Диссертация (1140408), страница 11
Текст из файла (страница 11)
В последнем случае, при осмотре обращало на себя вниманиеотсутствие нескольких кожных швов и раневое отделяемое серозно-гнойногохарактера. При имплантации эндопротеза «Плазмофильтр», в 4 случаях из 10,отмечалась несостоятельность кожных швов, из раны гнойное отделяемое. Уодного животного эндопротез мигрировал наружу. Полость раны была заполненагноем. Подлежащая мышечная ткань некротизирована.
При использованииэндопротезов «Унифлекс Ag» и «Эсфил Ag» отмечалась гиперемия краев раны,отек, серозно-гемморагическое отделяемое.Наибольшая микробная обсемененность раны микроорганизмами E.coliнаблюдаласьпослеимплантацииэндопротеза«Унифлекс»исоставила333,5±1,43х106 КОЕ, наименьшая при использовании «Унифлекс Ag» 20,1±1,44х106 КОЕ. После имплантации «Эсфил Ag» количество КОЕ было26,3±1,59 х106, «Эсфил» 271,8±1,83х106, «Плазмофильтр» - 4,6±0,87 х106.Обсемененность раны золотистым стафилококком была значительно меньше, чемв группах с кишечной палочкой, но в сравнительном аспекте наибольшееколичество КОЕ было у «Эсфил» 70,9±2,15х106.
При использовании «Унифлекс» 33,5±1,43 х106 КОЕ. Наименьшее количество КОЕ было при использованииэндопротезов с антибактериальным покрытием: «Унифлекс Ag» - 9,4±1,6х106,«Эсфил Ag» - 15,2±1,43х106, «Плазмофильтр» - 2,6±0,97 х106.При световой микроскопии гистологических препаратов на 3-е суткиэксперимента, при использовании стандартных эндопротезов «Унифлекс» и«Эсфил»реактивныеизменениявокружающейсоединительнойтканизначительно выражены. Ткань отечна, наблюдается распространение инфильтрата70в выше и нижележащие слои. Площадь инфильтрата достоверно больше (р≤0,05)в 1,7 и 1,8 раз по сравнению с одноименными протезами с нанесением ионовсеребра (таблица 10).Таблица 10 - Динамика изменения площади воспалительно-клеточногоинфильтрата, M±, мм2.Эндопротез3-и сутки7-е сутки14-е сутки21-е сутки30-е суткиУнифлекс Ag0,9±0,044,50,7±0,024,50,5±0,034,50,2±0,024,50,1±0,025Эсфил Ag0,9±0,024,50,8±0,044,50,6±0,013,4,5 0,2±0,024,50,1±0,025Плазмофильтр0,7±0,034,50,5±0,034,50,4±0,032,4,5 0,2±0,034,50,1±0,015Унифлекс1,6±0,221,2,31,2±0,141,2,3 0,7±0,021,30,4±0,21,2,30,2±0,025Эсфил1,7±0,141,2,31,4±0,131,2,3 0,8±0,051,30,6±0,021,2,30,3±0,031,2,3,4Примечание: статистически значимые отличий при р≤0,05 по сравнению с эндопротезом:4Унифлекс Ag, 2 – Эсфил Ag, 3 –Плазмофильтр, –Унифлекс, 5 –Эсфил.1–Вокруг нитей эндопротеза «Эсфил» располагаются коллагеновые волокна,приобретающие упорядоченное направление, плотность клеток высокая.
Индекспролиферации составил 31,11%. Тучные клетки находятся в стадии накоплениясекрета (I тип) (рисунок 31 Б).Рисунок 31 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Эсфил» на 3сутки эксперимента в условиях микробной обсемененности. Окр. Г+Э. А –упорядоченные коллагеновые волокна вокруг нитей протеза. Ув.х400. Б –скопление тучных клеток вокруг нитей протеза. Ув.х 40071В поле зрения много макрофагов.
В непосредственной близости кэндопротезурасполагаютсяединичныегигантскиемногоядерныеклетки,маленьких размеров, в оксифильной цитоплазме которых находятся 3-4гипохромных ядра.Таблица 11 - Соотношение компонентов клеточного индекса на 3-и суткиэксперимента при использовании различных эндопротезов в условияхмикробной обсемененности, M ± , у.е.ЭндопротезыФиброцитыФибробластыМакрофагиЛимфоцитыНейтрофилыКлеточныйиндексУнифлекс Аg7,7±0,56313,3±0,554,519,3±0,80324,1±0,521,36,7±1,413,4,50,64±0,02324,1±1,301,36,7±3,563,4,50,64±0,0638,1±0,491,2,57,9±0,571,2,0,49±0,011,4,54,52,4,545,4±1,211,16,3±1,031,2,0,62±0,0232,3355,1±1,101,9,5±1,401,2,32,4,5Эсфил Ag6,6±1,48313,3±1,364,519,3±2,1032,4,5Плазмофильтр12,5±0,561,2,4,5УнифлексЭсфил8,2±0,5535,2±0,32314,6±0,694,59,2±0,821,2,38,5±1,181,2,35,8±0,251,2,4,521,1±1,42321,8±0,8630,55±0,0332,3Примечание: статистически значимые отличий при р≤0,05 по сравнению с эндопротезом:4Унифлекс Ag, 2 – Эсфил Ag, 3 –Плазмофильтр, –Унифлекс, 5 –Эсфил.1–При имплантации «Унифлекс» клеточный индекс выше, чем прииспользовании эндопротеза «Эсфил» в 1,6 раза (таблица 11).
В поле зренияпреоладают фибробласты (рисунок 32). Количество Ki-67 положительных клетокбыло 37,48%.72Рисунок 32 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Унифлекс» на 3сутки эксперимента в условиях микробной обсемененности. Окр. Ван-Гизон. А –ув. х 100При изучении тканей после имлантации эндопротеза «Плазмофильтр»наблюдается сильное кровоизлияние в ткани с геморрагическим пропитываниемокружающей ткани (рисунок 33). Большое количество сосудов с картинойкраевого стояния лейкоцитов.73Рисунок 33 - Микрофотография ткани, окружающий эндопротез «Плазмофильтр»на 3 сутки эксперимента в условиях микробной обсемененности.
- наличиеэритроцитов окружающей ткани. Окр. Г+Э. Ув. х 400Наблюдаются участки некроза, нейтрофильная инфильтрация. Плотностьклеток на единицу площади больше по сравнению со стерильными условиями(рисунок 34). Клеточный индекс достоверно (р≤0,05) меньше, чем прииспользовании других имплантов (таблица 11), что говорит о более сильномвоспалении. При этом индекс пролиферации составил 36,57%.74Рисунок 34 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Плазмофильтр»на 3 сутки эксперимента в условиях микробной обсемененности.
Окр. Г+Э. А –нейтрофильная инфильтрация вокруг нитей протеза. Ув. х 400. Б – скоплениенейтрофилов вокруг нитей протеза. Ув. х 400Гигантские многоядерные клетки единичны в поле зрения, располагаютсяна некотором расстоянии от нитей эндопротезов, Состоят из 2-х ядер, небольшихразмеров.Ядрарасполагаютсянеупорядоченно.Наблюдаетсябольшоеколичество вертикально расположенных кровеносных сосудов. В поле зрениятучныеклетки,лимфоциты,моноцитыединичны,фибробластыгипертрофированы. Тучные клетки округлые, преимущественно II и III типов.При имплантации эндопротеза «Эсфил Ag» вокруг нитейнаблюдалсявыраженный отек ткани, воспалительно-клеточных инфильтрат, состоящий изклеток-нерезидентов.
Площадь инфильтрата составила - 0,9±0,04 мм2. Клеточныйиндекс меньше, чем при использовании «Унифлекс Ag» на 9% (таблица 2), чтосвидетельствует о меньшем количестве клеток-резидентов в окружающей ткани.В поле зрения преобладают лимфоцитыи нейтрофилы. Приэтом внепосредственной близости к нитям эндопротеза встречалось большое количествомакрофагов, находящихся в стадии фагоцитоза ионов серебра (рисунок 35).75Рисунок 35 - Микрофотография ткани, окружающий эндопротез «Эсфил Ag» на 3сутки эксперимента в условиях микробной обсемененности.
- макрофагифагоцитирующие частицы серебра. Окр. Г+Э. А - ув. х 200. Б - ув. х 400НанитяхМитотическаяэндопротезаединичныеактивныеформыфибробластов.активность составила 51,36%. Плотность клеток значительнобольше по сравнению с тем же протезом в стерильных условиях. Встречаютсятучныеклеткинаначальныхстадияхдегрануляциииполностьюдегранулированные (2 и 3 типа) с хорошо идентифицируемым ядром. Гигантскихмногоядерных клеток нет.Вокруг нитей эндопротеза «Унифлекс Ag» наблюдался интерстициальныйотек (рис. 36), не выходящий за пределы зоны имплантации эндопротеза,отмечалась большая площадь инфильтрата (таблица 10). Плотность клеток наединицу площади возрастает по мере удаленности от нитей эндопротеза.Количество Ki-67 положительных клеток было более половины - 54,97% (рисунок36).Клеточныйсоставпреимущественнопредставленнейтрофильнымилейкоцитами, которые составили 36,7±3,56% от общего клеточного состава.Клеточный индекс равен 0,70±0,50.
Отмечается большое количество тучныхклетокна некотором расстоянии от нитей эндопротеза с начальной стадиейдегрануляцией. Клетки светлые с ядрами, имеющими нечеткую границу,цитоплазма слабо оксифильная (2 тип) (рисунок 37).76Рисунок 36 - Экспрессия Ki-67 в области имплантации эндопротеза«Унифлекс Ag» на 3 сутки эксперимента в условиях микробной обсемененности.Иммуногистохимическая реакция, DAB. Ув. х400Рисунок 37 - Микрофотография ткани, окружающей эндопротез «Унифлекс Ag»на 3 сутки эксперимента в условиях микробной обсемененности.
Окр. Ван Гизон.Ув. х 20077Таким образом, на 3 сутки морфологическая картина наблюдаемая всоединительнойткани,полностьюсоответствуетэкссудации,степеньвыраженности которой значительно больше, чем в стерильных условиях.Подтверждением этому является не только большая площадь инфильтрата, но ипреобладание в поле зрения нейтрофилов, макрофагов, тучных клеток в стадиидегрануляции и появление гигантских многоядерных клеток, в том числе и прииспользовании эндопротезов с антибактериальными свойствами.На 7 сутки было отмечено, что при использовании всех эндопротезов сантибактериальными свойствамивоспалительные изменения были выраженызначительно меньше, что подтверждается снижением микробной обсемененности(таблица 12, рисунок 38).Таблица 12 - Результат определения микробной обсемененностипослеоперационных ран при использовании различных эндопротезов, M ± ,КОЕ/гЭндопротезСрок экспериментаМикроорганизмы3-и сутки7-е сутки14-е сутки21-е сутки30-есуткиE.coli333,5х10-4±1,432,4,5235,7х10-4±2,372,4,594,3х10-4±2,352,40,9х10-4±0,050St.
aureus66,9х10-4±1,22,4,534,8х10-4±2,272,4,521,3х10-4±2,352,40,7 х10-4±0,610E.coli15,2х10-4±0,921,3,512,3х10-4±1,951,3,56,3х10-4±1,551,300St. aureus12,6х10-4±1,610,7 х10-4±2,951,3,57,3х10-4±1,21,300321,2х10-4±1,422,4,5248,9х10-4±2,462,4,5154,2 х10-4±1,12,48,7 х10-4±1,040St. aureus70,9х10-4±1,62,4,552,3х10-4±2,462,4,547,9х10-4±2,32,4,58,7 х10-4±1,040E.coli20,2х10-4±0,721,3,517,8 х10-4±1,832,4,52,3 х10-4±1,22,400St.















