СЕВЕРНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

КУРС КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

Руководитель проф. Воробьёва Н.А.

Сбор и транспортировка проб биологических материалов для бактериологического исследования

Выполнила врач-ординатор Петрова Л. В.

Архангельск 2009 г.

Содержание

Ведение

1. Общие положения

2. Правила биологической безопасности

3. Оборудование и среды для взятия материала

4. Техника взятия основных видов биологического материала

4.1 Кровь

4.2 Ликвор

4.3 Отделяемое из верхних дыхательных путей

4.3.1 Мазок со слизистых передних отделов полости носа

4.3.2 Соскоб со слизистых передних отделов полости носа

4.3.3 Слизь из носоглотки и носа

4.3.4 Слизь с задней стенки глотки

4.3.5 Слизь с задней стенки глотки

4.3.6 Назальный смыв

4.3.7 Аспират из придаточных пазух

4.4 Отделяемое из нижних отделов дыхательных путей

4.4.1 Мокрота

4.4.2 Промывные воды бронхов

4.4.3 Пробы, полученные с использованием бронхоскопа

4.5 Желчь

4.6 Моча

4.7 Отделяемое из мочеполовых органов мужчин и женщин

4.7.1 Твердый шанкр, папулы, розеолы

4.7.2 Материал из уретры

4.8 Материал из половых органов у мужчин

4.8.1 Язва полового члена

4.8.2 Материал из простаты

4.8.3 Материал из яичка, его придатков и паховых лимфатических узлов

4.9 Отделяемое женских половых органов

4.9.1 Материал из влагалища

4.9.2 Материал из цервикального канала

4.10 Раневые (хирургические) инфекции

4.11 Пробы при воспалительных заболеваниях глаз

4.11.1 Материал с конъюнктивы

4.11.2 Соскоб с роговицы

4.11.3 Смыв с контактных линз

4.12 Пробы при воспалительных заболеваниях органов слуха

4.12.1 Отделяемое из наружного слухового прохода

4.12.2 Жидкость при тимпаноцентезе

4.13 Инфекции в стоматологии

4.13.1 Содержимое из зубодесневого кармана

4.14 Пробы испражнений

4.14.1 Нативные испражнения

4.14.2 Ректальные мазки (Rectal swabs)

5. Особенности взятия материала и оформления направления на исследование при некоторых клинических ситуациях

5.1 Оформление направлений на исследование

5.2 Взятие материала для выявления стрептококков группы В

5.3 Взятие материала для диагностики дисбактериоза и заболеваний, вызываемых условно-патогеными бактериями

5.4 Взятие материала при подозрении на холеру по МУ 4.2.1097-02

5.5 Взятие рвотных масс и промывных вод

5.6 Взятие биоптата для исследования на хеликобактер

5.7 Взятие материала при подозрении на интранатальную инфекцию

5.8 Грудное молоко

5.9 Серодиагностика

5.10 Взятие крови из вены

5.11 Взятие крови с помощью вакуумной системы

5.12 Взятие крови с помощью шприца

5.13 Получение сыворотки из венозной крови

5.14 Взятие папиллярной крови для постановки микрореакции преципитации с целью диагностики сифилиса

Заключение

Список использованных источников

Ведение

В данном реферате я отразила правила сбора и транспортирования некоторых биологических материалов в микробиологические лаборатории. Приведённые способы помогут повысить качество результатов лабораторных исследований, что в свою очередь создаст условия для своевременной организации противоэпидемических и профилактических мероприятий, а также будет способствовать качественной профилактике внутрибольничных инфекций как у медицинского персонала, так и пациентов.

1. Общие положения

Взятие материала предпочтительно проводить до начала антибактериальной терапии. На фоне антибактериальной терапии материал забирают перед очередным введением антимикробных препаратов, то есть в момент, когда их концентрация в организме минимальна.

При взятии пробы следует строго соблюдать правила асептики, во избежание ее случайной посторонней контаминации.

Для взятия проб следует использовать стерильные инструменты, а для их транспортировки стерильные пробирки или контейнеры. Использование нестерильных сухих, чистых пробирок допускается только для отбора и транспортировки крови на серологические исследования.

Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования.

Транспортировка материала должна осуществляться в максимально короткие сроки: как правило, не более 1,5 — 2 часов.

Всегда следует стремиться использовать транспортные системы со средой (консерванты), что позволяет пролонгировать время транспортировки до 24 часов и более или осуществлять посев непосредственно у постели больного (кровь, ликвор и др.);

Материал для исследования на неспорообразующие анаэробы, доставляемый без использования транспортных систем со средой (консервантов) должен транспортироваться:

• в специальном герметично закрытом флаконе, заполненном инертным газом, в который проба вносится путем прокола крышки иглой шприца;

• в одноразовом шприце, из которого удален воздух, и кончик которого закрыт либо стерильной резиновой пробкой, либо иглой, с надетым на нее штатным защитным колпачком.

Все образцы должны иметь четкую маркировку, обеспечивающую их безошибочную идентификацию. К каждому образцу прикладывается направление. В направлении на исследование должны быть отображены следующие данные:

• дата и время назначения исследования;

• дата и время взятия биологического материала;

• Ф.И.О. пациента;

• отделение, номер амбулаторной карты/истории болезни, номер палаты;

• возраст, пол;

• диагноз;

• Ф.И.О. лечащего врача;

• перечень необходимых исследований;

• подпись специалиста, проводившего забор клинического материала.

2. Правила биологической безопасности

К работе по взятию и транспортировке биологического материала допускается медицинский персонал, прошедший специальный инструктаж по технике работы и мерам безопасности.

При взятии биологического материала должны использоваться средства защиты: медицинские халаты, шапочки, сменная обувь, резиновые (латексные, виниловые) перчатки, а при необходимости — дополнительно марлевые маски (респираторы), очки, клеенчатые фартуки.

Работать с исследуемым материалом следует в резиновых (латексных, виниловых) перчатках, все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем или напальчником. Следует избегать уколов и порезов.

В случае загрязнения кожных покровов кровью или другими биологическими жидкостями следует немедленно обработать их в течение 2 мин. тампоном, обильно смоченным 70% спиртом, вымыть под проточной водой с мылом и вытереть индивидуальным тампоном. При загрязнении перчаток кровью их протирают тампоном, смоченным 3% раствором хлорамина, 6% раствором перекиси водорода.

При подозрении на попадание крови на слизистые оболочки, их немедленно обрабатывают струей воды, 1% раствором протаргола; рот и горло прополаскивают 70% спиртом или 1% раствором борной кислоты или 0,05% раствором перманганата калия.

Для транспортировки образцов следует использовать преимущественно пластиковую одноразовую тару, герметично закрытую пластмассовыми, резиновыми пробками или завинчивающимися крышками. Запрещается использовать стеклянную посуду со сколами, трещинами и т.п. При транспортировке сосудов, закрытых целлюлозными (ватными) пробками, следует исключить их увлажнение.

Транспортировка биоматериала осуществляется в специальных закрытых переносках (укладках), желательно - термостатированных, выдерживающих дезинфекцию.

Сопроводительная документация помещается в предназначенный для нее карман переноски (укладки), а в случае его отсутствия — кладется в переноску в отдельном полиэтиленовом пакете.

При хранении биологического материала в холодильнике каждый образец упаковывается в отдельный полиэтиленовый пакет. Для этой цели выделяется отдельный холодильник, хранение в котором пищевых продуктов и лекарственных препаратов не допустимо.

3. Оборудование и среды для взятия материала

Для взятия и транспортировки биологического материала следует использовать одноразовые стерильные тубсеры (пробирки с тампонами) промышленного производства или транспортные системы со средой. Ватные (хлопковые) тампоны, изготовляемые непосредственно в лаборатории из медицинской ваты могут быть использованы только в крайнем случае, так как медицинская вата может обладать антимикробными свойствами.

Для снятия возможного бактерицидного действия тампоны из медицинской ваты после изготовления кипятят в буферном растворе Соренсена (18 мл 1/15М раствора КН2Р04 + 8,2 мл 1/15 М раствора NaHP04; pH 7,4), встряхивают, высушивают в термостате, помещают в пробирки и стерилизуют в автоклаве при 120°С 30 минут.

Если тампоны предназначены для взятия материала на гонорею их 20 минут кипятят в фосфатном буфере (181,7 мл 0,2М NaH,P04 + 18,3 мл 0,1 М раствора лимонной кислоты; рН 7,4) и импрегнируют в течение 24 часов в 1 % водной суспензией тонко измельченного древесного угля. Затем тампоны высушивают, подправляют, монтируют в пробки и стерилизуют в автоклаве при 120°С 20 минут.

Для транспортировки материала целесообразно использовать специальные транспортные системы со средой. Их выбор с учетом вида материала, цели исследования и технических возможностей осуществляет лаборатория. К. числу наиболее универсальных транспортных сред относятся среда Стюарта и среда Эймс.

Транспортная система со средой Стюарта Среда Стюарта представляет собой полужидкий, бедный питательными веществами субстрат для сохранения и транспортировки широкого спектра патогенных микроорганизмов, таких, как Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Corynebacterium diphteriae, Trichomonas vaginalis, Streptococcus sp., Salmonella sp., Shigella sp. и др. Наиболее требовательные микроорганизмы сохраняются в данной среде более суток, прочие -до нескольких дней.

Наличие в среде тиогликолата подавляет ферментативную активность бактерий, а отсутствие азота предотвращает их размножение.

Транспортная система со средой Кери Блейр

Представляет собой модификацию базовой транспортной среды Стюарта, предназначенную специально для фекальных образцов. Глицерофосфат, являющийся метаболитом некоторых энтеробактерий (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, и др.), заменен неорганическим фосфатом, удален метиленовый синий, и рН среды поднята до 8,4.

Среда Кери Блейр позволяет сохранять большинство патогенов, включая требовательные микроорганизмы, такие, как Neisseria sp., Haemophilus sp., Streptococcus sp. Данная среда является стандартной для транспортировки анаэробов.

Транспортная система со средой Эймса

Представляет собой очередную модификацию базовой транспортной среды Стюарта, в которой глицерофосфат заменен неорганическим фосфатом, поскольку глицерофосфат является метаболитом некоторых энтеробактерий (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, ets.) и может поддерживать рост некоторых грамотрицательных микроорганизмов.

Метиленовый синий заменен на активированный уголь фармацевтического качества. В среду добавлены кальций и магний для поддержания проницаемости бактериальных клеток.

Эта среда способна более 3 дней поддерживать такие микроорганизмы, как Neisseria sp., Haemophilus sp., Corynebacteria, Streptococci, Enterobacteriaceae и др., однако наилучшие результаты дает культивирование в течение первых 24 часов.2 часов. При использовании транспортной системы со средой срок доставки пробы в лабораторию может быть продлен максимально до 72 часов.

4. Техника взятия основных видов биологического материала

4.1 Кровь

Показания к проведению исследования: клиническая картина сепсиса; лихорадочные состояния неустановленной этиологии; пневмонии; подозрение на инфекционные заболевания: брюшной тиф и паратифы, сальмонеллезы, бруцеллез, возвратный тиф, лептоспирозы, малярия, эпидемический менингит, пневмококковые инфекции, пищевые токсикоинфекции (при наличии лихорадки), стафилококковые и стрептококковые инфекции, сибирская язва, туляремия, чума.

Количество независимо отбираемых проб крови и время их взятия определяется лечащим врачом (табл. 1). Как правило, должны исследоваться не менее 2—3 проб крови, каждая из которых взята путем отдельной венепункции. Это необходимо для дифференциации истинной бактериемии от случайной контаминации крови при венепункции. Вероятность загрязнения вследствие случайного прокола сальной или потовой железы составляет 3%.

Таблица 1. Рекомендуемое число отбираемых проб крови в зависимости от клинической ситуации

У больных, получающих антибактериальные препараты, пробы необходимо собирать непосредственно перед введением следующей дозы препарата. При наличии лихорадки оптимальным является взятие крови на фоне повышения температуры тела (но не на пике температуры!).