Диссертация (1140488), страница 9
Текст из файла (страница 9)
В стадии ремиссии БА отклонения вдиапазоне 0,2-1,2 кГц отмечены у 5,0% детей, в диапазоне >1,2-5 кГц – у 22,5%детей, в диапазоне >5-12,6 кГц – у 5,0% детей. Сохранение отклонений времиссии отражает явления скрытой бронхиальной обструкции.3.2 Исследование функционального состояния цилиарного эпителия.Применение высокоскоростной цифровой видеосъемки позволило провестинепосредственную визуализацию полученных образцов цилиарного эпителия иоценить функциональное состояние ресничек.
При проведении микроскопииможно отчетливо различить клетки цилиарного эпителия, их реснички,внутриклеточные структуры (ядро с ядрышками) (Рисунок 8).53Реснитчатая каймаЯдра эпителиальныхклетокРисунок 8 – Цилиарный эпителий с ресничками. Вид в профиль. Световаямикроскопия, х1000Исследование образцов эпителия с разных ракурсов (в профиль, вид сверху)позволяет провести более детальную оценку состояния эпителия (Рисунок 9,Рисунок 10).РеснитчатаякаймаКлеткицилиарногоэпителияРисунок 9 – Цилиарный эпителий с ресничками.
Вид в профиль. Световаямикроскопия, х100054РеснитчатаякаймаРисунок 10 – Цилиарный эпителий с ресничками. Вид в профиль. Световаямикроскопия, х1000Было отмечено, что существует две основные формы клеток цилиарногоэпителия: вытянутые продолговатые клетки и округлые клетки. Примечательно,что округлые клетки обнаруживали только в слущенном виде, что может говоритьо том, что это форма не первичная, а вторичная, в результате отрыва клетки отбазальной мембраны (Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13).КлеткицилиарногоэпителияРисунок 11 – Реснитчатые клетки вытянутой формы. Световаямикроскопия, х100055ресничкиКлеткацилиарногоэпителияРисунок 12 – Реснитчатая клетка округлой формы.
Световая микроскопия,х1000ресничкиКлеткацилиарногоэпителияРисунок 13 – Клетка цилиарного эпителия округлой формы. Световаямикроскопия, х100056Контрольная группа.При оценке образцов цилиарного эпителия, полученных у детей изконтрольной группы, было отмечено достаточно активное движение ресничек вбольшинстве полей зрения. Следует отметить, что в норме реснички непокрывают поверхность цилиарного эпителия сплошным «ковром». Имеютсяучастки эпителия, не покрытые ресничками (Рисунок 14).УчасткиэпителиябезресничекРисунок 14 – Пласт эпителия с подвижными ресничками (клетки сподвижными ресничками выделены кружками).
Вид сверху. Кончики ресничеквидны в виде темных точек. Более светлые области без темных точек – участкиэпителия, не покрытые ресничками. Световая микроскопия, х1000Биение ресничек в норме носит ундулирующий характер, что отражаетприсущий ресничкам паттерн движения – быстрый эффективный удар имедленное возвратное движение (Рисунок 15).5711236553264477Рисунок 15 – Схема движения ресничек при ундулирующем движении. Под каждым кадром приведено его схематическоеизображение.
Стрелки показывают направление движения ресничек. Кадры 1-4 – медленное возвратное движение, кадры 5-7 – быстрый удар58Были установлены показатели функционального состояния цилиарногоэпителия верхних дыхательных путей у детей без патологии респираторнойсистемы и ЛОР-органов (контрольная группа). Частота биения ресничек в соскобесо средней носовой раковины составила 5,70 [4,60-6,86] Гц, с нижней носовойраковины - 5,50[4,77 -6,50] Гц. Частота биения ресничек в соскобах со средней и снижней носовых раковин существенно на отличались (р=0,37). Количество клетокс подвижными ресничками в пласте эпителия в соскобах со средней носовойраковины составило 60,0 [50,0 – 70,0]%, и было достоверно выше, чем в соскобахс нижней носовой раковины (30,0 [30,0 – 40,0]%, р<0,01, Рисунок 16).Синхронность движения ресничек и нормальный паттерн биения ресничек былиотмечены у 93,8% детей. Время сахаринового теста составило 7,0 [5,3 – 10,1] мин.Относительное количество клеток сподвижными ресничками в пласте эпителия90%р<0,0180%70%60%50%40%30%20%10%ННРСНРРисунок 16 – Относительное количество клеток с подвижными ресничкамив пласте эпителия в соскобах с нижней носовой раковины (ННР) и среднейносовой раковины (СНР) в контрольной группе59Дети с бронхиальной астмой и аллергическим ринитом.При микроскопии образцов цилиарного эпителия у детей с БА и АР частоотмечались поля зрения без подвижных ресничек или сниженное количествоклеток с подвижными ресничками.
Нередко в препарате удавалось обнаружитьлишь 1-3 клетки с подвижными ресничками (Рисунок 17, Рисунок 18).Клетка сподвижнымиресничкамиРисунок 17 – Одна клетка в пласте эпителия с подвижными ресничками.Кончики ресничек видны в виде темных точек. Вид сверху. Световаямикроскопия, х400Участки эпителияс неподвижнымиресничкамиКлетки сподвижнымиресничкамиУчастки эпителия безресничекРисунок 18 – Цилиарный эпителий. Участки эпителия с подвижнымиресничками и с неподвижными ресничками (кончики ресничек видны в виде60темных точек); участки эпителия, не покрытые ресничками (более светлыеобласти без темных точек).
Вид сверху. Световая микроскопия, х1000У детей с БА и АР отмечали большое количество слущенных клеток(Рисунок 19, Рисунок 20).Ядро клеткиресничкиРисунок 19 – Слущенные клетки с неподвижными ресничками. Световаямикроскопия, х1000Ядроклетки сядрышкомКлеткицилиарногоэпителия безресничекресничкиРисунок 20 – Слущенные клетки с неподвижными ресничками. Световаямикроскопия, х40061Обращало на себя внимание, что реснички на слущенных клетках часторасполагались хаотично (Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23).ресничкиЯдро клеткис ядрышкомРисунок 21 – Клетка цилиарного эпителия с неподвижными ресничками.Хаотичное расположение ресничек. Световая микроскопия, х1000ресничкиРисунок 22 – Клетки цилиарного эпителия с неподвижными ресничками.Хаотичное расположение ресничек в правой части снимка. Световаямикроскопия, х100062ресничкиРисунок 23 – Клетка цилиарного эпителия с поврежденными ипоредевшими ресничками.
Световая микроскопия, х1000Также иногда в препаратах обнаруживали большое количество отдельнорасположенных ресничек, не связанных с поверхностью клетки (Рисунок 24,Рисунок 25).СлущенныересничкиРеснитчатаякаймаэпителияРисунок 24 – Слущенные реснички располагаются хаотично рядом скромкой цилиарного эпителия. Световая микроскопия, х100063СлущенныересничкиРисунок 25 – Слущенные реснички эпителия. Световая микроскопия, х1000У детей с БА и АР характер движения ресничек часто был нарушен –отмечалось пульсирующее, спастическое или хаотичное движение (Рисунок 26).641122334545Рисунок 26 – Схема движения ресничек при пульсирующем движении.
Под каждым кадром приведено егосхематическое изображение. Стрелками показано направление движения ресничек65У детей с БА в сочетании с АР частота биения ресничек в соскобах сосредней носовой раковины составила 4,88 [4,15 – 6,10] Гц, с нижней носовойраковины - 4,72 [4,12 – 5,76] Гц. Относительное количество клеток с подвижнымиресничками в пласте эпителия в соскобах со средней носовой раковины составило20,0 [9,0 – 40,0]%, в соскобах с нижней носовой раковины 10,0 [5,0 – 20,0]%.Синхронное движение ресничек в соскобе со средней носовой раковины былосохранено лишь у 10,9% детей, в соскобе с нижней носовой раковины – у 11,2%детей.
Время сахаринового теста составило 9,0[6,1-14,0] мин.У детей с БА без сопутствующего АР (и без другой патологии полости носа)частота биения ресничек в соскобе со средней носовой раковины составила 4,77[4,19- 5,15] Гц, с нижней носовой раковины - 5,11[3,92-5,89] Гц. Относительноеколичество клеток с подвижными ресничками в пласте эпителия в соскобе сосредней носовой раковины составило 20,0[10,0-20,0]%, в соскобе с нижнейносовой раковины – 13,0[5,0-19,0]%.
Синхронность движения ресничек инормальный паттерн биения в соскобе со СНР были сохранены у 10,5% детей, всоскобе с нижней носовой раковины - у 11,8% детей. Время сахаринового тестасоставило 9,0[6,0-13,0] мин. Данные представлены в таблице 5.66Таблица 5 - Показатели функционального состояния цилиарного эпителия вконтрольной группе и у детей с БА и АРносоваяNЧБР, Гцносовая Средняяраковина% клеток с подвижнымиресничкамив пласте эпителия% пациентов, у которыхсохранена синхронностьдвижения ресничекЧБР, ГцНижняяраковина% клеток с подвижнымиресничкамив пласте эпителия% пациентов, у которыхсохранена синхронностьдвижения ресничекСахариновый тест, мин1контрольБА + АРБА1775205,70 [4,60-6,86]14,88 [4,15-6,10]4,77 [4,19-5,15]60,0 [50,0-70,0]20,0 [9,0-40,0]*20,0 [10,0-20,0]*93,810,9*10,5*5,50 [4,77-6,50]4,72 [4,12-5,76]5,11 [3,92-5,89]30,0 [30,0-40,0]10,0 [5,0-20,0]*13,0 [5,0-19,0]*93,811,2*11,8*7,0 [5,3-10,1]9,0 [6,1-14,0]9,0 [6,0-13,0]везде – медиана [интерквартильный размах]*p<0,01 при сравнении с контрольной группойВ группах БА и БА+АР не было выявлено существенных отличий ЧБР отконтрольной группы.
Относительное количество подвижных клеток в группахБА и БА+АР было существенно ниже, чем в норме (р<0,01, Рисунок 27). При этомне было выявлено существенных различий показателей между группами БА иБА+АР.67Относительное количество клеток сподвижными ресничками в пласте эпителияр<0,0190%р<0,0180%70%60%50%40%Выбросы30%20%10%0%контрольБА+АРБАСНРконтрольБА+АРБАННРРисунок 27 – Относительное количество клеток с подвижными ресничкамив пласте эпителия в соскобах со средней носовой раковины (СНР) и с нижнейносовой раковины (ННР) у детей с БА, с БА в сочетании с АР и в группе контроляВгруппахБА+АРиБАдостоверночащевыявлялинарушениесинхронности движения ресничек по сравнению с контрольной группой (p<0,01)(Рисунок 28).68****Рисунок 28 – Относительное количество пациентов, у которых выявленосинхронное движение ресничек и нормальный паттерн биения.















