Определение флавоноидов горянки и их метаболитов методом тандемной хроматомасс-спектрометрии высокого разрешения, страница 24

Относительная погрешностьаттестованного значения массовой концентрации АР не превышает 3,25 %.А.1.4 ПриготовлениеАР № 3икариина,икаритина,икаризида I,икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С в метиловом спирте сконцентрацией 0,1 мг/млДозатором механическим с варьируемым объемом дозирования (0,11,0) мл (7.1.3) в виалу вместимостью 15 мл (7.3.1) вносят 1,0 мл АР № 2икариина, икаритина, икаризида I, икаризида II, эпимедина А, эпимедина В иэпимедина С в метиловом спирте с концентрацией 1,0 мг/мл и 9,0 млметилового спирта (7.4.1) и тщательно перемешивают с использованиеморбитального шейкера (7.2.7).СрокхраненияАРвхолодильнике(7.2.3)притемпературе(4,0±1,0) ºС – не более 72 ч.АР № 3 икариина, икаритина, икаризида I, икаризида II, эпимедина А,эпимедина В и эпимедина С с массовой концентрацией 0,1 мг/мл используютдля приготовления образцов для оценивания.

Относительная погрешностьаттестованного значения массовой концентрации АР не превышает 3,46 %.A.2 Приготовление образцов для оценивания (ОО)А.2.1 ПриготовлениеООссодержаниемикариина,икаритина,икаризида I, икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С 50 мг вкапсуле (флаконе) (ОО № 1)В виале вместимостью 15 мл (7.3.1) навесах лабораторных (7.1.2)взвешивают (46,0±0,2) мг сухой биологически активной добавки, несодержащей икариина, икаритина, икаризида I, икаризида II, эпимедина А,эпимедина В и эпимедина С.177Дозаторами механическим с варьируемым объемом дозирования (0,11,0) мл (7.1.3) вносят 0,5 мл АР № 1 икариина, икаритина, икаризида I,икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С с концентрацией10,0 мг/мл. После внесения АР № 1 виалу с образцом для оцениваниявыдерживаются в токе азота под упаривателем-концентратором (7.2.10) дляудаления растворителя в течение 30 мин, а затем при комнатной температурев течение 40 мин.Содержаниеикариина,икаритина,икаризида I,икаризида II,эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С в ОО (опорное значение), С, (мг вкапсуле (флаконе)), рассчитывают по формулеСC АP  VАP  mскmн(А.2)где САР – массовая концентрация икариина, икаритина, икаризида I,икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С в АР, мг/мл;VАP – объем АР икариина, икаритина, икаризида I, икаризида II,эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С, используемый для приготовленияОО, мл;mск – масса содержимого капсулы с биологически активной добавкой,мг, mск = 460,0 мг;mн – масса навески используемая для приготовления образца дляоценивания, мг, mн = 46,0 мг.Расчётное содержание (опорное значение) икариина, икаритина,икаризида I, икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С в ОО№1 составляет 50 мг.Абсолютную погрешность аттестованного значения ОО рассчитываютпо формулеСОО  0,01 * СОО *  ОО(А.3)где СОО – содержание икариина, икаритина, икаризида I, икаризида II,эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С в ОО,178– относительную погрешность приготовления ОО; рассчитываютпо формуле АР 2  ( доз ) 2  ( вес 100 / mн ) 2 ОО ,(А.4)где δАР – относительная погрешность приготовления аттестованногораствора;δдоз – относительная погрешность дозатора;∆вес – абсолютная погрешность взвешивания;m – масса навески в мг.Всоответствииприготовлениясформулой(А.4)абсолютнаяпогрешностьОО №1 составляет ОО1  (3,04) 2  (1,38) 2  (0,43) 2  3,34 %Всоответствиисформулой(А.3)абсолютнаяпогрешностьаттестованного значения ОО №1 составляетСОО1  0,01 3,34  50  1,67 мг;А.2.2 Приготовление ОО с содержанием икариина, икаритина,икаризида I, икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С 1,0 мг вкапсуле (флаконе) (ОО №2)В виале вместимостью 15 мл (7.3.1) навесах лабораторных (7.1.2)взвешивают (46,0±0,2) мг сухой биологически активной добавки, несодержащей икариина, икаритина, икаризида I, икаризида II, эпимедина А,эпимедина В и эпимедина С.Дозаторами механическим с варьируемым объемом дозирования (0,11,0) мл (7.1.3) вносят 0,1 мл АР № 2 икариина, икаритина, икаризида I,икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С с концентрацией1,0 мг/мл.

После внесения АР № 2 виалу с образцом для оцениваниявыдерживаются в токе азота под упаривателем-концентратором (7.2.10) дляудаления растворителя в течение 30 мин, а затем при комнатной температурев течение 40 мин.179Расчётное содержание (опорное значение) икариина, икаритина,икаризида I, икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С в ОО№2, С2, составляет 1,0 мг.Абсолютная и относительная погрешности аттестованного значенияОО №2, в соответствии с формулами (А.3 – А.4), составляютОО2 =3,85%СОО 2  0,04 мг;А.2.3 Приготовление ОО с содержанием икариина, икаритина,икаризида I, икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С 0,1 мг вкапсуле (флаконе) (ОО №3)В виале вместимостью 15 мл (7.3.1) навесах лабораторных (7.1.2)взвешивают (46,0±0,2) мг сухой биологически активной добавки, несодержащей икариина, икаритина, икаризида I, икаризида II, эпимедина А,эпимедина В и эпимедина С.Дозаторами механическим с варьируемым объемом дозирования (0,11,0) мл (7.1.3) вносят 0,1 мл АР № 3 икариина, икаритина, икаризида I,икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С с концентрацией0,1 мг/мл.

После внесения АР № 3 виалу с образцом для оцениваниявыдерживаются в токе азота под упаривателем-концентратором (7.2.10) дляудаления растворителя в течение 30 мин, а затем при комнатной температурев течение 40 мин.Расчётное содержание (опорное значение) икариина, икаритина,икаризида I, икаризида II, эпимедина А, эпимедина В и эпимедина С в ОО№3, С3, составляет 0,1 мг.Абсолютная и относительная погрешности аттестованного значенияОО №3, в соответствии с формулами (А.3, А.4), составляютОО3 = 4,02 %СОО 3  0,004 мг;Анализ полученных образцов проводится непосредственно послеприготовления в соответствии с прописью методики измерений..