Диссертация (1151292), страница 2
Текст из файла (страница 2)
356Приложение 14 Методические рекомендации «Определение цеостностиакросомы сперматозоидов в замороженной сперме быков-производителей»358Приложение 15 Методические рекомендации «Определение индексафрагментации ДНК в замороженной сперме у животных производителей» 362Приложение 16 Методические рекомендации «Идентификация мутаци,ассоциированных с наиболее распространёнными наследственнымипатологиями крупного рогатого скота бурой швицкой порды, молекулярногенетическими методами» ..................................................................................
366Приложение 17 Методические рекомендации «Исследование замороженнооттаянной спермы быков-произвдителей. Методика определения прямолинейнойпоступательной подвижности сперматозоидов в молочной среде» .............. 368Приложение 18 Методические указания «Ветеринарно-санитарный контролькачества спермы быков-производителей. Методы микробиологического анализазамороженно-оттаянной спермы быков-производителей» ............................ 370Приложение 19 Методические рекомендации «Методика определенияпрямолинейной поступательной подвижности сперматозоидов в сперме быковпроизводителей, криоконсервированной в молочной среде» ........................ 373Приложение 20 Сертификат V конгресса Европейской ассоциацииветеринарных диагностических лабораторий (Брюссель, Бельгия) ..............
374Приложение 21 Сертификат XXII ветеринарной конференции порепродукции (Кордова, Испания) ...................................................................... 375Приложение 22 Справка о внедрнии результатов исследований в учебныйпроцесс ФГБОУ ВО МГАВМиБ-МВА им. К.И.Скрябина…………………….376Приложение 23 Справка о внедрении результатов исследований в учебныйпроцесс ФГБОУ РАМЖ……………………………………………………….3776Приложение 24 Справка о внедрении результатов исследований в учебныйпроцесс ФГБОУ ВО Казанская государственная академия ветеринарноймедицины им.
Н.Э. Баумана……………………………………………… 3787ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙАМВН2BYBLADБКDD-DMDTTDWДНКИ-1 - И-4СCDHCVMFXIDКРСММAОКОПКОп.н.ППДРНКТАЕТРГОSОСДSAA-SDMSMA-W-ФГБУ«ВГНКИ»-ЭДТА--артрогрипоз (Arthrogryposis multiplex);гаплотип 2 бурой швицкой (Нaplotype BH2;Брахиспина;дефицит лейкоцитарной адгезии;процент быстрых клеток;дупликация развития = полимелия (DevelopmentalDuplications = Polymelia);гипертрофия мускулатуры (Muscular hypertrophy);1,4-дитиотреитол;карликовость (Dwarfism);дезоксирибонуклеиновая кислота;лазерные излучатели;концентрация клеток;дефицит холестерина;комплексный порок позвоночника;дефицит фактора крови;крупный рогатый скот;маркер молекулярных масс;маннозидоз альфа (Mannosidosis α);отрицательный контрольный образец;положительный контрольный образец;пара нуклеотидов;прямолинейное поступательное движение;рибонуклеиновая кислота;трисацетатный электродный буфер;индекс племенной ценности быков-производителей;остеопетроз (Osteopetrosis);общая (средняя) скорость движения;синдром арахномиелии и артрогрипоза(Arachnomelia);спинальная демиелинизация (Spinal dysmyelination);спинальная мышечная атрофия (Spinal muscular atrophy);синдром Вивера, прогрессирующая дегенеративнаямиелоэнцефалопатия (Weaver syndrome);ФГБУ «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств дляживотных и кормов»;натриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты.8ВВЕДЕНИЕАктуальность темы исследования.
В соответствии с современными тенденциями развития сельского хозяйства в РФ и за рубежом, выполняя Указ Президента РФ от 21 июля 2016 г № 350 « О мерах по реализации государственнойнаучно-технической политики в интересах развития сельского хозяйства», и реализуя положения Доктрины продовольственной безопасности Российской Федерации, утвержденной указом Президента РФ от 30 января 2010 г. № 120, требуется инновационный подход к такому традиционному для нашей странынаправлению животноводства, как разведение крупного рогатого скота.Для достижения высоких показателей экономической эффективности страны, позволяющих удовлетворить возрастающий внутренний спрос на сельскохозяйственную продукцию животного происхождения, необходимы строгие мерыпо организации безопасности животноводства и пищевой продукции. При этомвозрастает значимость применения актуальных подходов к контрольнонадзорной деятельности как самих хозяйствующих субъектов РФ, так и официальных органов власти (Прокофьева С.Е., Богатырев Е.Д., Панина О.В., ЕреминС.Г., 2017).Всемирная организация здравоохранения животных (МЭБ), а также смежные международные организации (Комиссия «Кодекс Алиментариус», ВТО) рекомендуют применять в области защиты животных так называемый рискориентированный подход, основанный на анализе рисков.По данным Хишова А.С., Мельничука Е.В.
и др. (2016), оценка рисковвключает последовательную идентификацию потенциальных опасностей, прогнозирование последствий их реализации в случае неблагоприятного развитиясобытий и научное обоснование принимаемых ветеринарно-санитарных мер.Вспомогательными инструментами для оценки рисков являются эпизоотическийанализ, ранжирование рисков, сравнительный анализ эпизоотологических и эпидемиологических данных и т.д.В настоящее время наблюдается увеличение импорта на территорию Рос-9сийской Федерации обычной и сексированной спермы быков-производителей(Карцев Б.В., Мусинова Н.Н., 2016).Контроль качества генетического материала до 90-х годов ХХ века позволил предупредить ввоз и распространение возбудителей инфекционных болезней, передающихся половым путем при искусственном осеменении животных, ив полном объеме осуществлять ветеринарно-санитарный контроль спермопродукции, ввозимой на территорию нашей страны (Грязнева Т.Н.
Борунова С.М.,2016 и др.).Однако, в 90-е годы были открыты все границы и в Россию хлынул неконтролируемый поток разного рода биологической продукции, в том числе генетического материала, в условиях отсутствия научно-обоснованной селекционнойпрограммы и прогноза конечного результата. Оценку репродуктивного потенциала крупного рогатого скота при импорте как племенных животных, так и спермопродукции практически не проводились, так как отсутствовали эффективныелабораторные методы и оборудование, необходимые для контроля качества свежеполученной и криоконсервированной спермы.Постановлением Правительства РФ от 13.11.2010 г.
№ 906 «О внесении изменений в Постановление Правительства РФ от 01.12.2009 № 982 «Об утверждении единого перечня продукции, подлежащей обязательной сертификации, иединого перечня продукции, подтверждение соответствия которой осуществляется в форме принятия декларации о соответствии», сперма сельскохозяйственных животных была исключена из перечня продукции, подлежащей обязательному подтверждению соответствия. В результате этого, в настоящее время ветеринарный рынок насыщен генетической продукцией сомнительного качества,которая подвергается формально только «бумажному» контролю.Анализ и оценка отечественными учеными (Дунин И.М., Новиков А.А.,2003; Зиновьева Н.А., Моисейкина Л.Г., Кленовицкий П.М., Гладырь Е.А., Генджиева О.Б., 2014; Чинаров В.И.
Стрекозов Н.И., 2017, и др.) сложившейся ситуации в области воспроизводства и искусственного осеменения крупного рогатого скота с целью селекционирования высокопродуктивных животных, на фоне10отсутствия генетического контроля, позволили констатировать факт наличия вгенетическом материале, ввозимом на территорию нашей страны от племенныхбыков - лидеров коммерчески значимых пород, различных генетических аберраций, носителями которых являются представители голштинской, абердинангусской, бурой швицкой и др.
пород.Кроме того, российскими учеными установлено, что сексированная сперма,в последние годы в большом количестве поступающая в РФ из-за рубежа, можетсодержать аномальные формы спермиев и мутированные гены, так как в процессе разделения по полу проходит стадии жесткого физического и химическоговоздействия, что негативно воздействует на качество генетического материала иможет привести к развитию наследственных болезней у животных (ГуськоваС.В., Турбина И.С., Ескин Г.В., Комбарова Н.А., 2014; Зиновьева Н.А., Костюнина О.В., Волкова В.В., 2016).По мнению многих отечественных специалистов (Баранов М.Л., 2015; Карцев Б.В., Мусинова Н.Н., 2016; Богатырев Е.Д., Прокофьева С.Е., Панина О.В.,Еремина С.Г., 2017), в целях реализации Доктрины продовольственной безопасности Российской Федерации назрела необходимость разработки и внедрения вэкономику страны новых подходов хозяйственной и контрольно-надзорной деятельности, а именно создание и применение современных норм, стандартов и алгоритмов работы с генетическим материалом крупного рогатого скота.В связи с вышеизложенным, перед ветеринарными специалистами страныстоит острая и актуальная проблема - разработка ветеринарно-санитарных требований по контролю качества спермодоз продуктивных животных, поступающих на территорию России из-за рубежа, которые будут содержать исчерпывающую информацию о спермопродукции по результатам проведения детальногомикробиологического, биологического и генетического мониторинга, отвечающим реалиям сегодняшнего дня.Степень разработанности темы.
Основу ветеринарного контроля при искусственном осеменении продуктивных животных, который включает многоплановые функционально значимые аспекты исследований как племенных жи-11вотных, так и генетического материала, составляют биологические, биохимические, микробиологические, бактериологические и вирусологические методы.При наличии большого количества научных работ, проведенных в вышеперечисленных направлениях (Абилов М.Ю., Комбарова Н.А., Гуськова С.В.,Грязнева Т.Н., Борунова С.М., 2000-2018), недостаточно достоверной информации в области доказательной базы безопасности генетического материала крупного рогатого скота, поступающего в Россию из-за рубежа.На протяжении нескольких десятилетий в РФ создавалась иллюзия ветеринарного благополучия животных и молодняка в отечественном скотоводстве, аданные о наличие опасных заболеваний животных, передающихся половым путем и при искусственном осеменении (инфекционный ринотрахеит, вируснаядиарея, кампилобактериоз, микоплазмоз и др.), в открытой печати отсутствовали.Существенный вклад в изучении проблемы ветеринарно-санитарногокотроля генетического материала и болезней инфекциооного характера, передающихся половым путем, внесли такие ученые как Балашов Н.Г., Родина В.Н.(1990) и др.В последние 15 лет проблеме разработки биологических и биохимическихметодов для определения качества генетического материала уделяли вниманиеБрагина Е.Е., 2017; Зиновьеа Н.А., Кленовицкий П.М., Иолчиев Б.С., 2007 и др.Их работы содержат фундаментальные основы, которые всесторонне освещают вопросы, связанные с морфофункциональными особенностями половыхклеток, содержанием в них микроорганизмов – контаминантов и влиянием их накачество спермы, оплодотворяемость, возникновение болезней и абортов у животных, осеменённых импортной спермой.Данные исследования в значительной мере иницировали задачу изученияморфофункциональных характеристик сперматозоидов на основе примененияэлектронной микроскопии.В работах российских ученых отражены функциональные механизмы органоидов половой клетки, но не рассматриваются вопросы идентификации патоло-12гий, приводящих к фертильности самцов-производителей и снижению качествазамороженно-оттаянной спермы.Вместе с тем, полученных отечественными учеными научных результатовнедостаточно, чтобы заложить базу для разработки системы контроля комплексной оценки морфофункциональных и микробиологических показателей половыхклеток быков-производителей в целях обеспечения Государственного контроляпри ввозе на территорию Российской Федерации спермопродукции стратегического назначения, а анализ доступной литературы позволяет сделать вывод онеобходимости дальнейших исследований в данном направлении.Цель исследований: разработать систему комплексной оценки морфофункциональных и микробиологических показателей половых клеток быковпроизводителей и на этом основании усовершенствовать методы контроля ихкачества.Для решения были поставлены следующие задачи:1.