И.П. Ашмарин, А.А. Каменский, Г.С. Сухова - Руководство к практическим занятия по физиологии человека и животных, страница 44

Неиолную ишемию мозга создают путем пережатия только части кровеносных сосудов, подающих кровь к голове (например, двусторонней окклюзией сонных артерий) или увеличением внутри- черепного давления немногим больше общего кровяного давления. Для предупреждения компенсации ишемии активацией коллатерального кровобращения билатеральную окклюзию сонных артерий часто комбинируют с понижением кровяного давления 3 5 — 2261 Часть |1. Практические задачи по патофизиологии до гипотензивного уровня с помощью отбора некоторого объема крови или проведением ганглиоблокады.

Основная патофизиологическая особенность неполной ишемии головного мозга состоит в том, что перфузионное давление становится недостаточным для поддержания кровотока в периферических областях бассейнов главных мозговых артерий. В этих пограничных зонах между бассейнами главных артерий снижение кровотока и ишемия выражены в наибольшей степени. В клинических условиях особой опасности ишемического воздействия подвергается височно-теменная область — общая пограничная зона между бассейнами всех трех мозговых артерий.

При неполной ишемии мозга кровоток частично восстанавливается за счет компенсаторного включения коллатералей, но при этом наблюдается чередование "лоскутов" гиперемии и гипоперфузии, т.е. локальный мозговой кровоток не снижается, а, напротив, сильно варьирует в разных частях мозга от низких значений до неадекватно высоких. В конечном счете в условиях ишемии поступление жидкости наряду со снижением рН и нарушением ионного равновесия вызывает ишемический отек мозга, приводящий к сдавливанию сосудов микроциркуляторного русла. Отек мозга вместе с отеком эндотелия сосудов может препятствовать рециркуляции после ишемии (феномен "невосстановленного кровотока'*).

Более полное представление о моделях ишемии мозга можно получить из обзора К.-А.Хоссмана (Ноятапп, 1998). Таким образом, моделирование ишемии мозга на животных позволяет исследовать патофизиологические механизмы этой патологии и ее последствия, а также применяется для тестирования средств профилактики и терапии нарушений мозгового кровобращения ишемического типа, направленных на улучшение перфузии ткани мозга и нейропротекцию. Цель работы. Освоить методику моделирования неполной ишемии головного мозга у крыс и провести анализ неврологического статуса животных с ишемией мозга по шкалам балльной оценки.

МЕТОДИКА В данной работе неполную ишемию мозга вызывают путем одномоментной двусторонней перевязки общих сонных артерий. В задаче используют лабораторных крыс весом 130 — 150 г. У молодых животных в возрасте 1,5 — 2 месяца ишемия мозга воспроизводится лучше, чем у взрослых. Материалы и оборудование. Хирургические и глазные ножницы; прямой глазной пинцет; изогнутый глазной пинцет или два стеклянных крючка; хирургическя игла, зажим-держатель для иглы; нитки; вата; 5%-й раствор йода или спирт; антибиотик (бициллин или др.); эфир и маска для наркоза; препаровальный столик.

Тема У. Патофизиология нервной системы ХОД РАБОТЫ 227 1. Моделирование неполной ишемии головного мозга крысы. Крыс подзаделяют на опытную и контрольную группы. Операцию проводят под эфирным наркозом: животные выходят из него быстро, что позволяет практически сразу вести наблюдение за развитием неврологической симптоматики; кроме того, эфир не оказывает заметного защитного действия на мозг при развитии ишемии, свойственного, например, барбитуратам (МсОга~ч, 1977). Так как действие эфира является кратковременным и животное может просыпаться во время операции, необходимо иметь маску с эфиром для добавления наркоза.

Во избежание передозировки наркоза следует-тщательно следить за дыханием. Наркотизированную крысу фиксируют завязками на препаровальном столике на спине. На шее, в том месте, где будет осуществляться хирургический доступ к сонным артериям, выщипывают шерсть и операционное поле обрабатывают раствором йода или спиртом. Оттянув пинцетом кожу, делают продольный разрез длиной 1 — 1,5 см, глазными пинцетами или стеклянными крючками раздвигают кожу и фасции и, отодвинув с одной стороны грудинно-сосцевидную мышцу, находят нервно-сосудистый пучок, в состав которого входят блуждающий нерв, пограничный ствол симпатической нервной системы и общая сонная артерия, хорошо различимая благодаря мощной пульсации.

С помощью загнутого пинцета или стеклянных крючков общую сонную артерию осторожно отсепаровывают от нервных стволов и подводят под нее лигатуру. Так же отсепаровывают общую сонную артерию на другой стороне и подводят под нее лигатуру. Затем быстро по очереди перевязывают артерии, затянув по 2 узла на каждой, концы лигатур обрезают, оставив кончики длиной около 3 мм. Обычно для гарантии того, что кровоток в артерии действительно перекрыт, завязывают на каждой артерии по две лигатуры и сосуд между ними перерезают. Одновременно с перевязкой засекают время, от которого в дальнейшем определяют латентный период до возникновения клиничекой симптоматики и ведут мониторинг динамики развития неврологического дефицита.

Рану обрабатывают антибиотиком (бициллин или др.), зашивают ее сплошным швом и операционное поле (кожу) обрабатывают раствором йода или спиртом. При двусторонней перевязке общих сонных артерий с интервалом в несколько часов симптоматика неврологического дефицита, как правило, не возникает. Такая ишемическая устойчивость может быть связана не только со стимуляцией коллатерального кровообращения в мозге, но и с возникновением ишемической толерантности нейронов в условиях сублетальной ише- 15* Часть И.

Практические задачи по патофизиологии Таблица ! Шкала балльной оценки симптоматики иеврологического дефицита у песчаиок* после перевязки сонных артерий, разработанцая С.Р.МсСгаю ($977) ЗйгоКе- 1пбех 30 мии Нв пп Симптомы 1ч 1,5ч 2,6 ч и т.д. взъерошенная шерсть илн емо 2 снижение азд ажимости 3 ограничение подвижно- сти 4 голова приподнята, паве н авлево вп аво 5 фиксация глаз открытыми (левый, правый или оба) 6 птоз (левый, правый или дв сто онний 7 неуклюже вывернутые задние лапы (левая, правая или обе) 8 выраженное вращение задних конечностей (левой, п авой или обеих) 9 в ащательные движения 1О с до ожные п ипадки 11 вращательные припадки п авый, левый или оба) 12 коматозное состояние 13 смерть 14 в1го1'е-1пдех 15 и имечания ~ Особенностью мозгового кровообращения песчанок является то, что виллизиев круг у них незамкнут, в нем отсутствует связь между базилярной и внутренней сонной артериями.

Поэтому серьезная ишемия развивается у них даже при билатеральной перевязке только сонных артерий. Если после перевязки сонных артерий неврологическая симптоматика не возникает в течение длительного времени из-за устойчивости животных к ишемии, ее развитие можно ускорить путем отбора крови из яремной вены во время операции'в объеме 1— 1,5 мл (для крыс весом 100 г). Для правильной оценки результатов эксперимента проводят контроль с ложной операцией. У контрольных крыс препаровку проводят полностью так же, как и у опытных животных, но сонные артерии не перевязывают.

Ложная операция позволяет доказательно исключить влияние хирургической процедуры на возникновение и развитие неврологической симптомитики. Оперированных животных рассаживают в отдельные клетки для последующего наблюдения. Тема Ч. Патофизиология нервной системы Таблица 2 Шкала балльной оценки неврологического состояния крыс после двусторонней перевязки общих сонных артерий, модифицированная группой ученых Института высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН (Саркисов и др., 1996) йа пп 30 мин Показатели 1ч 1,6ч 24 ч 2,5ч и теда Дыхание: но мальное чашенноеl еженное с участием вспомогатель- ных мышц, а итмичное П нзнаки птоза: отс ств ют односто онний дв сто онний Тон с мышц конечностей: вно ме слабоповышенный повышенный отс ств ет С до оги'.

отс ств ют клонические тонические Реакция на внешние стиму- лы; но мальная сниженная повышенная и неадекват- ная отс тств ет невозможно определить из-за тяжести состояния Поведенческие еакции: но мальные гиперактивность, агрес- сивность гипоактивность Внешний вид: оп ятный неоп ятный Примечание: 25 баллов — смерть; 7 — 24 — тяжелое состояние; 3 — б — состояние средней тяжести; Π— 3 — состояние, близкое к норме.

2. Оценка неврологического дефицита. После одномоментной двусторонней перевязки общих сонных артерий последовательно развивается симптоматика неврологического дефицита. Сначала она выражается в ограничении подвижности животного и появлении птозов (опущение верхнего века, обусловленное нарушением функции поднимающей его мышцы).