Атомно-силовая микроскопия биомакромолекулярных комплексов, страница 3

Ìîäåëüíóþ òîïîãðàôèþ âèçóàëèçèðîâàëè ñ ïîìîùüþ ïðîãðàììû ÔåìòîÑêàí (ðèñ. 4).  òàáëèöå 1 ïðèâåäåíû ñðàâíèòåëüíûå äàííûå ïî âûñîòàì äîìåíîâ íà ðàçíûõ ïîäëîæêàõ. Èç òàáëèöû âèäíî, ÷òî ïðèïåðåõîäå îò ãèäðîôèëüíîé ïîäëîæêè ê ãèäðîôîáíîé êàê â ýêñïåðèìåíòå, òàê è â ìîäåëèðîâàíèè âûñîòà D-äîìåíîâ ñòàíîâèòñÿ ìåíüøå12Ðèñ. 4: Òîïîãðàôè÷åñêàÿ âèçóàëèçàöèÿ ðåçóëüòàòîâ ìîäåëèðîâàíèÿìåòîäîì ÌÄ: À) íà ñëþäå, Á) íà ÃÌÄÑ-ñëþäå.ÑëþäàÀÑÌÌÄÃÌÄÑ-ñëþäàD-äîìåí, íìÄëèíà, íìD-äîìåí, íìÄëèíà, íì2,2 ± 0,442 ± 71,2 ± 0,460 ± 97,5345,541Òàáëèöà 1: Ñðàâíåíèå äàííûõ ÀÑÌ è ÌÄ î âûñîòå D-äîìåíîâ èîáùåé ïðîòÿæåííîñòè àäñîðáèðîâàííîãî ôèáðèíîãåíà.13(íà 45% ïî äàííûì ÀÑÌ è íà 27% ïî äàííûì ÌÄ). Äëèíà ìîëåêóëûñòàíîâèòñÿ áîëüøå (íà 30% ïî äàííûì ÀÑÌ è íà 17% â ìîäåëè).Èññëåäîâàíèå ïðîöåññà àññîöèàöèè ôèáðèíà ïðîâîäèëè ïðè ðàçíûõ êîíöåíòðàöèÿõ ôèáðèíîãåíà.

Êîíöåíòðàöèÿ ôèáðèíîãåíà â êðîâè îêîëî 9 ìêÌ. Ïðè òàêîé êîíöåíòðàöèè ÷åðåç 30 ñåêóíä ïîñëå äîáàâëåíèÿ òðîìáèíà íà ïîâåðõíîñòè íàáëþäàþòñÿ êðóïíûå âîëîêíàâûñîòîé 11,7 ± 4,5 íì (ðèñ. 5à), à ÷åðåç 510 ìèíóò âñÿ ïîâåðõíîñòüïîäëîæêè ïîêðûòà ïëîòíîé ñåòüþ ñî ñðåäíåêâàäðàòè÷íîé øåðîõîâàòîñòüþ ðåëüåôà îêîëî 30 íì (ðèñ. 5á).Ïðè êîíöåíòðàöèè 2 ìêÌ óäàëîñü ïîëó÷èòü çàâèñèìîñòü òîëùèíû ôèáðèíîâûõ âîëîêîí îò âðåìåíè ðåàêöèè. Äàííûå ñîãëàñóþòñÿñ ðåçóëüòàòàìè ýêñïåðèìåíòîâ ïî äèíàìè÷åñêîìó ñâåòîðàññåÿíèþ.Äëÿ òîãî ÷òîáû ðàññìîòðåòü áîëåå ìåëêèå äåòàëè, ìû óìåíüøèëèêîíöåíòðàöèþ ôèáðèíîãåíà äî 0,2 ìêÌ. Ïðîöåññ ñâåðòûâàíèÿ çàìåäëèëñÿ, ñðåäíÿÿ âûñîòà âîëîêîí ñïóñòÿ 1 ìèíóòó ïîñëå äîáàâëåíèÿ òðîìáèíà ñîñòàâèëà 8,5±2,5 íì.

Ñòàëî âîçìîæíî íàáëþäàòü ïîïåðå÷íûå ïîëîñû ñ ïåðèîäîì 23 íì íà ïîâåðõíîñòè âîëîêîí (ðèñ. 5ã),õîðîøî èçâåñòíûå èç ýêñïåðèìåíòîâ ïî ÏÝÌ.Ïðè äàëüíåéøåì óìåíüøåíèè êîíöåíòðàöèè äî 20 íÌ íàì óäàëîñü âèçóàëèçèðîâàòü ïåðâè÷íûå àññîöèàòû ôèáðèíà. Îêàçàëîñü,÷òî áîëüøàÿ ÷àñòü àññîöèàòîâ ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé íå äâóòÿæåâûåïðîòîôèáðèëëû, à áîëåå òîíêèå îäíîòÿæåâûå àññîöèàòû, êîòîðûåìû íàçâàëè ïðîôèáðèëëàìè. Òàêèå ñòðóêòóðû íàáëþäàëè êàê íàîáðàçöàõ, ïðèãîòîâëåííûõ íà ñëþäå (ðèñ.

6à, ñ, e), òàê è íà îáðàçöàõ, ïðèãîòîâëåííûõ íà ÃÌÄÑ-ñëþäå (ðèñ. 6, b, d, f).Äàëåå áûëà ïðåäëîæåíà ìîäåëü äëÿ îïèñàíèÿ ïðîöåññà ôîðìèðîâàíèÿ ïðîôèáðèëë çà ñ÷åò âçàèìîäåéñòâèÿ α-C-äîìåíîâ ìîëåêóë(íåêðèñòàëëèçóåìûõ Ñ-êîíöîâ α-öåïåé). Èçâåñòíî, ÷òî â ôèáðèíîãåíå α-C-äîìåíû ðàñïîëàãàþòñÿ âáëèçè öåíòðàëüíîãî Å-äîìåíà, íîïîñëå îòùèïëåíèÿ ôèáðèíîïåïòèäà B â ôèáðèíå îíè îòäàëÿþòñÿ îòýòîé îáëàñòè ìîëåêóëû.

Êðîìå òîãî, ìåòîäàìè ñèëîâîé ñïåêòðîñêî14Ðèñ. 5: ÀÑÌ-èçîáðàæåíèÿ àññîöèàòîâ ôèáðèíà, îáðàçóþùèõñÿ ïðèâûñîêîé êîíöåíòðàöèè ôèáðèíîãåíà: À) 9 ìÌ ñïóñòÿ 30 ñåêóíä ïîñëå äîáàâëåíèÿ òðîìáèíà B) 9 ìÌ ñïóñòÿ 10 ìèíóò ïîñëå äîáàâëåíèÿòðîìáèíà C) 0,2 ìÌ ñïóñòÿ 1 ìèíóòó ïîñëå äîáàâëåíèÿ òðîìáèíàD) 0,2 ìÌ ñïóñòÿ 1 ìèíóòó ïîñëå äîáàâëåíèÿ òðîìáèíà, ïðè óâåëè÷åíèè âèäåí ïåðèîä íà âîëîêíàõ.15Ðèñ. 6: ÀÑÌ-èçîáðàæåíèÿ ïåðâè÷íûõ àññîöèàòîâ ôèáðèíà ïðîòîôèáðèëë è ïðîôèáðèëë íà ñëþäå (À, Ñ, E) è íà ÃÌÄÑ-ñëþäå(B, D, F).16ïèè è îïòè÷åñêîãî ïèíöåòà áûëî ïîêàçàíî, ÷òî α-C-äîìåíû ñïîñîáíû ê âçàèìîäåéñòâèþ äðóã ñ äðóãîì.

Äëÿ ïðîâåðêè âûäâèíóòîé ãèïîòåçû áûëè ïðîâåäåíû ýêñïåðèìåíòû ïî ÏÝÌ ðàííèõ àññîöèàòîâôèáðèíà, èññëåäîâàëè ñâåðòûâàíèå ôèáðèíà â ïðèñóòñòâèè èíãèáèòîðà GPRP, áëîêèðóþùåãî îáðàçîâàíèå ïðîòîôèáðèëë, à òàêæå èññëåäîâàëè âîçìîæíîñòü îáðàçîâàíèÿ îäíîòÿæåâûõ ïðîôèáðèëë èçdesα-C-ôèáðèíîãåíà. ýêñïåðèìåíòàõ ïî ÏÝÌ áûëî ïîêàçàíî, ÷òî êîðîòêèå îäíîòÿæåâûå ïðîôèáðèëëû íàáëþäàþòñÿ òàêæå è ýòèì ìåòîäîì.  ïðèñóòñòâèè èíãèáèòîðà GPRP â ìàëûõ êîíöåíòðàöèÿõ ôèáðèíîãåíàìåòîäîì ÀÑÌ íàáëþäàëè îáðàçîâàíèå àññîöèàòîâ, ñòðóêòóðà êîòîðûõ áîëåå ñîîòâåòñòâîâàëà îäíîòÿæåâûì ïðîôèáðèëëàì. Îáðàçîâàíèå ïðîôèáðèë èç desα-C-ôèáðèíà íå áûëî çàôèêñèðîâàíî. ðåçóëüòàòå ïðîâåäåííûõ ýêñïåðèìåíòîâ ìû ïðåäïîëàãàåì, ÷òîïðîôèáðèëëû äåéñòâèòåëüíî îáðàçóþòñÿ â ðàçáàâëåííûõ ðàñòâîðàõ ôèáðèíà çà ñ÷åò âçàèìîäåéñòâèÿ α-C-äîìåíîâ ñîñåäíèõ ìîëåêóë äðóã ñ äðóãîì.

Ìû ïðåäïîëàãàåì, ÷òî îáíàðóæåííûå îäíîòÿæåâûå àññîöèàòû ÿâëÿþòñÿ ïåðåõîäíîé ôîðìîé â ñòðóêòóðå âîëîêîí,êîòîðàÿ îáåñïå÷èâàåò ñáëèæåíèå ìîëåêóë â õîäå ñâåðòûâàíèÿ, äëÿäàëüíåéøåé ïåðåãðóïïèðîâêè è îáðàçîâàíèÿ ïðîòîôèáðèëë.Ãëàâà III.  ðàçäåëå III.1 îïèñûâàþòñÿ ýêñïåðèìåíòàëüíûåìåòîäèêè ïîëó÷åíèÿ è èññëåäîâàíèÿ ÍÏ, ñèíòåçèðîâàííûõ íà îñíîâå ÁÎ ñïèðàëüíûõ âèðóñîâ ðàñòåíèé.  òîì ÷èñëå îïèñûâàþòñÿìåòîäû âûäåëåíèÿ ÍÊ è âèðóñíûõ áåëêîâ, ìåòîäèêè ñáîðêè èñêóññòâåííûõ ÐÍÏ è ÄÍÏ êîìïëåêñîâ íà îñíîâå ÁÎ ÕÂÊ è ÂÌÀëüò,îïèñûâàþòñÿ ìåòîäû ïðèãîòîâëåíèÿ îáðàçöîâ äëÿ ÀÑÌ è èñïîëüçîâàííûå ìåòîäèêè ñêàíèðîâàíèÿ. ðàçäåëå III.2 îïèñûâàþòñÿ ðåçóëüòàòû ÀÑÌ-èññëåäîâàíèÿÍÏ. Íåñìîòðÿ íà òî ÷òî îáùèé ïðèíöèï ðåêîíñòðóêöèè âèðóñíûõ÷àñòèö èçâåñòåí ñ ñåðåäèíû 70-õ ãîäîâ XX âåêà, ðàçðàáîòêà êîíêðåòíûõ ìåòîäèê ñáîðêè èñêóññòâåííûõ ÍÏ ñ èñïîëüçîâàíèåì íîâîãî ÁÎ17èëè íîâîé ÍÊ, à òàêæå îïðåäåëåíèå ñòðóêòóðû ïîëó÷åííûõ ÷àñòèöêàæäûé ðàç ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé íîâóþ íàó÷íóþ çàäà÷ó.

 äàííîéðàáîòå èñïîëüçîâàëè äâà ðàçëè÷íûõ ÁÎ ÕÂÊ è ÂÌÀëüò è äâàòèïà ÍÊ ÐÍÊ è ÄÍÊ. ðàáîòå ïîêàçàíî, ÷òî â 0,01 Ì áóôåðå Òðèñ-HCl ïðè pH 6,0îáðàçóåòñÿ ñòàáèëüíûé êîìïëåêñ ÁÎ ÕÂÊ ñ ÄÍÊ. Äëÿ ïîëó÷åíèÿôðàãìåíòîâ ÄÍÊ èñïîëüçîâàëàñü ïëàçìèäà, ñîäåðæàùàÿ ïîëíîãåíîìíóþ êÄÍÊ êîïèþ ãåíîìà ÕÂÊ. Îáðàáîòàííûé ðåñòðèêòàçàìèïðåïàðàò ðàçäåëÿëè íà ôðàêöèè, ñîäåðæàùèå ôðàãìåíòû îïðåäåëåííîé äëèíû: 500, 1000, 3000 è 5000 ï. í. Ïîëó÷åííûå ÷àñòèöûèññëåäîâàëè ïðè ïîìîùè ÀÑÌ, ÏÝÌ è ãåëüýëåêòðîôîðåçà. Òèïè÷íûå èçîáðàæåíèÿ ÄÍÏ ïðèâåäåíû íà ðèñóíêå 7ã.

Îòìåòèì, ÷òîïðè pH 8,0 êîìïëåêñ ÄÍÊ ñ ÁÎ ÕÂÊ îáðàçóåòñÿ ìàëîýôôåêòèâíîè èìååò õàðàêòåðíóþ ìîðôîëîãèþ ¾áóñèí íà íèòè¿.Äëÿ êîíòðîëÿ ñáîðêè èñïîëüçîâàëè ãîìîëîãè÷íûå è ãåòåðîëîãè÷íûå ÐÍÏ. Äëÿ ýòîãî èñïîëüçîâàëè îïèñàííóþ ðàíåå ìåòîäèêó:ñìåñü ÐÍÊ è ÁÎ â ìîëÿðíîì ñîîòíîøåíèè 1:700 èíêóáèðîâàëè â òå÷åíèå 15 ìèíóò â 0,01 Ì áóôåðå Òðèñ-HCl pH 7,58,0 â íåáîëüøîìîáúåìå 1020 ìêë ïðè 20◦ Ñ, ðåàêöèþ îñòàíàâëèâàëè äîáàâëåíèåìáðîìôåíîëîâîãî ñèíåãî, ëèáî îõëàæäåíèåì ðåàêöèîííîé ñìåñè âîëüäó. Ðàíåå áûëî ïîêàçàíî, ÷òî ïðè pH 8,0 ñáîðêà êîìïëåêñà ïðîõîäèò íàèáîëåå ýôôåêòèâíî. Òèïè÷íûå èçîáðàæåíèÿ ãîìîëîãè÷íûõ èãåòåðîëîãè÷íûõ ÐÍÏ ïðèâåäåíû íà ðèñóíêå 7á è 7â.

Ñðåäíÿÿ âûñîòà êàê ãîìîëîãè÷íûõ, òàê è ãåòåðîëîãè÷íûõ ÐÍÏ, îïðåäåëåííàÿ ïîíàøèì äàííûì, ñîñòàâèëà 10,0 ± 0,6 íì. Äëèíà ÐÍÏ âàðüèðîâàëàñüîò 3040 íì äî 350400 íì.Àíàëèçèðóÿ ýòè ðåçóëüòàòû, ìû âèäèì, ÷òî ãîìîëîãè÷íûå è ãåòåðîëîãè÷íûå ÐÍÏ íåðàçëè÷èìû ïî ñâîåé ìîðôîëîãèè. Îò íàòèâíûõâèðèîíîâ ÕÂÊ îíè îòëè÷àþòñÿ òîëüêî äëèííîé: ïðè ñáîðêå ÐÍÏìû íàìåðåííî èñïîëüçóåì ìåíüøåå ñîîòíîøåíèå ÐÍÊ:áåëîê, ÷åìâ íàòèâíîì âèðèîíå (1:700 âìåñòî 1:1350).

Ýòî äàåò âîçìîæíîñòü18Ðèñ. 7: ÀÑÌ-èçîáðàæåíèÿ ðàçëè÷íûõ íóêëåîïðîòåèäîâ íà ïîâåðõíîñòè ñâåæåñêîëîòîé ñëþäû: à) ÕÂÊ; á) ãîìîëîãè÷íûå ÐÍÏ; â) ãåòåðîëîãè÷íûå ÐÍÏ; ã) ÄÍÏ; ä) ÄÍÏ è ÐÍÏ íà îäíîì ïîëå. Ìåðíûéîòðåçîê íà âñåõ èçîáðàæåíèÿõ ñîñòàâëÿåò 1 ìêì.íàáëþäàòü íåäîñîáðàííûå ¾îäíîõâîñòûå ÷àñòèöû¿ è ãàðàíòèðîâàòüîòñóòñòâèå èçáûòêà áåëêà íà ïîâåðõíîñòè.Ïðè ïîìîùè ÀÑÌ áûëî ïîêàçàíî, ÷òî ìîðôîëîãèÿ ÄÍÏ ñóùåñòâåííî îòëè÷àåòñÿ îò ìîðôîëîãèè ÐÍÏ è íàòèâíûõ âèðèîíîâ(ðèñ. 7ã, ä). ×àñòèöû ÄÍÏ ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé ïðîòÿæåííûå èçâèòûå íèòè, âûñîòà êîòîðûõ íåîäíîðîäíà ïî äëèíå è çíà÷èòåëüíî íèæå âûñîòû ÐÍÏ è ÕÂÊ.

Ýòî îò÷åòëèâî âèäíî íà ðèñ. 7ä, íà êîòîðîìïðèâåäåíî èçîáðàæåíèå îáîèõ òèïîâ ÷àñòèö, ÐÍÏ è ÄÍÏ íà îäíîìïîëå. Äëèíà ÄÍÏ èçìåíÿëàñü â çàâèñèìîñòè îò äëèíû èñïîëüçîâàííîé ÄÍÊ. Ïðè èñïîëüçîâàíèè ÄÍÊ, ñîñòîÿùåé èç 5000 ï. í., ñðåäíÿÿäëèíà ïîëó÷åííûõ ÄÍÏ ñîñòàâèëà 1700 íì. Ïîñêîëüêó äëèíà îäíîéïàðû îñíîâàíèé ñîñòàâëÿåò 0,34 íì, ÄÍÊ, ñîñòîÿùàÿ èç 5000 ï. í.,äîëæíà èìåòü äëèíó ðîâíî 1700 íì. Òàêèì îáðàçîì, ìû ìîæåìóòâåðæäàòü, ÷òî ÄÍÊ â ñîñòàâå êîìïëåêñà íàõîäèòñÿ â ðàñïðàâ19ëåííîì ñîñòîÿíèè è, ñëåäîâàòåëüíî, îðãàíèçàöèÿ êîìïëåêñà ÁÎ èÄÍÊ â ñîñòàâå ÄÍÏ íå ñîîòâåòñòâóåò ñòðóêòóðå âèðèîíà.Âûñîòà ÄÍÏ ïî äàííûì ÀÑÌ îêàçàëàñü íåîäíîðîäíà ïî äëèíå÷àñòèöû, ÷òî òàêæå ãîâîðèò î íåðåãóëÿðíîé ñòðóêòóðå êîìïëåêñà.Ñðåäíÿÿ âûñîòà ÄÍÏ ñîñòàâèëà 4,0 ± 0,5 íì, íî âûñîòà îòäåëüíûõó÷àñòêîâ íåêîòîðûõ ÷àñòèö áûëà åùå ìåíüøå è ñîîòâåòñòâîâàëà âûñîòå ÄÍÊ ìåíåå 2 íì.

Ýòîò ýôôåêò ïðîÿâèëñÿ â íàèáîëüøåé ñòåïåíè â ýêñïåðèìåíòàõ ïî ñáîðêå ÄÍÏ ïðè pH 8,0, êîãäà âçàèìîäåéñòâèå ÁÎ ñ ÄÍÊ ïðîèñõîäèò ìàëîýôôåêòèâíî, áåëîê íå ïîëíîñòüþîäåâàåò ÄÍÊ è âåñü êîìïëåêñ â öåëîì ïðåäñòàâëÿë ñîáîé ñòðóêòóðóòèïà áóñèí íà íèòè.Äàëåå â ðàáîòå áûëà èññëåäîâàíà âîçìîæíîñòü ñáîðêè àíàëîãè÷íûõ ÄÍÏ ñ èñïîëüçîâàíèåì ÁÎ ðîäñòâåííîãî âèðóñà ÂÌÀëüò.Îêàçàëîñü, ÷òî ÁÎ ÂÌÀëüò íå îáðàçóåò óñòîé÷èâîãî êîìïëåêñà ñÄÍÊ. Áûëî ïîêàçàíî, ÷òî ïðè pH 8,0 èäåò àêòèâíàÿ àññîöèàöèÿ ñàìîãî ÁÎ, íà ïîâåðõíîñòè îáðàçöà íàáëþäàëè ðàçâåòâëåííóþ ñåòüâîëîêîí, ñîáðàííûõ èç áåëêà, è íåñâÿçàííûå ñ ýòèìè âîëîêíàìè ìîëåêóëû ÄÍÊ (ðèñ. 8).  êîíòðîëüíûõ îáðàçöàõ â îòñóòñòâèè ÄÍÊòàêæå íàáëþäàëè îáðàçîâàíèå áåëêîâûõ àññîöèàòîâ. ðàçäåëå III.3 îïèñûâàþòñÿ ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ ñòðóêòóðû ÐÍÏ è ÄÍÏ ìåòîäàìè ôåðìåíòíîãî àíàëèçà, ïðîâåäåííûå ñîâìåñòíî ñ ñîòðóäíèêàìè êàôåäðû âèðóñîëîãèè Áèîëîãè÷åñêîãî ôàêóëüòåòà ÌÃÓ, êîòîðûå ïîëíîñòüþ ïîäòâåðæäàþò âûâîäû, ñäåëàííûå íà îñíîâå ðåçóëüòàòîâ ìèêðîñêîïèè.Ïðè ñðàâíåíèè äàííûõ ÀÑÌ è ÏÝÌ î ìîðôîëîãèè íàòèâíîãî âèðóñà ÕÂÊ ñ äàííûìè î ìîðôîëîãèè ÐÍÏ è ÄÍÏ íà îñíîâååãî ÁÎ áûëî ñäåëàíî ïðåäïîëîæåíèå î òîì, ÷òî êîýôôèöèåíò ìåõàíè÷åñêîé æåñòêîñòè ÄÍÏ êîìïëåêñà äîëæåí áûòü ñóùåñòâåííîíèæå, ÷åì êîýôôèöèåíòû æåñòêîñòè ÕÂÊ è ÐÍÏ, êîòîðûå äîëæíûáûòü ïðèìåðíî îäèíàêîâû.

Äëÿ òîãî ÷òîáû â áóäóùåì áûëà âîçìîæíîñòü ïðÿìî ïðîâåðèòü ýòó ãèïîòåçó, áûëè ðàçðàáîòàíû ìåòî20Ðèñ. 8: ÀÑÌ-èçîáðàæåíèÿ ïîëèìåðîâ ÁÎ ÂÌàëüò (À), íà óâåëè÷åííîì èçîáðàæåíèè (Á) âèäíû ìîëåêóëû ÄÍÊ, íå âõîäÿùèå â ýòèàãðåãàòû.äû ýêñïåðèìåíòîâ ïî ñèëîâîìó êàðòèðîâàíèþ âèðóñíûõ ÷àñòèö èàëãîðèòì àíàëèçà ïîëó÷åííûõ äàííûõ. Ðåçóëüòàòû ðàáîòû â ýòîìíàïðàâëåíèè îïèñàíû â ãëàâå IV.

Äåòàëüíî îïèñàí àëãîðèòì, ðàçðàáîòàííûé äëÿ àíàëèçà äàííûõ ýêñïåðèìåíòîâ ïî ñèëîâîìó êàðòèðîâàíèþ, ïðèâåäåíû ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ æåñòêîñòè ÂÒÌ.Âûâîäû1. Ìåòîäîì ÀÑÌ ïîêàçàíî, ÷òî íà ðàííèõ ñòàäèÿõ àññîöèàöèèôèáðèíà íàðÿäó ñ äâóòÿæåâûìè ïðîòîôèáðèëëàìè ñóùåñòâóþò áîëåå òîíêèå àññîöèàòû êîðîòêèå îäíîòÿæåâûå ïðîôèáðèëëû, îáðàçîâàííûå ïðè ñâÿçûâàíèè α-Ñ-äîìåíîâ ñîñåäíèõìîëåêóë äðóã ñ äðóãîì.2. Ìåòîäîì ÀÑÌ ïîêàçàíî, ÷òî ìîëåêóëû ôèáðèíîãåíà ñèëüíîäåôîðìèðóþòñÿ ïðè àäñîðáöèè íà ãèäðîôèëüíóþ ñëþäó è âìåíüøåé ñòåïåíè äåôîðìèðóþòñÿ ïðè àäñîðáöèè íà ãèäðîôîá21íóþ ÃÌÄÑ-ñëþäó. Ðåçóëüòàòû ÀÑÌ ïîäòâåðæäåíû ìåòîäîìÌÄ.3.