОРВИ, 35 беременных без гриппа и ОРВИ.

В ходе динамического наблюдения за 36 больными оценивались изменения тяжести ССВО по температуре, ЧСС, ЧДД, количеству лейкоцитов, незрелых форм нейтрофилов, по уровню прокальцитонина в течение первых суток с четырехкратным определением показателей вязкости крови. 53 У всех беременных со сроком гестации 20-30 недель изучалось соотношение вязкости крови и фетоплацентарного кровообращения.

Вязкость крови определялась на анализаторе АКР-2. Венозная кровь бралась с 3,8',4 раствором цитрата натрия. Уровень вязкости крови определяли при 4-х скоростях сдвига: 200 1/с, 100 1/с, 20 1/с и 10 1/с. Вязкость плазмы исследовали только при скорости сдвига 100 1/с. Считали ИАЭ путем деления величины вязкости крови 20 1/с на вязкость крови 100 1/с. ИДЗ считали как отношение уровня вязкости крови при 100 1/с к уровню вязкости крови 200 1/с. Эффективность доставки в ткани кислорода определяли по отношению уровня гематокрита к вязкости крови при 200 1/с [452]. На аппарате СА470 фирмы «Мег1ошс» (Швеция) определяли морфологические свойства тромбоцитов.

Учитывались параметры тромбогистограммы, такие как средний объем тромбоцитов, процент содержания «больших» тромбоцитов. На лазерном анализаторе тромбоцитов фирмы «СНК.ОНΠ— 1.00» [США) изучали функциональную активность тромбоцитов. Агрегационную способность тромбоцитов определяли по методу В.А. Габбасова и соав. [851. Данный метод основан на анализе флюктуаций светопропускания, которые изменяются за счет оптических частиц.