Диссертация (1151316), страница 29
Текст из файла (страница 29)
Уровень содержания ГФКБ в цитоскелетных181фракциях белков головного мозга рыб контрольных и экспериментальныхОтносительное содержание ГФКБ, %групп представлен на рис. 2.64.250****200****150100500Ксолн. окунь карасьбычокплотваРис. 2.64 Относительное содержание ГФКБ в головном мозге взрослыхполовозрелых особей солнечного окуня, карася, бычка-песочника и плотвы обыкновеннойпри хроническом воздействии алюминия по сравнению с контрольными группами рыб(К); ** – P<0,01 – достоверность разницы в сравнении с контролемУстановлено, что хроническое действие ионов алюминия индуцировалодостоверное (P<0,01) увеличение содержания ГФКБ в головном мозгевзрослых половозрелых особей экспериментальных групп карася, бычкапесочника, солнечного окуня и плотвы обыкновенной по сравнению сконтролем в среднем на 75%, 83%, 85% и 112% соответственно.ВозрастаниедеградированныхэкспрессииполипептидныхГФКБсопровождаетсяфрагментовэтогопоявлениембелка,уровеньсодержания и дифференциация по молекулярной массе которых былиустановлены с помощью иммуноблотинга.
Наиболее характерные результатыиммуноблотинга цитоскелетных фракций белков головного мозга особейконтрольных и экспериментальных групп рыб представлены на рис. 2.65.Значительное возрастание количества деградированных полипептидов ГФКБ182отмечено во всех экспериментальных группах относительно групп рыб техже видов, принятых в качестве контроля.Рис. 2.65 Иммуноблотинг цитоскелетных фракций белков головного мозга особейсолнечного окуня, карася, бычка-песочника, плотвы обыкновенной, обитающих вусловиях хронического воздействия алюминия (Al); К – контрольные группы рыбУстановлено,чтосодержаниерыбвусловияхповышеннойконцентрации ионов Al3+ (10 мг/л) вызывает значительное увеличениедеградированных фрагментов ГФКБ в диапазоне молекулярных масс 40–49кДа в головном мозге особей.
Сравнительный анализ водорастворимой ицитоскелетной фракций ГФКБ экспериментальной и контрольной групппоказал, что нерастворимые субъединицы этого белка, входящие в составцитоскелетных структур, подвергаются протеолитической деградации вбольшей степени.Таким образом, ионы Al3+ индуцируют в нервной ткани разного возрастарыб всех исследуемых видов не только характерный реактивный ответастроцитов на метаболические нарушения, но и активируют деградациюмолекулярных компонентов цитоскелета.2.3.2.4 Влияние повышенной концентрации ионов металлов насодержание и полипептидный состав ГФКБ головного мозга рыб вприродной среде обитания (участки р. Самара Днепровская)Содержаниеионовметалловвводоемахбассейнар.Днепрпрямопропорционально росту темпов развития современных технологий, чтоприводит к неуклонному увеличению прессинга антропогенной нагрузки нареки и водохранилища Днепропетровской области [44, 46, 51].
При оценке183состояния нейроглии рыб, обитающих в реках Самара Днепровская иВорскла, в качестве объекта исследования были выбраны биотопы наиболеемассовых и распространенных в водах Днепровского бассейна видов –плотвы обыкновенной и бычка-песочника. Для проведения экспериментабыло отобрано по 35 особей взрослых половозрелых рыб, обитающих научастках реки Самара Днепровская, расположенных в непосредственнойблизости от металлургического комбината «Интерпайп НМТЗ» и в условночистом участке ихтиологического заказника реки Ворскла.Исследование реакции астроцитов нейроглии экспериментальных группрыбподтвердилозакономерности,обнаруженныеприизучениинейротоксичности ионов алюминия и свинца.
Так относительное содержаниеГФКБ, было достоверно (P<0,01) повышенным в мозге особей солнечногоокуня (в среднем на 61%) и бычка-песочника (в среднем на 83%), обитающихв загрязненной акватории относительно особей этих же видов принятых вкачестве контроля (рис. 2.66).Относительное содержание ГФКБ, %250200****150100500Ворскла СамарабычокВорсклаСамараплотваРис.
2.66 Относительное содержание ГФКБ в головном мозге взрослыхполовозрелых особей бычка-песочника и плотвы обыкновенной, обитающих взагрязненном участке р. Самара Днепровская по сравнению с биотопами рыб, из условночистых участков р. Ворскла; ** – P<0,01 – достоверность разницы в сравнении сконтролем184При проведении иммуноблотинга цитоскелетных фракций белковголовного мозга особей, обитающих в водах рек Самара Днепровская иВорскла, иммунореактивные полипептиды ГФКБ были дифференцированыпо молекулярной массе (рис. 2.67).Рис. 2.67 Иммуноблотинг цитоскелетных фракций белков головного мозга взрослыхполовозрелых особей бычка-песочника и плотвы обыкновенной, обитающих взагрязненном участке р.
Самара Днепровская (С) по сравнению с популяциями рыб, изусловно чистых участков р. Ворскла (В)Увеличение количества деградированных полипептидов ГФКБ с Mr вдиапазоне 37–48 кДа наблюдается во всех группах рыб, обитающих в водахзагрязненной металлами акватории, по сравнению с группами рыб тех жевидов из условно чистого участка ихтиологического заказника.Уровень содержания глиального фибриллярного кислого белка иколичество его деградированных фрагментов в головном мозге рыб прикомплексном воздействии ионов металлов в природных условиях указываютна развитие астроглиоза, служащего характерной ответной реакциейастроцитов нервной ткани рыб на загрязнение среды обитания.2.3.2.5 ИспользованиецитоскелетногоГФКБвкачествеиндикатора повреждений в головном мозге крыс под действиемпромышленных органических растворителейМеханизмы нейротоксичности органических соединений являютсяобъектом внимания многих исследователей [86–88].
Многие из известныхпромышленныхполлютантовобладаютспособностьюиндуцироватьокислительные повреждения клеточных структур, оказывая существенное185влияниенаактивностьметаболическихключевыхферментныхсистеммногихпроцессов [79, 88]. Выявление особенностейтакихнарушений в сочетании с изучением тканеспецифических маркеров, можетбытьнаиболеехарактеристикиважнойинформативнойадаптивногосоставляющейпотенциалаживотныхкомплекснойвусловияхинтоксикации.
Многообразие органических ксенобиотиков предопределяетпоиск общих механизмов клеточного и функционального ответа нервнойсистемынадействиеповреждающихфакторов.Вкачестветакихбиомаркеров нарушений метаболизма можно рассматривать цитоскелетныебелки нейроглии, не имеющие видоспецифичности и обнаруженные внервной ткани разных биологических видов, в том числе млекопитающих,птиц, пресмыкающихся, рыб [173, 183–187].Установлено, что при интоксикации крыс, дифференцированных повозрасту, промышленным многокомпонентным растворителем наблюдаетсяхарактерная динамика содержания общего белка в головном мозге всехисследуемых групп животных.
Обнаруженные отличия соответствуютпроцессамфизиологическойрегуляцииэкспрессиибелковвходепостнатального развития в первые месяцы жизни грызунов. Максимальноесодержание протеина в цитозольной фракции белков головного мозга крысвыявлено в коре больших полушарий особей экспериментальной группыСПР-70 (в среднем на 40% больше, чем у особей экспериментальной группыСПР-28). Содержание цитозольных протеинов в этом отделе головного мозгаживотных контрольных групп увеличивалось несколько меньшими темпами(в среднем на 38%).На фоне роста общего количества белка в коре больших полушарийголовного мозга крыс в процессе постнатального развития выявленыхарактерные различия в динамике накопления цитозольных и филаментныхбелков, ассоциированные с интоксикацией органическим растворителем. Вчастности, при сравнении общего содержания белков в цитозольной ицитоскелетной фракциях коры больших полушарий головного мозга186животных экспериментальных и контрольных групп одного возрастаобнаружена отрицательная динамика (2-5%) уровня водорастворимых белковпри положительной динамике (2-6%) количества филаментных белков(рис.
2.68).цитозольная фракция*Содержание общего белка, мг/г ткани180* **160140120100806040цитоскелетная фракция70Содержание общего белка, мг/г ткани200*60*****5040302010200К ОРСПР-28К ОРК ОРСПР-42 СПР-56К ОР0СПР-70К ОРК ОРСПР-28СПР-42 СПР-56К ОРК ОРСПР-70Рис. 2.68 Возрастные особенности содержания общего белка в цитозольных ицитоскелетных фракциях коры больших полушарий крыс при интоксикациимногокомпонентным органическим растворителем (ОР) на 28, 42, 56 и 70 суткипостнатального развития (СПР) по сравнению с контрольными группами животных (К);* – P<0,05 – достоверность разницы в сравнении с контролем СПР-28Анализируя особенности генерации белков гиппокампа на различныхэтапах постнатального развития животных в условиях химическогопрессинга, следует отметить, что уровень экспрессии цитозольных белковживотных экспериментальной группы СПР-70 по сравнению с аналогичнымипоказателями особей экспериментальной группы СПР-28 был несколькониже, чем у особей контрольных групп – в среднем 39% (P<0,05) и 42%(P<0,05) соответственно.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
