Диссертация (1140488), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Уточняли анамнезжизни, анамнез заболевания, аллергологический анамнез, семейный анамнез.Отмечалидлительностьзаболевания,провоцирующиефакторы,предшествующую терапию и ее эффект.Общий анализ крови проводился в Педиатрической экспресс-лабораторииУДКБ ФГАОУ ВО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова Минздрава России(Сеченовский Университет) (заведующая лабораторией – Н.Л. Кан).Определение уровней общего и специфических IgE проводили на базеМежклинической иммунологической лаборатории ФГАОУ ВО Первый МГМУ35имениИ.М.СеченоваМинздраваРоссии(СеченовскийУниверситет)(заведующая лабораторией – Н.Г.
Дашкова).Балльная оценка симптомов бронхиальной астмы проводилась сиспользованием Теста по контролю над астмой АСТтм (для детей 12 лет истарше) и Теста по контролю над астмой у детей С-АСТтм (для детей младше 12лет). В тесте по контролю над астмой каждый ответ оценивался по шкале от 1 до 5баллов. Общая оценка теста по сумме всех набранных баллов менее 20 означаетотсутствие контроля над астмой, от 20 до 24 – частичный контроль, 25 – полныйконтроль. Тест по контролю над астмой у детей состоит из двух частей. В первойчасти на вопросы отвечает ребенок, ответы оцениваются по шкале от 0 до 3баллов.
Вопросы сформулированы понятно для детей и содержат визуальныйобраз, помогающий определиться с ответом. Вторая часть содержит вопросы дляродителей и оценивается по шкале от 0 до 5. Общая сумма баллов 19 и менееможет говорить об отсутствии контроля над заболеванием. Общая сумма баллов20 и более может говорить о том, что, возможно, астму удается эффективноконтролировать.36Тест по контролю над астмой (АСТтм) (© 2002, QualityMetric Inc.) Как часто за последние 4 недели астма мешала тебе выполнять обычныйобъем работы в школе или дома?1Все время2Оченьчасто34ИногдаРедко5Никогда Как часто за последние 4 недели у тебя было затрудненное дыхание?1Чаще,чем1 раз в день21 раз вдень3От 3 до 6раз в неделю41 или 2раза в неделю5Ниразу Как часто за последние 4 недели ты просыпался ночью из-за астмы(свистящего дыхания, кашля, затрудненного дыхания, чувства стесненияили боли в груди)?14 ночи внеделю иличаще22-3 ночив неделю31 раз внеделю41 или 2раза5Ниразу Как часто за последние 4 недели ты использовалбыстродействующий ингалятор (например, Вентолин, Беродуал, Сальбутамол,Саламол, Беротек, Атровент, Сальбен, Астмопент) или небулайзер слекарством (например, Беротек, Беродуал, Вентолин небулы)?13 раза вдень или чаще21 или 2раза в день32 или 3раза в неделю41 раз внеделю или реже5Ниразу Как ты считаешь, насколько тебе удавалось контролировать астмуза последние 4 недели?1Совсемне удавалоськонтролировать2Плохоудавалоськонтролировать3Внекоторойстепениудавалоськонтролировать4Хорошоудавалоськонтролировать5Полностью удавалоськонтролировать37Тест по контролю над астмой у детей (© 2006, GlaxoSmithKline)1) Как у тебя дела с астмой сегодня?0Очень плохо12Плохо3ХорошоОченьхорошо2) Как сильно астма мешает тебе бегать, заниматься физкультурой илииграть вспортивные игры?0Оченьмешает,я совсем не могуделать то, чтомне хочется.12Мешает, и этоменя расстраивает.3Немножкомешает, но это ничего.Не мешает.3) Кашляешь ли ты из-за астмы?0Да, все время.12Да, часто.3Да, иногда.Нет, никогда.4) Просыпаешься ли ты по ночам из-за астмы?0Да, все время.1Да, часто.2Да, иногда.3Нет, никогда.385.
Как часто за последние 4 недели Ваш ребенок испытывал какиелибо симптомы астмы в дневное время?54321Ни разу13 дня410 дней11-18 дней19-24 дней0Каждыйдень6. Как часто за последние 4 недели у Вашего ребенка было свистящеедыхание из-за астмы в дневное время?543210КН141119аждыйи разу3 дня10 дней-18 дней -24 днейдень7. Как часто за последние 4 недели Ваш ребенок просыпался по ночам из-заастмы?5Ниразу432113 дня410 дней11-18 дней19-24 дней0КаждыйденьБалльная оценка симптомов аллергического ринита проводилась спомощью теста, в котором ребенку предлагали оценить, насколько сильно у неговыражены признаки аллергического ринита. Оценивались такие симптомы, какжидкие выделения из носа, заложенность носа, чихание, зуд в полости носа.Каждый симптом оценивался в зависимости от степени выраженности от 0 баллов(симптомы отсутствуют) до 3 баллов (симптомы выражены максимально).Максимально возможная сумма баллов – 12. Описание выраженности симптомовбыло сформулировано понятно для ребенка, что облегчало самостоятельноезаполнение анкет пациентами.39012Нет,у меняэтого нетЕсть,но это меняпочти небеспокоити не мешаетЕсть,это мнемешает,но ясправляюсь3Есть,это мне оченьмешает,я не могуспокойно спать ивести свойобычный образжизниЖидкие выделения из носаЗаложенность носаЧиханиеЧешется нос0 баллов - симптомы отсутствуют1 балл - симптомы четко определяются, причиняют минимальное беспокойство и легкопереносятся2 балла - симптомы четко определяются, причиняют беспокойство, но переносятся безтруда3 балла - симптомы труднопереносимые, вызывают нарушения повседневнойактивности и/или снаРиноцитограмму проводили по общепринятой методике.
За 24 ч доисследования отменяли назальные препараты. Мазок из полости носа брали сухимстерильным ватным зондом. Зонд вводили легким движением по наружной стенкеноса на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем слегка опускали его книзу,делали вращательное движение и вынимали вдоль наружной стенки носа.Полученный секрет наносили на предметное стекло тонким слоем, высушивалина воздухе, окрашивали по Май-Грюнвальду (эозин-метиленовый синий ДиахимГема-Т, НПФ «Абрис+»).
В заключении описывали общую цитологическуюкартину, процентное содержание эозинофилов, нейтрофильных лейкоцитов,различных типов эпителиальных клеток (плоский эпителий, цилиарный эпителий,цилиндрический эпителий без ресничек, бокаловидные клетки).Исследование двигательной активности ресничек цилиарного эпителияпроводилосьметодомцифровойвысокоскоростнойвидеомикроскопииспомощью видеокомплекса, состоящего из микроскопа светового лабораторногоуниверсального«Биомед-6»(ОООБиомед-сервис,РФ),цифровойвысокоскоростной видеокамеры «BMR-0440HC-UF» с возможностью съемки соскоростью до 200 кадров в секунду (ООО НПК ЕС-Экспертс, РФ), персонального40компьютера с программным обеспечением «MMC MultiMeter» (MMCSoft, РФ)(Рисунок 1).Рисунок 1 – Комплекс для проведения цифровой высокоскоростнойвидеомикроскопииСоскобы эпителия слизистой оболочки полости носа выполняли с помощьюстерильной пластиковой кюретки «ASI RhinoPro ®» (Arlington Scientific Inc.,США).
Соскоб назального эпителия выполняли при передней риноскопии безприменения анестезии из 2 участков слизистой оболочки: со средней носовойраковины (СНР) и с нижней носовой раковины (ННР), отступая 1-1,5 см от краяраковины.Полученные образцы эпителия незамедлительно помещали в пробирку с0,9% раствором натрия хлорида.
Исследование нативного неокрашенногоэпителия проводили в течение первых 15-30 минут после забора материала прикомнатной температуре (22-24⁰С). С помощью стерильного шприца эпителий41аккуратноперемещалиизкюреткинапредметноестекловкаплюфизиологического раствора, накрывали покровным стеклом. Микроскопиюпроводили при увеличении х400 и х1000 (с масляной иммерсией).Видеофиксацию проводили с помощью высокоскоростной цифровойвидеокамеры и программного обеспечения «MMC MultiMeter» (MMCSoft, РФ).Данная программа была специально разработана для получения видео с цифровойкамеры микроскопа в режиме реального времени. Она является анализаторомизображений и позволяет сохранять изображения и видеофайлы, автоматическивыделять объекты анализа, проводить классификацию объектов и статистическуюобработку изображений.
Также программа совмещена с базой данных MultiMediaCatalog, использование которой предоставляет широкие возможности дляхранения, поиска, обработки и анализа изображений и видео файлов. Помимовидеофайлов и изображений в базе данных может храниться большое количестводокументов,связанныхсисследованием.Полезнымтакжеявляетсяавтоматическое формирование бланка заключения по исследованию и вывод егона печать. Интерфейс программы интуитивно понятен и удобен в использовании(Рисунок 2).ФИОпациентовФИО пациентаФИОпациентовРисунок 2 – Интерфейс программы MMC MultiMeter42Для каждого образца эпителия проводили запись 10-15 видеороликовдлительностью по 2 сек.
Для записи выбирали участки эпителия с максимальноподвижными ресничками. Запись видеороликов производили как при увеличениих400, так и при увеличении х1000.Для анализа выбирали цельные пласты эпителия. При среднем увеличении(х400) оценивали целостность пласта эпителия, относительное количество клетокс подвижными ресничками в пласте эпителия, проводили комплексную оценкупаттерна биения ресничек (синхронность биения ресничек на соседних клетках,синхронность биения ресничек в пределах одной клетки, характер движенияресничек, амплитуда биения ресничек), оценивали количество слущенных клетокс неподвижными ресничками. При увеличении х1000 также оценивалисинхронность биения ресничек, подсчитывали частоту биения ресничек.
Дляэтого при замедленном воспроизведении видеоролика определяли количествокадров, необходимое для записи 5 полных циклов биения ресничек. Далее ЧБРопределяли по формуле:ЧБР =частота кадровой съемки (кадров/сек) × 5количество кадров, необходимое для выполнения 5 циклов биения ресничекКадровая частота съемки составляла 50 кадров в секунду. Такой скоростисъемки, согласно преобразованию Фурье, достаточно для определения показателяЧБР вплоть до величины 25 Гц.
Подсчет ЧБР проводили не менее чем у 2-3 клетокв каждом из 10-15 полей зрения, выбирая клетки с максимально активнымиресничками. Таким образом, для каждого пациента выполняли до 20-30измерений ЧБР. Для удобства определения ЧБР была составлена таблицарасчетных значений (Таблица 4).Для каждого пациента высчитывали медиану ЧБР, а также определялимаксимальную ЧБР. Для оценки функционального состояния цилиарногоэпителия применяли медиану ЧБР, так как максимальные значения ЧБР не дают43представления о степени повреждения эпителия, а лишь указывают натеоретическую возможность высокой ЧБР и отсутствие генетических нарушений,связанных со снижением ЧБР.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
