Диссертация (1140408), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Вследствие этихпроцессов происходит перестройка и инволюция соединительной ткани систончением капсулы [64, 81, 117].В таком состоянии капсула может существовать неопределенно долгоевремя,хотяпринеблагоприятныхусловиях(например,травмированииимплантата, присоединении эндогенной инфекции и др.) не исключено новоеобострение воспалительного (вплоть до гнойного) процесса [91, 109].В настоящее время в любой работе по изучению нового типа эндопротезовили моделированию новой клинической ситуации с использованием имплантовобязательно присутствует гистологическое исследование местной реакции тканейна биополимер.
Имплантация в организм любого чужеродного материалавызывает воспалительно-репаративную реакцию, которая является выражениемзащитной и репаративной функций соединительной ткани. Воспалительныйпроцесс в окружающей ткани ведет к пролиферации фибробластов, которыепродуцируют коллагеновые волокна и другие компоненты экстрацеллюлярногоматрикса. Формируется соединительнотканная капсула, изолирующая инородное29тело.
Однако длительность и выраженность воспаления, а также срокиформирования соединительнотканной капсулы и ее прочность будут зависеть оттипа эндопротеза и особенностей реактивности организма.1.5 Тучные клетки и их участие в воспалительном процессеТучные клетки являются постоянным клеточным компонентом рыхлойволокнистой соединительной ткани. Свое название они получили в связи спервоначальным ошибочным предположением о том, что их гранулы содержатзапасы питательных веществ. Этим также объясняется и их другое название –лаброциты (от греч.
labros - жадный и cytos - клетка).К основным функциям тучных клеток относятся (по В.Л. Быкову) [7]:- гомеостатическая, которая осуществляется в физиологических условияхпутем медленного выделения небольших количеств биологически активныхвеществ, способных влиять на различные тканевые функции. В первую очередь,на проницаемость и тонус сосудов и поддержание баланса жидкостей в тканях.- защитная и регуляторная, которая обеспечивается путем локальноговыделения медиаторов воспаления и хемотаксических факторов, обеспечивающихмобилизацию эозинофилов и различных эффекторных клеток, участвующих в такназываемых реакциях поздней фазы, а также воздействие на рост и созреваниесоединительной ткани в зоне воспаления.-участие в развитииаллергических реакцийвследствие наличиявысокоаффинных рецепторов к иммуноглобулинам класса Е (IgE) на ихплазмолемме и функциональной связи этих рецепторов ссекреторныммеханизмом.Происхождение тучных клеток до сих пор является спорным вопросом.Считают, что они могут образовываться в результате дифференцировкиретикулярных, адвентициальных клеток, фибробластов, лимфоцитов.
П.Эрлих,впервые описавший эти клетки в 1877г., предположил, что лаброциты составляютсамостоятельнуюкатегориюклетоксоединительнойтканиимогутобразовываться из других ее клеток. В 1896г. Audry выдвинул гипотезу о том, что30ТК могут формироваться из всех типов клеток соединительной ткани [28, 30]. Внастоящее время основной гипотезой гистогенеза лаброцитов является ихпроисхождение из СКК красного костного мозга [112]. На их дифференцировку ирост влияют ИЛ-3 (продуцируемый Т-лимфоцитами) и факторы клеточногомикроокружения (фибробласты, эпителиальные клетки и их продукты) [110]. Ворганизме тучные клетки располагаются преимущественнопериваскулярно -около мелких сосудов, что, вероятно, связано с их регуляторной функцией ивлиянием на проницаемость сосудов.
Однако соединительная ткань различныхорганов содержит различное количество лаброцитов. Особенно богата ими дерма,где их число достигает 10-20 тыс. клеток/мм3. Они также очень многочисленны всобственной пластинке слизистых оболочек пищеварительного тракта, дыхательной, выделительной и половых систем, в строме молочной железы и тимуса.В среднем, в рыхлой волокнистой соединительной ткани их относительноесодержание составляет 10% от общего числа клеток. Однако их не находят ваваскулярных тканях, таких как минерализованная кость, хрящ, роговица. Длятучных клеток характерно избирательное накопление в тканях, где есть контакт синородными агентами (кожа, слизистые оболочки).
Это указывает на тот факт,что данные клетки одними из первых инициируют защитные механизмы [68, 107,114].Линдером в 1976 году предложена классификация тучных клеток на типы, взависимости от их функциональной стадии:0 тип – недегранулирующие клетки;I тип – слабодегранулирующие тучные клетки;II тип – клетки с умеренной степенью дегрануляции;III тип – клетки с сильной степенью дегрануляции.При повышении функциональной активности органов, в их строменарастает количество ТК.
Примерами этому служат: щитовидная железа при еегиперфункции, лактирующая молочная железа, матка при беременности и втечение менструального цикла. Их количество так же увеличено также вблизи ивнутри очагов хронического воспаления, в опухолях и по периферии заживающих31ран [53]. Поскольку грыжесечение являтся оперативным вмешательством,вследствие которого образуется рана, необходимо рассмотреть роль и морфофункциональное состояние тучных клеток в различные периоды раневогопроцесса.
Было установлено, что лаброциты активируются на очень раннихстадиях заживления, на что указывают изменения ферментативной активностиданных клеток при дегрануляции. Снижение тучных клеток в боковых стенкахраны на ранних сроках связано с их массовой дегрануляцией и невозможностьювизуализации при окраске толуидиновым-синим. В первые сутки содержаниетучных клеток в области раны снижается, к 3-5-м суткам увеличивается идостигает максимума к 7-8-м суткам, коррелирует с развитием грануляционнойткани [115].Тучные клетки играют основную роль в фазе остроговоспаления, когда выделяются медиаторы воспаления раневого процесса. Впервые сутки во время фазы воспаления число тканевых базофилов снижается иззаих массовой дегрануляции, приводящей к распаду. В результате дегрануляциивысвобождаетсягистаминисеротонин,чтообусловливаетпроявлениесосудистых изменений. К 5-7-м суткам число тучных клеток восстанавливается,что характерно для нарастающих регенераторных проявлений.
Увеличениеколичества тучных клеток авторы связывают с тем фактом, что они содержатся нетолько в стенке раны, но и в грануляционной ткани [108]. Раневой процессхарактеризуется сложными взаимодействиями тучных клеток с другимиклеточнымисоставляющими.трансформациейстимулируютмоноцитовпроцессыТак,ввоспалительнаямакрофаги,ангиогенеза,сфазакоторымиопределяющиехарактеризуетсятучныеклеткиформированиегрануляционной ткани. При регенераторном процессе наблюдается мобилизациявсех клеточных компонентов, в том числе и тучных клеток, которыеобеспечивают стимулирующее влияние на процессы заживления [111].Тучные клетки определяют течение фазы регенерации, так как выделяемыепри дегрануляции вещества оказывают митогенное действие на эндотелиоциты ифибробласты, а гистамин в определенных дозах стимулирует секрециюфибробластами коллагена, что является основополагающим звеном в заживлении32[113].ВработахР.У.Липшицаисоавт.указано,чтотучныеклеткиобнаруживаются даже в рубце, прочность которого играет важную роль впредотвращение развития послеоперационных грыж.
В отдаленные срокивосстановительного периода возрастает число тучных клеток в коже, повышаетсяих функциональная активность, о чем свидетельствует накопление гистамина исеротонина не только в стенках раны, но и в отдаленной зоне. Такая реакциясопровождается усиленным образованием соединительной ткани и стягиваниемраны, что указывает на важную роль тучных клеток в ауторегуляционныхмеханизмах заживления ран. Способность тучных клеток продуцироватьцитокиныифакторыроста(фибробластическийфакторроста,трансформирующий фактор роста, васкулярный эндотелиальный фактор роста)определяет не только процессы ангиогенеза в зоне повреждения, но ипривлечение в зону формирующегося рубца фибробластов [105].Итак, тучные клетки оказывают важнейшее влияние на ход заживленияраны.
Процесс дегрануляции тучных клеток и последующая стимуляциявыделившимися биологически активными веществами неоангиогенеза являютсясоставной частью компенсаторно-приспособительной реакции тканей прираневом процессе, в том числе при эндопротезировании брюшной стенки.33ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1 Дизайн исследованияИсследование по эндопротезированию передней брюшной стенки разделенона 2 блока эксперимента (рисунок 1). В первой группе эксперимента выполнялиэндопротезирование передней брюшной стенки в стерильных условиях. Вовторой группе экспериментов выполняли эндопротезирование передней брюшнойстенки в условиях микробного обсеменения.Эндопротезирование переднейбрюшной стенкиимплантированногоэндопротеза:на«Эсфил»,5серийв«Унифлекс»,Серия 5. УнифлексAgСерия 4.
Эсфил AgСерия 2. УнифлексСерия 1. ЭсфилРисунок 1 - Дизайн исследованияКаждая группа была разделенаСерия 3. ПлазмофильтрГруппа 2Эндопротезирование в условияхмикробной обсемененностиСерия 5. Унифлкс AgСерия 4. Эсфил AgСерия 3. ПлазмофильтрСерия 2. УнифлексСерия 1. ЭсфилГруппа 1Эндопротезирование встерильных условияхзависимостиот«Плазмофильтр»,«Эсфил Ag», «Унифлекс Ag». Эксперимент выполнен на 500 белых крысахсамцах линии Вистар массой 200-250 г.
Распределение животных по сериямэксперимента представлено в таблице 1. В эксперимент отбирались животные безвнешних признаков заболеваний после 14 суточного карантина в условияхвивария ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет»Минздрава России.34Протокол экспериментов в разделе выбора, содержания животных,проведения операций и выведения их из опыта был составлен в соответствии спринципами биоэтики, правилами лабораторной практики (GLP), соответствуетэтическимнормамрекомендациямиипосоставленпроведениювсоответствиис«Международнымимедико-биологическихисследованийсиспользованием животных (1985 г) и приказом МЗ РФ № 267 от 19.06.2003, «Обутверждении правил лабораторной практики», МЗ ССР № 755 от 12.08.1977.Программа экспериментов была согласована с Локальным независимымэтическим комитетом по экспертизе диссертационных исследований (протокол№2 от 5 ноября 2013г.).Таблица 1 - Распределение животных по сериям в одной группе опытов исрокам выведения из экспериментаСерияСроки (сутки)37142130ВСЕГОЭсфилУнифлексЭсфил AgУнифлекс AgПлазмофильтрИТОГО1010101010501010101010501010101010501010101010505050505050250/500101010101050Выбор крыс в качестве экспериментальных животных обусловленследующими причинами:1.















