90993 (679615), страница 6

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 6)

Рисунок 3- Влияние введения гесперидина на образование аддуктов NO в организме здоровых животных

В результате инъекции CCl₄ в печени наблюдался значительный рост интенсивности генерации радикалов NO, регистрируемой методом ЭПР с использованием Fe3⁺ - ДЭТК₂ в качестве ловушки NO, вероятнее всего, вследствие активации iNOS. Усиление экспрессии iNOS под действием СС1₄, возможно, связано с тем, что тетрахлорметан способен индуцировать ПОЛ и связанную с ним продукцию супероксидного анион-радикала (О₂ ^-), который является активатором синтеза NO индуцибельной NO-синтетазной системой [Коваленко О.А. и др., 1996, Реутов Н.П., 2000, Данилович Ю.В., 2001,Okamoto T., 2000]. Повышение содержания в печени NO под действием СС1₄ может вносить дополнительный вклад в развитие окислительного стресса и в проявление гепатотоксического действия СС1₄, поскольку NO может функционировать и как ингибитор токсического действия О₂ ^- , и как источник образования более опасных NOO. радикалов [M. E. de Vera, 1995].

Предварительное введение флавоноидов кверцетина и гесперидина перед инъекцией СС1₄ значительно снизило амплитуды 3-х компонентов сигнала аддукта NO-Fe²⁺-ДЭТК₂ в образцах печени.

Примечания 1 Интактные животные; 2 Введение CCl₄; 3 Кверцетин+CCl₄; 4 Гесперидин+CCl₄

Рисунок 4- Спектры ЭПР образцов печени крыс из разных экспериментальных групп при температуре жидкого азота

У животных, которым вводили такие флавоноидные соединения, как диосмин и флавицин на фоне стимуляции продукции оксида азота СС1₄, выявить их влияние на процесс образования NO в печени крыс не удалось. В ЭПР спектрах образцов печени этих животных доминировал интенсивный синглентный сигнал, не связанный с образованием парамагнитных аддуктов NO-Fe²⁺-ДЭТК₂. Снижение содержания NO в организме животных, которым вводили флавицин и диосмин, удалось установить при использовании в качестве ловушки Fe³⁺-МГД₂ по подавлению соответствующих компонентов сигнала аддукта NO-Fe²⁺-МГД₂ в спектрах ЭПР мочи животных, получавших на фоне CCl₄ флавицин и диосмин, по сравнению с контрольными животными (введение только CCl₄).

Подавление продукции NO флавоноидными соединениями, скорее всего, связано с их антиоксидантной активностью и способностью тормозить образование свободных радикалов. Кроме того, показано, что флавоноидные соединения уменьшают экспрессию iNOS в макрофагах, индуцированную липополисахаридами Chen Y. et al., 2000, Cheon B. S. et al., 2000, Chi Y. et al., 2001 через торможение связывания фактора транскрипции NF-B, который контролирует индукцию экспрессии генов iNOS.

Таким образом, эндотелий протективное действие исследуемых флавоноидов, улучшение гемореологических свойств крови, повышение продукции NO сосудистым эндотелием и увеличение печеночного кровотока, а также снижение гиперпродукции NO в печени индуцибельной NO-синтазой могут быть дополнительными факторами защиты печени от повреждения.

5. Изучение гепатозащитного действия СЭ из V. abbreviate (truncatula) при хронической экспериментальной патологии печени

Поскольку в клинической практике препараты чаще используются с лечебной целью на фоне уже сформировавшейся патологии, необходимо продемонстрировать терапевтическую эффективность нового средства, а также важно оценить его влияние на пролиферацию соединительной ткани, наблюдающуюся при хронических заболеваниях печени.

Лечебное действие СЭ при хронической алкоголизации в дозе 300 мг/кг в сравнении с карсилом в дозе 100 мг/кг изучали через 7, 14 и 21 день их применения после 60-дневного введения 40% этанола и затем совместно с ним.

Было установлено, что в результате 60-дневного введения алкоголя наблюдалось падение эффективности системы АОЗ и нарушение про-/антиоксидантного равновесия с преобладанием прооксидантной составляющей, т.е. развитие окислительного стресса. При этом отмечался рост содержания ТБК-активных продуктов в сыворотке крови на 135%, в печени на 175% и повышение количества ДК в печени на 332%. Одновременно регистрировалось снижение в печени активности основных антиоксидантных ферментов: СОД - на 55%, каталазы - на 45%, ГП - на 47%, ГР - на 41% и Г-S-ТР - на 48%, а также Г-6-ФДГ - на 88%, участвующей в обеспечении глутатионредуктазной реакции восстановительными эквивалентами. Кроме этого, отмечалось усиление анаэробиоза (повышалось соотношение лактат/пируват на 100%) и падение содержания АТФ (-52%), т.е. развивался энергодефицит, что, как известно, способствует дополнительной стимуляции свободно-радикального окисления и может вызвать необратимые изменения и гибель клетки.

У крыс после 60-дневной алкоголизации регистрировалось достоверное повышение в сыворотке крови активности АлАт (+134%) и ЩФ (+72%), содержания общего билирубина (+53%), показателя ТП - на 104%, увеличивалось содержание ТРГ в сыворотке крови (+132%) и в печени (+70%), снижалась активность ХЭ в сыворотке крови на 48%. Эти изменения свидетельствовали о развитии цитолиза и холестаза гепатоцитов, жировой дистрофии, снижении белково-синтетической функции печени, развитии воспаления в этом органе и активации мезенхимы. Такие показатели, как содержание ГАГ в сыворотке крови и ОП в печени, увеличивались на 15% и 35% соответственно, но достоверных отличий от нормы выявлено не было.

При дальнейшем приеме алкоголя выявлена активация адаптационно-приспособительных механизмов, направленных на защиту против повреждающего фактора (рис.5). Это проявилось, прежде всего, в том, что повышались активности ГП и Г-S-ТР, снижалось содержание GSH в печени и увеличивались активности Г-6-ФД и ГР.

При лечебном применении СЭ наблюдалась более выраженная активация ГП и Г-S-ТР. В то же время у животных, леченных карсилом, отсутствовала активация Г-S-ТР и наблюдалась менее выраженная активация ГП. В результате уже через 14 дней лечения сухим экстрактом наблюдалась полная нормализация содержания продуктов ПОЛ, в то время, как при лечении карсилом нормализация их содержания происходила только к окончанию срока лечения.

У крыс, получавших только этанол, хотя и регистрировались изменения, направленные на восстановление ПОЛ, но все же содержание перекисных продуктов оставалось выше нормы, т.е. несмотря на развитие защитной реакции у этих животных, ее оказалось недостаточно для полного преодоления окислительного стресса.

У крыс, леченных СЭ, наблюдалось более выраженное снижение коэффициента окислительного стресса (1,73), чем у животных, леченных карсилом (7,27), что свидетельствовало о более полном восстановлении про-антиоксидантного равновесия у этих животных.

60 +7 4 +21 ^ ^ ^ ^ * * * * * * * * * А	60 +7 +14 +21 ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ * * * * * * Б
В ^ * * ^ ^ ^ ^ ^ 6 Г ^ * ^ * ^ * ^ * # # # # 60 +7 +14 +21 0 +7 +14 +21
Д * * ^ * * * ^ * * * ^ Е ^ 60 +7 +14 +21 60 +7 +14 +21
З Ж ^ * ^ * ^ * ^ * * ^ * ^ * ^ * ^ * ^ ^ * * ^ * 60 +7 +14 +21 60 +7 +14 +21
- контроль экстракт карсил - на оси ординат - уровень интактных животных	* - достоверно по отношению к исходному контролю; ^ - достоверно по отношению к интактным животным; # - достоверно по отношению к контролю 1

Рисунок 5-Влияние лечебного применения СЭ на НАДФН-GSH-зависимую систему печени крыс при хронической алкоголизации

На гистоморфологической картине печени контрольных животных выявлялись определенные патологические изменения, наиболее выраженные на 7-ой и 14-ый день дополнительного поения, но на 21 день эти изменения оказывались минимальными. Наличие восстановительных процессов нашло отражение и в изменении биохимических показателей состояния печени (снижение активности АлАт, некоторое снижение содержания ТРГ), но большинство показателей все же оставалось достоверно более высоким, чем в норме и, кроме того, нарастали явления фиброгенеза - увеличивалось содержание в печени ОП (+48%) и в сыворотке крови - ГАГ (+61%.

В отношении восстановления биохимических показателей лечебное действие СЭ оказалось более эффективным, чем карсила. При применении СЭ тормозилось образование элементов соединительной ткани: содержание ОП во все сроки лечения достоверно не отличалось от нормы, а содержание ГАГ в крови достоверно снижалось на 26% по сравнению с соответствующим контролем. Уменьшались и патогистологические изменения в печени: отмечалось уменьшение клеточной инфильтрации, отсутствовало фиброзирование портальных трактов, которое выявлялось в контроле на 14-ые сутки дополнительного введения этанола, а также признаки дистрофических изменений и сохранялось лишь умеренное расширение портальных вен и синусоидов.

Характеристики

Список файлов реферата