Диссертация (1140393), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Активность эндогеннойпероксидазы блокировали методом погружения стекол с гистологическимисрезами в 0,3% раствор перекиси водорода в дистиллированной воде.Гистологические срезы инкубировали с первичными антителами вовлажной камере при комнатной температуре 1 час. В качестве универсальныхвторичных антител и системы визуализации использован коммерческийнабор EnVision производства фирмы Dako (таб. 4). Затем проводилось докрашивание ядер гематоксилином.Таблица 4Используемые антитела и степень их разведения№п/пТип антител ифирмапроизводительСвойстваантителДемаскирующая обработка РазведениетканиантителНагревание при 98° на воМышиные мо- дяной бане в растворе дляноклональныедемаскировкиантигеновDAKO pH 6,0 20 мин.Нагревание при 98° на воНВМЕ-1,Мышиные мо- дяной бане в растворе для2.DakoноклональныедемаскировкиантигеновDAKO pH 6,0 20 мин.Нагревание при 98° на воЦитокератин- Мышиные мо- дяной бане в растворе для3.19, DakoноклональныедемаскировкиантигеновDAKO pH 6,0 20 мин.Галектин-3,1.
NovocastraLaboratories361:1001:501:50Оценку результатов иммуногистохимических реакций проводили сучетом локализации, распространенности и интенсивности окрашиванияопухолевых клеток. Позитивной распространенной считали умеренную илиинтенсивную реакцию цитоплазмы и/или ядер (для галектина-3), цитоплазмыи /или цитоплазматических мембран (для НВМЕ-1 и цитокератина-19) болееполовины (50%) опухолевых клеток; позитивной очаговой (+) – умереннуюили интенсивную реакцию более 10%, но менее 50% опухолевых клеток; сомнительной (+/-) – слабую очаговую реакцию менее 10% опухолевых клеток.Позитивную реакцию со стороны цитоплазмы эндотелиальных клеток и/илимакрофагов не учитывали.Все полученные количественные данные были обработаны вариационно-статистическими методами при помощи программного пакета IBM SPSSStatistics v.21.
Для всех изучаемых параметров определяли минимальное(MIN) и максимальное (MAX) значения, среднюю арифметическую (M),ошибку средней (m), среднее квадратическое отклонение (S), коэффициентвариации (Cv). Полученные данные исследовали также с помощью парногонепараметрического корреляционного анализа (по Спирмену), дисперсионного однофакторного анализа (по Шеффе) (Автандилов Г.Г., 1990; ЛакинГ.Ф., 1990).Достоверность различий между группами определялась при помощинепараметрического критерия Колмогорова-Смирнова.
Различия считали достоверными при p<0.05. Проверка распределения полученных количественных данных проводилась по критерию Манна – Уитни. Распределение вовсех группах было близко к нормальному.В результате проведенного исследования были получены 72 количественных и полуколичественных параметра, описывающих микроморфологию щитовидной железы при различных видах ее патологии.Такое количество показателей затрудняет проведение статистическогоанализа и математического моделирования, а регрессионная модель можетбыть неадекватной, так как биологические процессы являются взаимосвязан37ной системой явлений, многие параметры которых обладают выраженноймультиколинеарностью (Лакин Г.Ф., 1990).Решение этой задачи возможно при применении метода главных компонент и факторного анализа.
Они позволяют описать объект исследованийминимальным числом некоррелированных характеристик, на основе стохастической связи первоначальных признаков с главными компонентами илифакторами объективно выбрать минимальное число показателей, обладающих наибольшей информативностью в определенной системе координат, выявить основные закономерности изучаемого процесса (Степанов С.А., Калмина О.А., Калмин О.В., 1996).Факторный анализ более удобен при изучении динамики и закономерностей биологического процесса, чем метод главных компонент.
Если каждаяглавная компонента связана примерно одинаково с большим количествомпервоначальных экспериментальных параметров и несет информацию о поведении всех этих показателей, то каждый главный фактор содержит максимальную информацию об одном или нескольких сходных экспериментальных параметрах и минимальную информацию о всех других. Следовательно,достигается высокая степень дифференцированности главных факторов, когда каждый фактор отражает всего одну закономерность изучаемого процесса (Степанов С.А., Калмина О.А., Калмин О.В., 1996).Учитывая все изложенное выше, было применено математическое моделирование с помощью факторного анализа методом главных компонент,которое позволило выявить основные закономерности изменения микроморфологии щитовидной железы при разной ее патологии.Но это только один аспект проблемы комплексного анализа экспериментальных данных.
Другой аспект – это классификация наблюдений иопределение критериев, по которым возможно определить групповую принадлежность нового экспериментального объекта. Эту задачу решает дискриминантный анализ. Он дает возможность получить так называемое решающее правило, которое позволяет на основании набора признаков правильно38отнести новое наблюдение к одной из экспериментальных групп с минимальной вероятностью ошибки. В результате дискриминантного анализанаходят новые линейные фиктивные признаки, называемые дискриминантными функциями, так, чтобы каждый из них разделял анализируемые группыс достижением минимальной трансгрессии. Величина трансгрессии можетслужить основой для оценки вероятности ошибки при отнесении некоторогонаблюдения к одной из групп (Лакин Г.Ф., 1990).В связи с этим полученные параметры микроморфологии щитовиднойжелезы были проанализированы также с пошагового дискриминантного анализа для выявления объективных критериев морфологической диагностикитиреоидной патологии.39ГЛАВА 3.СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ3.1.
Анализ структуры патологии щитовидной железыв 2011-2012 гг. (по данным патологоанатомического отделенияобластной клинической больницы им. Н. Н. Бурденко).За 2011-2012 гг. число прооперированных больных по поводу заболеваний щитовидной железы составило 753 человека, из них 668 (88,7%) женщины и 85 (11,3%) мужчин. Число лиц в возрасте до 30 лет составило 42(5,6%) человека (35 женщин и 7 мужчин), от 31 до 40 лет - 93 (12,4%) человека (83 женщины и 10 мужчин), от 41 до 50 лет – 172 (22,8%) человека (146женщин и 26 мужчин), от 51 до 60 лет - 254 (33,7%) человек (231 женщина и23 мужчины), от 61 до 70 лет - 164 (21,8%) человек (145 женщин и 19 мужчин), старше 70 лет - 28 (3,7%) женщин (рис.
1).4%5%12%22%20-30 лет31-40 лет41-50 лет51-60 лет61-70 лет23%34%Рис. 1. Возрастная структура больных в 2011-2012 гг.4071-80 летПри гистологическом исследовании ММФНТЗ был обнаружен в 375(49,8%) случаях (352 - у женщин и 23 - у мужчин); ММФТЗ - в 49 (6,5%) случаях (43 - у женщин, 6 - у мужчин); ДТЗ - в 147 (19,5%) случаях (106 - уженщин, 41 - у мужчин); АТ - в 62 (8,2%) случаях (60 - у женщин, 2- у мужчин); аденомы – в 75 (10,0%) случаях (68 - у женщин, 7 - у мужчин); раки - в45 (6,0%) случаях (39 - у женщин, 6 - у мужчин).У лиц в возрасте до 30 лет ММФНТЗ был выявлен в 12 (28,6%) случаях(все у женщин); ММФТЗ – не обнаружен; ДТЗ - в 16 (31,8%) случаях (10 - уженщин, 6 - у мужчин); АТ - в 4 (9,5%) случаях (все у женщин); аденомы – в7 (16,7%) случаях (6 - у женщин, 1 - у мужчин); раки - в 3 (7,1%) случаях (всеу женщин).У лиц от 31 до 40 лет ММФНТЗ был диагностирован в 28 (30,1%) случаях (все у женщин); ММФТЗ - в 11 (11,8%) случаях (9 - у женщин, 2 - умужчин); ДТЗ - в 34 (36,6%) случаях (28 - у женщин, 6 - у мужчин); АТ - в 3(3,2%) случаях (все у женщин); аденомы – в 10 (10,8%) случаях (9 - у женщин, 1 - у мужчин); раки - в 7 (7,5%) случаях (6 - у женщин, 1 - у мужчин).У лиц от 41 до 50 лет ММФНТЗ был обнаружен в 72 (41,9%) случаях(65 - у женщин, 7 - у мужчин); ММФТЗ - в 13 (7,6%) случаях (10 - у женщин,3 - у мужчин); ДТЗ - в 33 (19,2%) случаях (21 - у женщин, 12 - у мужчин); АТ- в 26 (15,1%) случаях (24 - у женщин, 2 - у мужчин); аденомы – в 18 (10,5%)случаях (17 - у женщин, 1 - у мужчин); раки - в 10 (5,8%) случаях (9 - у женщин, 1 - у мужчин).У лиц 51-60 лет ММФНТЗ был диагностирован в 138 (54,3%) случаях(131 - у женщин, 7 - у мужчин); ММФТЗ - в 14 (5,5%) случаях (13 - у женщин, 1 - у мужчин); ДТЗ - в 45 (17,7%) случаях (34 - у женщин, 11 - у мужчин); АТ - в 16 (6,3%) случаях (все у женщин); аденомы – в 26 (10,2%) случаях (25 - у женщин, 1 - у мужчин); раки - в 15 (5,9%) случаях (12 - у женщин, 3- у мужчин).У лиц 61-70 лет ММФНТЗ был обнаружен в 111 (67,7%) случаях (102 у женщин, 9 - у мужчин); ММФТЗ - в 5 (3,0%) случаях (все у женщин); ДТЗ 41в 19 (11,6%) случаях (13 - у женщин, 6 - у мужчин); АТ - в 10 (6,1%) случае(все у женщин); аденомы – в 11 (6,7%) случаях (8 - у женщин, 3 - у мужчин);раки - в 8 (4,9%) случаях (7 - у женщин, 1 - у мужчин).У лиц старше 70 лет ММФНТЗ был выявлен у 14 женщин (50,0%);ММФТЗ - у 6 женщин (21,4%); АТ - у 3 женщин (10,7%); аденомы - у 3 женщин (10,7%); рак - у 2 женщин (7,1%); случаи ДТЗ обнаружены не были (таб.5, рис.
2).5071-80 лет21,467,7Возраст61-70 лет354,351-60 лет5,541,941-50 лет31-40 лет30,121-30 лет28,60%10%7,630%ММФНТЗММФТЗДТЗ6,33,238,150%6,115,136,640%10,711,617,719,211,8020%0 10,79,560%АТ70%А7,16,710,25,910,55,810,816,780%4,990%7,57,1100%РРис. 2. Распределение случаев патологии щитовидной железы в возрастныхгруппах в 2011-2012 гг.42Таблица 5Структура патологии щитовидной железыПатологияММФНТЗММФТЗДТЗАТАРВсегоПолЖМВсегоЖМВсегоЖМВсегоЖМВсегоЖМВсегоЖМВсегоЖМВсего21-30 летN%1228,600,01228,600,000,000,01023,8614,31638,149,500,049,5614,312,4716,737,100,037,13583,3716,742100,031-40 летN%2830,100,02830,199,722,21111,82830,166,53436,633,200,033,299,711,11010,866,511,177,58389,21010,893100,0Возрастная группа41-50 лет51-60 летN%N%6537,813151,674,172,87241,913854,3105,8135,131,710,4137,6145,52112,23413,4127,0114,33319,24517,72414,0166,321,200,02615,1166,3179,9259,810,610,41810,52610,295,2124,710,631,2105,8155,914684,923190,92615,1239,1172100,0254100,061-70 летN%10262,295,511167,753,000,053,0137,963,71911,6106,100,0106,184,931,8116,774,310,684,914588,41911,6164100,071-80 летN%1450,000,01450,0621,400,0621,400,000,000,0310,700,0310,7310,700,0310,727,100,027,128100,000,028100,0В 2011 году число прооперированных больных по поводу заболеванийщитовидной железы составило 459 человек, из них 409 (89,1%) женщины и50 (10,9%) мужчин.
Число лиц в возрасте до 30 лет составило 26 (5,7%) человек (19 женщины и 7 мужчин), от 31 до 40 лет - 63 (13,7%) человека (57 женщины и 6 мужчин), от 41 до 50 лет - 115 (25,1%) человек (102 женщин и 13мужчин), от 51 до 60 лет - 146 (31,8%) человек (133 женщин и 13 мужчин), от61 до 70 лет - 91 (19,8%) человек (80 женщин и 11 мужчин), старше 70 лет 18 (3,9%) человек (18 женщин) (рис. 3).4%5%14%20%20-30 лет31-40 лет41-50 лет51-60 лет61-70 лет25%71-80 лет32%Рис.
3. Возрастная структура больных в 2011 году.При гистологическом исследовании ММФНТЗ был обнаружен в 216(47,1%) случаях (208 - у женщин и 8 - у мужчин); ММФТЗ - в 32 (7,0%) случаях (29 - у женщин, 3 - у мужчин); ДТЗ - в 100 (21,8%) случаях (73 - у женщин, 27 - у мужчин); АТ - в 39 (8,5%) случаях (37 - у женщин, 2- у мужчин);аденомы – в 43 (9,4%) случаях (37 - у женщин, 6 - у мужчин); раки - в 29(6,3%) случаях (25 - у женщин, 4 - у мужчин).У лиц в возрасте до 30 лет ММФНТЗ был выявлен в 8 (30,8%) случаях(все у женщин); ММФТЗ – не обнаружен; ДТЗ - в 10 (38,5%) случаях (4 - уженщин, 26 - у мужчин); АТ - в 1 (8,5%) случае (у женщины); аденомы – в 5(19,2%) случаях (4 - у женщин, 1 - у мужчин); раки - в 2 (6,3%) случаях (все уженщин).У лиц от 31 до 40 лет ММФНТЗ был диагностирован в 20 (31,7%) случаях (все у женщин); ММФТЗ - в 8 (12,7%) случаях (6 - у женщин, 2 - у мужчин); ДТЗ - в 24 (31,8%) случаях (20 - у женщин, 4 - у мужчин); АТ - в 1(1,6%) случае (у женщины); аденомы – в 5 (7,9%) случаях (все у женщин);раки - в 5 (7,9%) случаях (все у женщин).У лиц от 41 до 50 лет ММФНТЗ был выявлен в 51 (44,3%) случаях (47 у женщин, 4 - у мужчин); ММФТЗ - в 7 (6,1%) случаях (6 - у женщин, 1 - умужчин); ДТЗ - в 22 (19,1%) случаях (18 - у женщин, 4 - у мужчин); АТ - в 17(14,8%) случае (15 - у женщин, 2 - у мужчин); аденомы – в 11 (9,6%) случаях(10 - у женщин, 1 - у мужчин); раки - в 7 (6,1%) случаях (6 - у женщин, 1 - умужчин).У лиц 51-60 лет ММФНТЗ был обнаружен в 73 (50,0%) случаях (72 - уженщин, 1 - у мужчин); ММФТЗ - в 10 (6,8%) случаях (все у женщин); ДТЗ в 30 (20,5%) случаях (21 - у женщин, 9 - у мужчин); АТ - в 12 (8,2%) случае(все у женщин); аденомы – в 13 (8,9%) случаях (12 - у женщин, 1 - у мужчин);раки - в 8 (6,1%) случаях (6 - у женщин, 2 - у мужчин).У лиц 61-70 лет ММФНТЗ был диагностирован в 54 (59,3%) случаях(51 - у женщин, 3 - у мужчин); ММФТЗ - в 3 (3,3%) случаях (все у женщин);ДТЗ - в 14 (15,4%) случаях (10 - у женщин, 4 - у мужчин); АТ - в 7 (7,7%)случае (все у женщин); аденомы – в 8 (8,8%) случаях (5 - у женщин, 3 - умужчин); раки - в 5 (5,5%) случаях (4 - у женщин, 1 - у мужчин).У лиц старше 70 лет ММФНТЗ был выявлен у 10 женщин (55,6%);ММФТЗ - у 4 женщин (22,2%); у 1 женщины – АТ (5,6%); у 1 женщины –аденома (5,6%); рак – у 2 женщин (11,1%) (таб.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
