Диссертация (1140393), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Среди 6 (100%)пациентов с узловым коллоидным зобом экспрессия галектина-3 не была выявлена. Таким образом, чувствительность метода проточной цитофлюорометрии для определения экспрессии галектина-3 в аспирате из узла щитовидной железы составила 93,1%, специфичность – 89,2%, диагностическая точность – 90,9%.
Выявление экспрессии белка галектина-3 методом проточнойцитофлюорометрии может быть использовано и качестве дополнительногометода дооперационной диагностики высокодифференцированного рака щитовидной железы (Семенов Д.Ю., Колоскова Л.Е., 2010).Другие исследователи оценивали экспрессию галектина-3 с помощьюнепрямой иммуногистохимической реакции с использованием антител к галектину-3 в операционном материале и в цитологических препаратах, полученных с помощью тонкоигольной аспирационной биопсии. Большинствомисследователей были получены аналогичные результаты, и оценка галектина3 предопределяла гистологическое заключение о злокачественности или доброкачественности процесса в 100% случаев (Шкурко О.А., 2009; Коган Е.А.,2011; Bartolazzi A., Sciacchitano S., 2018).28НВМЕ-1 относится к группе полисахаридов и гликопротеинов, связанных с группами крови. Также он является антигеном поверхности мезотелиальных клеток, локализуется в клетках нормального эпителия бронхов и аденокарцином различного происхождения.
Одни авторы пишут о том, что положительной иммуногистохимической реакции клеток доброкачественныхопухолей с антителами к НВМЕ-1 не обнаруживается. В целом диапазон экспрессии НВМЕ-1 при фолликулярной аденоме варьирует от 6,7 до 24 %.Большинство фолликулярных аденом, экспрессирующих НВМЕ-1, являютсяоксифильно-клеточными, что, по мнению Le Zhao и соавт. (2015), может говорить об их потенциальной злокачественности. По данным литературы, экспрессия НВМЕ-1 при папиллярном раке щитовидной железы варьирует от 78до 100 %, при фолликулярном – от 84,6 до 100 %.
Экспрессия НВМЕ-1наблюдается чаще при фолликулярном и классическом вариантах папиллярного рака, чем при фолликулярном раке. Некоторые авторы пишут, что экспрессия данного маркера наблюдается лишь в 50 % фолликулярных карцином. Анапластические и медуллярные карциномы не экспрессировалиНВМЕ-1. В отдельных работах показано, что присутствие данного маркерафокально может обнаруживаться приблизительно в трети случаев узловыхзобов (Cyniak-Magierska A., Stasiak M., 2015; Erdogan-Durmus S, et al., 2016).Считают, что НВМЕ-1 – наиболее чувствительный маркер злокачественности щитовидной железы. При наличии экспрессии данного маркераможно говорить о папиллярной или фолликулярной карциноме с высокимипоказателями диагностической значимости.
По данным разных авторов, чувствительность и специфичность его превышают 92 %. По мнению L. Ceolin исоавт. (2016), НВМЕ-1 может не только служить маркером злокачественности щитовидной железы, но и усиливать специфичность цитокератина-19 кпапиллярному раку (Radu T.G., Mogoanta L., 2015; Qiao J., et al., 2017).Одновременная экспрессия галектина-3 и НВМЕ-1 наблюдалась в 87 %папиллярных опухолей. С точки зрения диагностической значимости, оптимальной панелью маркеров, характерных для рака щитовидной железы, мо29гут служить галектин-3 и его сочетание с НВМЕ-1 (Соколова О.В., 2009;Murtezaoglu A.R., Gucer H., 2017).Известно, что малигнизация эпителиальных клеток может приводить кизменению в их цитоскелете спектра специфических белков – цитокератинов. Именно поэтому изучались изменения в составе цитокератинов при малигнизации тиреоидного эпителия. Одним из них является цитокератин-19.При наличии иммуноэкспрессии данного маркера большое значение имеетраспространенность окрашивания препарата: в большинстве случаев диффузное окрашивание говорит о папиллярном раке, фокальное может отмечаться при других злокачественных и доброкачественных новообразованиях.Согласно некоторым источникам, данный маркер находится в фолликулярном эпителии 92 % папиллярных карцином и только 3 % доброкачественныхновообразований.
По информации других авторов, цитокератин-19 экспрессируется в 100 % папиллярных карцином как в классическом, так и в фолликулярном вариантах, не проявляет диффузной экспрессии ни в одной фолликулярной аденоме и фолликулярной карциноме и может быть использован вдифференциальной диагностике фолликулярного варианта папиллярного рака, фолликулярного рака и фолликулярной аденомы. Есть данные о том, чтодиффузная экспрессия цитокератина-19 отмечалась как при карциномах, таки при доброкачественных новообразованиях щитовидной железы, фокальная– в нормальном фолликулярном эпителии. Представлены свидетельства экспрессии данного маркера даже при хроническом тиреоидите. Тем не менеецитокератин-19 является надежным маркером папиллярного рака, несмотряна то, что только сильное диффузное окрашивание может говорить о егоналичии (Соколова О.В., 2009; Kaliszewski K., et al., 2016; Giovanella L., Imperiali M., 2017).Таким образом, проведение иммуногистохимического исследованияпозволяет значительно улучшить диагностику опухолей, близких по своемуморфологическим особенностям.
При этом авторами предлагается разный30перечень маркеров, что делает необходимым определение наиболее специфичных маркеров, обладающих в то же время высокой чувствительностью.31ГЛАВА 2.МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯМатериалом морфологического исследования послужили оперативноуделенные щитовидные железы 753 больных обоего пола в возрасте от 21 до74 лет из архива патологоанатомического отделения областной клиническойбольницы им Н.Н. Бурденко за 2011-2012 годы.
По возрасту материал былразделен на следующие группы: 1) до 30 лет, 2) 31-40 лет, 3) 41-50 лет, 4) 5160 лет, 5) 61-70 лет, 6) старше 70 лет.Таблица 2Распределение исследуемого материала по группам патологиив разных возрастных группахВозрастная группа21-30 лет31-40 лет41-50 лет51-60 лет61-70 лет71-80 летВсегоА710182611375АТ43261610362ПатологияДТЗММФНТЗ1612342833724513819111014147375ММФТЗ01113145649Р3710158245Всего429317225416428753Материал исследования по морфологической картине был разделен на6 групп: 1) макро-микрофолликулярный коллоидный нетоксический зоб(ММФНТЗ) (375 случаев), 2) макро-микрофолликулярный коллоидный токсический зоб (ММФТЗ) (49 случаев), 3) диффузный токсический зоб (ДТЗ)(147 случаев), 4) аутоиммунный тиреоидит (АТ) (62 случая), 5) аденома щитовидной железы (А) (75 случаев), 6) папиллярный рак щитовидной железы(Р) (45 случаев) (таб. 2).Из общего числа пациентов с патологией щитовидной железы для морфометрического исследования случайным образом были выбраны 199 случаев:1)макро-микрофолликулярныйколлоидныйнетоксическийзоб(ММФНТЗ) (70 случаев), 2) макро-микрофолликулярный коллоидный токсический зоб (ММФТЗ) (20 случаев), 3) диффузный токсический зоб (ДТЗ) (4832случаев), 4) аутоиммунный тиреоидит (АТ) (21 случай), 5) аденома щитовидной железы (А) (23 случая), 6) папиллярный рак щитовидной железы (Р) (17случаев).Из удаленных щитовидных желез бралось по 3 фрагмента 0,5х1х1 см,которые проводились через батарею спиртов возрастающей концентрации сцелью обезвоживания, затем заливались парафином.
С полученных блоковделались срезы толщиной 7-8 мкм, которые потом окрашивали гематоксилином – эозином. При помощи микроскопа Leica DM1000 и цифровой фотонасадки Nikon с каждого гистологического препарата было получено по 5 репрезентативных фотографий. Всего было изучено 2985 микрофотографий.На микрофотографиях с помощью программного пакета Digimizerv.4.2.0.0 измеряли высоту и ширину эпителиальных клеток; высоту и ширинуядер; продольный и поперечный диаметр фолликулов и коллоида.
На основании этих данных определялись площадь коллоида и площадь фолликуловпо формуле площади эллипса:4где S – площадь; a – продольный диаметр; b – поперечный диаметр.=Объем ядра высчитывался по формуле объема сфероида:4ℎ2=3где V – объем; h – высота ядра; a – ширина ядра.Объем клетки определялся по формуле расчета объема цилиндра:ℎ 2=4где V – объем; h – высота клетки; d – ширина клетки.Объем цитоплазмы рассчитывался как разность между объемом клеткии ядра. Определялось ядерно-цитоплазматическое отношение.Кроме количественных определялись и полуколичественные параметров: количество плоских, цилиндрических, кубических, полиморфных Аклеток; расположение ядра; форма ядра; окрашивание ядра и цитоплазмы;33вакуолизация цитоплазмы; наличие многоядерных клеток; наличие очаговойили диффузной интрафолликулярной пролиферации эпителия; наличие Вклеток, их форма; зернистость и вакуолизация цитоплазмы; расположение иформа ядра; наличие С-клеток; при наличии узлов оценивалась мономорфность строения, отличия строения узла от нормальной ткани; наличие кист,псаммозных телец, солидных, тубулярных, папиллярных структур; при наличии папиллярных структур изучались размер и форма сосочков; плоскоклеточная метаплазия; гомогенный коллоид; плотный; сетчатый; слоистый; пенистый; глыбчатый; краевая вакуолизация; очаговая лимфоидная инфильтрация; диффузная инфильтрация; кровоизлияния.С помощью точечной сетки Г.Г.
Автандилова (1990) определяли относительное количество эпителия, коллоида, стромы, лимфоидных клеток наусловную единицу площади.Всего на микрофотографиях было изучено 72 количественных и полуколичественных параметров (таб. 3).Таблица 3Объем исследования количественных и полуколичественных параметровИсследуемый параметрВысота эпителиальных клетокШирина эпителиальных клетокВысота ядраШирина ядраОбъем клетокОбъем ядраОбъем цитоплазмыЯдерно-цитоплазматический индексПродольный диаметр фолликулаПоперечный диаметр фолликулаПродольный диаметр коллоидаПоперечный диаметр коллоидаПлощадь фолликуловПлощадь коллоидаКоличество плоских клетокКоличество цилиндрических клетокКоличество кубических клетокА-клеткиКоличество полиморфных клетокРасположение ядраОкруглая форма ядра34Количествослучаев199199199199199199199199199199199199199199199199199199199199Количествоизмерений2985029850298502985029850298502985029850298502985029850298502985029850298529852985298529852985Исследуемый параметрОвальная форма ядраВытянутая форма ядраНеправильная форма ядраНормохромное окрашивание ядерГипохромное окрашивание ядерГиперхромное окрашивание ядерКлетки с базофильной цитоплазмойКлетки с оксифильной цитоплазмойКлетки с вакуолизированной цитоплазмойНаличие многоядерных клетокНаличие очаговой интрафолликулярной пролиферации эпителияНаличие диффузной интрафолликулярнойпролиферации эпителияКоличество В-клетокКоличество округлых клетокКоличество овальных клетокКлетки с оксифильной цитоплазмойКлетки с зернистой цитоплазмойРасположение ядраВ-клетки Округлая форма ядраОвальная форма ядраВытянутая форма ядраНеправильная форма ядраНормохромное окрашивание ядерГипохромное окрашивание ядерГиперхромное окрашивание ядерНаличие С-клетокМономорфность строения узловОтличия строения узла от нормальной тканиНаличие кистНаличие псаммозных телецНаличие солидных структурНаличие тубулярных структурНаличие папиллярных структурНаличие коротких сосочковНаличие длинных сосочковНаличие узких сосочковНаличие широких сосочковНаличие ветвящихся сосочковВыраженность плоскоклеточной метаплазииНаличие гомогенного коллоидаНаличие плотного коллоидаНаличие сетчатого коллоидаНаличие слоистого коллоидаНаличие пенистого коллоидаНаличие глыбчатого коллоидаНаличие краевой вакуолизацииНаличие очаговой лимфоидной инфильтрации35Количествослучаев199199199199199199199199199199Количествоизмерений29852985298529852985298529852985298529851992985199298519919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919919929852985298529852985298529852985298529852985298529852985298529852985298529852985298529852985298529852985298529852985298529852985298529852985Исследуемый параметрНаличие диффузной лимфоидной инфильтрацииНаличие кровоизлиянийОтносительная площадь фолликулярного эпителияОтносительная площадь коллоидаОтносительная площадь стромыВсегоКоличествослучаев199199199199199199Количествоизмерений29852985298529852985591030Для иммуногистохимического исследования парафиновые срезы былидепарафинированы в ксилоле и регидратированы в серии растворов этанолапонижающейся концентрации и фосфатном буфере.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
