Рыбчин - Основы генетической инженерии - 2002 (947310), страница 98
Текст из файла (страница 98)
Контролирующие элементы кукурузы. Р-элементы. Транспозоны ГВ-семейства Ретротранспозоны (52). Ретровирусы. Рстропозоны. Рстрогены. Роль транспозонов (57). Геномные перестройки. Мутации. Перснсс генов. Рскция на стресс. Применение транспозонов (61). Вопросы для повторения и обсуждения (64). Глава 3. ПЛАЗМИДЫ ...65 Общие свойства бактернальных плазмнд (66).
Репликация. Интеграция. Конъюгация. Мобилизация. Нссовмсстилюсть. Поверхностное исключение. Фенотипические признаки. Стабильность плазмид. Р-плазмида (75). Генетика. Коныогативпость. Образование Р'плазмнд. й-плазмилы (32). Плазмида Со!Е1 (05). Плазмиды с широким кругом хозяев (37). Плазмида В.К2. Плазлгида КВР1010. Т1-плазмиды (ЬтвЬасгег)алз полеГас)еав (91). Плазмиды грамположительных бактерий (94). Линейные плазмиды (96). 2-микронная плазьпохл дрожжей (97). Природная генная ш~женерия плазмид (99).
Вопросы для повторения и обсужления (102). 514 Оглавлеиие Глава 4. ФАГИ . 103 Фаг )с (104). Генетика. Механизм лизогении. Получение необычных трансдуцируюсцих фатов. Перенос транспозонов и плазмид. Фаги .акмбдоидного семейства (118). Фаг Р1 (121). Фаг М13 (124). Эволюционные взаимоотногпеиия плазмид и фатов (125).
Вопросы для повторения и обсуждения (127). Глава 5. КЛЕТКИ. !29 Прокариотические клетки (130). Организация генома. Клетки Е. са16 Эукариотические клетки (134). Дифференцировка клеток у дрожжей Юасслаютусел сегетй|ае. Клеточная инженерия растений. Сомазнчсская гибридизация животных клеток.
Клонирование животных. Животные химеры. Перенос генов микду видами (151). Проблема рестрикции. Проблема репликацнн. Проблема рекомбинации. Проблема транскрипции. Проблема кодонов. Геномные перестройки (155). Делении. Инверсии. Инсерцин. Неконтролируемые гсоомные перестройки. Эгоистическая ДН К. Вопросы для повторения и обсужлення ( 160). 9ЛСГБ Н. ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ ПЧ Ч1ТВО ....
... 161 1лава б. ФЕРМЕНТЫ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ИНЖЕНЕРИИ......!63 Ферменты рестрикции и модификации (163). Рсстриктазы. Метилазы. ДПК-лигазы (174). Полниеразы (176). Д1 (К-полимераза! Е. со(с Кленовский фрагмент ДН К-полимсразы 1. ДНК-полимсраза фага Т4. ДНК- полнмсраза фага Т7. Тай-полях!ораза. ДНК-полимеразы Чсп! и Оеср Чеп!. РНК-зависимая ДНК-полимераза.
Поли(А)-полимсраза. РНК-полимеразы фатов Т3, Т7 и 8Р6. Нуклеазьв (183). Нуклеаза 81. Нуклеаза?!Хил8 беат! из проростков золотистой фасо!!к!. Нуклеаза Ва131. Экзонуклеаза 1П Е. са!с. Экзонуклсаза фага К Дезокснрибонуклсаза 1. Рнбонуклсаза Н. Друтие ферменты (185).
Терминальная дсзоксинуклеотиднлтрансфсраза. Щслочнглс фосфатазы. Полинуклеотнлкнназа фага Т4. Вопросы для повторенвя и обсЕкдения (187). 1лава 7. ВЕКТОРЫ ДЛЯ КЛОНИРОВАНИЯ В БАКТЕРИЯХ....!88 Общая характеристика векторов (190). Класси фи ка ц ия. Основные свойства. Дополнительные свойства. Плазмнды нлн фаги? Систпелсы клонирования в клвпсках Е. сай (193). Плазмидиые векторы (193). Плазмида р5С!01.
Г!лазмида Со(Е1. Вектор рВК322. Векторы рПС, Плазмила Р!5А. Векторы прямой селекции. Векторы рСЕМ. Трансформация клеток Е. са!6 Фаговые векторы (205). Векторьс, сконструированные Оглавление 515 па основе ДНК фага К Сборка фатов А а| ила. Векторы, созданные на базе ДНК нитевидных фатов. Гибридные векторы (215). Фагмнды. Космиды. Фазмиды. Векторы для клонирования больших фрапяентов ДНК (222). РАС-клонирование. Линейные векторы ца базе плазмнды Н!5. ВАС-клонирование.
Векторы-транспозоны (228). Другие системы илаиираваиил (229). Векторы грамотрицательных бактерий. Векторы Веслу!аз либп)еь Трансформация клеток Е зяб!|7!а Векторы Яггергаа|усег. Сравиителыигл характеристика векто7|ов (238). Вопросы для повторения н обсужления (239). Глава Е ОПЕРАЦИИ НА ДИК.. 240 Подготовка фрагментов ДНК для клонирования (241). Обьединение фрагментов ДНК (242). Нспосрсдственное объединение. Ферментативная модификация концов. Использование линксров. Использование адаптеров. Коцнскторный метод.
Синтез олигонуклеотидов и генов (254). Направленный мугагенез (257).Сайт-спспифнчсский мушгенсз. Сегмснтспецифический мугагецез. Образование делецнй. Вопросы для повторения и обсуждения (267). Глава 9. АНАДИЗ ГЕНОВ И ГЕИОМОВ ..... Проблемы создания геиомной библиотеки (269). Число клонов в банке. Векторы для клонирования. Выделение н фрагментация ДНК. Клонирование. Составление и хранение коллекции клонов. Банк кДНК. Скрининг банка генов (279). Метод гибридизации колоний. Иммуполо|.ичсскис методы. Генетический мстод. Рскомбицацнонный метод.
Физическое картирование ДНК (288). Плазмндные и вирусные ДНК. Хромосомы. Определение первичной структуры ДНК (300). Химический мстод. Метод полимсразного копирования. Анализ больших последовательностей. Секвеннрованис клеточных гсномов. Вопросы для повторения и обсуждения (312). члСУА Нл ЭКСПРЕССИЯ ЧУЖЕРОДНЫХ ГЕНОВ ................ 313 Глава 10. БАКТЕРИИ .
3!5 Проблемы экспрессии чужДНК в бактериальных клетках (316). Уровень Д1!К. Уровень РНК. Уровень белка. Подходы к конструированию зкспрессионных векторов (329). Плазмидные векторы Фаговый дисплей. Экспрессия прокариотических генов (338). Экспрессия зукарнотическнх генов (339). Оптимизация экспрессии генов в прутик бактериальных системах (347) . Суперпродунепты н проблема стабильности векторов (348) .
Вопросы для повторения и обсуждения (350). 516 Оглавление 1лааа 11. ДРОЖЖ!1 35! Векторы (352). Векторы типа У1р, Векторы типа УЕр. Векторы тина УКр. Векторы тина УСр. Векторы типа У1.р. Векторы типа УАС. УАС-клонирование. ТАК-клоееированис. Транспозопныс векторы. Трансформация дрожжей (362). Экспрессия чужеродньгх генов в дрожжах (363). Экспрессия бактсриальных генов. Экспрессия юнов животееелх. Секреция белков. Клонирование и экспрессия генов в мицеляльных грибах (369).
Вопросы дяя повторения и обсуждения (371). Глава 12. РАСТЕНИЯ ... 372 Векторы (373). Т-ДНК как природные векторы. Маркеры. Коинтсгративныс векторы. Бинарные векторы. Бинарные векторы без Т-ДНК. В1- во аз оры. Вирусные векторы. Трансформация растительных клеток (380). Трансформация аеробактсрияьеи. Трансформация протопластов изолировашгой ДНК. Трансформация клеток и тканей изолированной ДНК. Экспрессия чужеродных генов (384). Вопросы для повторения и обсуждения (388). Глава 1Х ЖИВОТНЫЕ . 389 Храееее21еорлеае!ее» клеток (390). Культивируемые клетки.
Сепсктивные маркеры и гены-репортеры. Кальций-фосфатпый метод. ДЕАЕ-дскстрановый мезод. Микроинъекция ДНК в ядра. Элсктропорапия. Слияние протопласгов. Векеиорье (394). Вирусные векторы (394). Вирус ЯУ40. Векторы с замещением поздних генов БУ40 ДНК. Экспрсссионная кассета. Векторы с замегцением ранней области БУ40 ДНК. Вирус оспоаакцины.
Ретровирусы. Аденовирусы. Бакуловирусы. Плазмилвые векторы (406). Рсюеикаюр вируса БУ40. Плазмилы без эукариотичсского репликатора. Репликатор вируса папилломы быка (ВРУ). Рсцликатор вируса Эпштейна-Барр (ЕВУ), Совремснные векторы. Введение генов в зародышевые клетки и получение гараисгеииых зкивотееьех (410). Микроипъскция ДНК. Ипфицирование рстровирусами. Использование эмбриональных стволовых клеток.
Использование транспозонов. Введение генов в иекаии и гении» терааи» (4! 8). Генетические болезни человека и генная терапия (4! 9). Проблемы генной терапии человека (420). Системы переноса генов (422). Вирусный способ. Миобласты как клеточные векторы. Клетки костною мозга. Генная терапия рака. Рецептор-опосредованный перенос. Тканеспсцифическая экспрессия терапевтических генов. Оптимальный терапевтический вектор. Вопросы для повторения и обсуждения (431) Огыаеление 517 Глава 14.
ГЕНОМНАЯ ИНЖЕНЕРИЯ,... ... 432 Принципы геномпого конструирования (433). Бактернофагн (434). Одноклеточные ор«пннзмы (438). Мио«окл«точные организмы (439). Вопросы для повторения и обсуждения (439). Глана 15. МОЛЕКУЛЯРНАЯ БИОТЕХНОЛОГИЯ ........,....... 440 Белковая инженерия (443). Модификация белков. Конструирование гибридных белков. Искусственные бслки. Вакцинныс препараты.
Микроорганизмы (448). Растения (449). 2Кивотиые (452). Человек (454). Диагностика наслсдс«венных заболеваний. 1сномная дак«илоскопия. ДИК как медицинский продукт. Другие проблемы (460). Вопросы щ«я повторения и обсуждения (462). . 463 ПРИЛОЖЕНИЕ Гель-э««ектрофорез (463). Блотии«нуклеиновых кислот (465). Полимеразная цепная реакция (467). Компьютерные методы (470). Анализ структуры генома.
Анализ структуры генов и белков. Дизайн гибридизационных зондов. Меры безопасности (473). СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.. СОКРАЩЕНИЯ, .. 493 СЛОВАРЬ ТЕРМИНОВ. ПРЕДМЕТНЫЙ УКАЗАТЕЛЬ... 502 520 Салвеая С(вар!ее 8 ВВчА МА!вс!РНЬАТ!ОВЧ 240 Ргерага6оп оГ В(ЧА Ггадпвепвв Гог с1оп!ид (241). Г)да!юп оГ В(в(А Ьадвввяв!ь (242) 0вгссс !вдабоп. Гпхуша6с шосЬйса6оп оГ ВЛс 0)9А спсЬ 1/ье оГ !ввв!ссгв. Ыьс о!'ас1арвсгк.
А шсрдод оГ соппссвогя. Вупрдеяь оГ оддопис1ео6деь апд денек (254). Я!е-диев(ед пви!адеввпв)ь (257). яд!с-крссвдс шивадсввсьвь. Бсдпвспв-крссвдс впивадепсвпс Рогшаввовв оГс)е!с!юпк. ()иеьдопь Гог геиев апд д1веиьв!оп (267). С)варвег 9. тне А1чАьчд!д Ое Оевчед Авчвв бе!умед......... 268 Рго(депвк оГ сгеабоп оГ а депопве 1!Ьгагу (269). 14ипвЬег оГ с(опсз ш Ьапд Чссвогк Гог с!оп!пд. Рво!авюп апд Ггадпвспвабоп оГ 0)(А. С(опнщ. Ргсрашсюп апс1 ьвогадс оГ а с!опс соИссвюп.