Диссертация (1140388), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Продуцент пептида относится кгруппе коагулазонегативных стафилококков, являющиеся одними из основныхкомменсалов поверхностей кожи и слизистых оболочек человека и животных.Молекулярная масса пептида составляет 2999 Da, в его составе обнаруженозначительноеколичествоостатковлизина,чтоопределяетвыраженнуюкатионную природу этого соединения и высокое сродство к отрицательнозаряженным поверхностям бактериальных клеток.In vitro установлено, что бактерицидный эффект варнерина во многом,обусловлен – диссипацией мембранного потенциала клеток различных родовграмположительных бактерий, которая проявляется с первых минут еговзаимодействия с бактериальной клеткой.[24, 25]. Однако до сих порпрактически не исследованы особенности морфологических проявлений местныхвоспалительных реакций при КАИ с экспериментальной оценкой возможностиприменениянизкомолекулярныхкатионныхантибактериальныхпептидов8природного происхождения, для подавления развития и функционированиябиопленок на поверхностях имплантируемых медицинских устройств.ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ - морфологическая характеристика модели катетерассоциированной инфекции у лабораторных мышей с оценкой эффективностииспользования низкомолекулярного катионного антибактериального пептидаварнерина.ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ1) Создать модель катетер-ассоциированной стафилококковой инфекции улабораторных мышей.2) Изучить особенности местных воспалительных реакций на имплантациюкатетеров, покрытых биопленками стафилококков, и при введении взвесейстафилококков в область имплантации отрезков стерильных катетеров.3) Оценить влияние обусловленной циклофосфамидом иммуносупрессии напроявленияместнойвоспалительнойреакцииокружающихотрезкикатетеров тканей при различных условиях моделирования катетерассоциированной инфекции.4) Провестиморфологическуюантибактериальногомоделированияпептидаоценкуэффективностиварнеринакатетер-ассоциированнойприинфекциииспользованияразличныхувидахлабораторныхмышей.НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯРазработана новая модель катетер-ассоциированной инфекции лабораторныхмышей при различных условиях инфицирования отрезков сосудистых катетеров с предварительно выращенными на фрагментах катетеров двухсуточнымибиопленками стафилококков и при введении взвесей стафилококков в областиимплантации катетеров.9Проведенасравнительнаяморфологическаяоценкахарактерныхвоспалительных реакций тканей окружающих отрезки катетеров с биопленкамистафилококков, а также при однократном и многократном введениях взвесейстафилококков в зону имплантации отрезков стерильных катетеров.Установлены морфологические особенности воспалительной реакции в виденизкого содержания основных клеточных элементов в тканях, окружающихотрезкистерильныхкатетеров,иинтенсивногоростаскоплениймикроорганизмов при моделировании катетер-ассоциированной инфекции вусловиях иммуносупрессии циклофосфамидом.Впервые проведено изучение местной воспалительной реакции тканеймышей в области имплантации отрезков стерильных катетеров до и послеприменения низкомолекулярного катионного пептида варнерина.
Доказанаэффективность использования варнерина для подавления как предварительносформированных на отрезках катетеров биопленок стафилококков, так и вусловиях in vivo при введении бактериальных взвесей в области имплантациистерильных отрезков катетеров.ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫРазработанная модель катетер-ассоциированной инфекции может бытьиспользованадляизученияэффективностииспользованияразличныхантибактериальных препаратов для предупреждения формирования, подавленияразвития и функционирования биопленок коагулазонегативных стафилококков.Важным элементом моделирования катетер-ассоциированной инфекции улабораторных мышей являлась необходимость супрессии их иммунной системы.Налабораторныхмоделяхвыявленаэффективностьиспользованиянизкомолекулярного катионного пептида варнерина как для предупрежденияобразования, так и для ингибирования развития на сосудистых катетерахбиопленок коагулазонегативных стафилококков.10ПОЛОЖЕНИЯ ДИССЕРТАЦИИ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ1.
Исследованиями морфологических проявлений воспалительных реакцийлабораторных животных (белые мыши) на имплантацию стерильныхотрезков сосудистых тефлоновых катетеров, а также со сформированнымина них биопленками бактерий S.epidermidis 33, и при введении взвесей этихбактерий непосредственно в зону локализации отрезков стерильныхкатетеров установлено, что экссудативная фаза воспаления наиболеевыражена при введении бактериальных суспензий непосредственно в ткани,окружающие импланты.2. Формирование скоплений бактерий непосредственно на поверхностяхотрезков катетеров наиболее выражено при иммуносупрессивном действиициклофосфамида.3.
Подавление иммунных реакций циклофосфамидом приводит к отчетливымразличиям морфологических проявлений воспалительных реакций в разныесроки моделирования катетер-ассоциированной инфекции. Разработаннаяэкспериментальная модель может быть полезной при исследованииантибактериальных свойств различных препаратов.4. Использование низкомолекулярного катионного пептида варнерина примоделированиикатетер-ассоциированнойинфекциимышейведеткуменьшению, вплоть до исчезновения, скоплений стафилококков в тканях,окружающих катетер, что свидетельствует о проявлении выраженныхантибактериальных свойств этого низкомолекулярного катионного пептидаin vivo.ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ В ПРАКТИКУРезультаты исследований включены в курсы лекций и практическихзанятий на кафедре патологической анатомии с секционным курсом длястудентов ГБОУ ВПО «Пермский государственный медицинский университетимениакадемикаЕ.А.Вагнера»МинздраваРоссии.Разработанная11экспериментальнаямоделькатетер-ассоциированнойинфекцииумышейиспользуется в научно-исследовательской работе лаборатории биохимии развитиямикроорганизмов Института экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН.АПРОБАЦИЯ РАБОТЫМатериалы диссертационной работы представлены и обсуждены наВсероссийской конференции с международным участием «Актуальные вопросыпатологической анатомии» (Санкт-Петербург, 2011), XXVII международнойнаучно-практическойконференции«Современнаямедицина:актуальныевопросы» (Новосибирск, 2014), Юбилейной научно-практической конференции,посвященной 40-летию ФГУП «Гос.НИИ ОЧБ» ФМБА России «Современныепроблемы иммунофармакологии, биотехнологии и цитокиновой регуляции»(Санкт-Петербург, 2014), Всероссийской научно-практической конференции смеждународным участием, посвященной 80-летию кафедр патологическойанатомии и патофизиологии БГМУ (Уфа, 2014), ежегодных научных сессияхПГМУ им.
ак. Е.А.Вагнера (Пермь, 2012, 2013, 2014).ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИДиссертация изложена на 142 страницах машинописного текста, состоит извведения,обзораданныхлитературы,описанияматериаловиметодовисследований, двух глав собственных исследований, обсуждения, выводов исписка цитируемой литературы. Работа иллюстрирована 11 таблицами, 68рисунками. Библиографический список включает 224 источника, из них 53отечественных и 171 зарубежных авторов.СВЯЗЬ РАБОТЫ С НАУЧНЫМИ ПРОГРАММАМИ И СОБСТВЕННЫЙ ВКЛАДАВТОРАДиссертационная работа выполнена в соответствии с планом НИР ГБОУВПО «Пермская государственная медицинская академия им. ак.
Е.А.Вагнера»12Минздрава России (номер государственной регистрации – 0120.0800814). Авторлично участвовал в проведении экспериментов по созданию и использованиюмодели катетер-ассоциированной инфекции у мышей. Весь представленный вдиссертации материал собран, обработан и проанализирован лично автором.ПУБЛИКАЦИИСтатьи в изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ1. Экспериментальные подходы к созданию модели катетер-ассоциированнойинфекции обусловленной биопленками стафилококков / В.В. Литвинов,Л.М.
Лемкина, Г.Г. Фрейнд, В.П. Коробов // Вестник уральскоймедицинской академической науки. – 2011. - Том 38, №4. - С. 105-106.2. Морфологическаяоценкакатетер-ассоциированнойинфекциивэксперименте / В.В. Литвинов // Пермский медицинский журнал. – 2014. –Том 3, №2. - С. 109-116.3. Морфологическаяинфекциивхарактеристикаусловияхмоделииммуносупрессиикатетер-ассоциированнойнафонедействиянизкомолекулярного катионного пептида варнерина / В.В.Литвинов //Фундаментальные исследования.
– 2014. - №7. - С. 92-96.4. Морфологическаяхарактеристикамоделикатетер-ассоциированнойинфекции / В.В. Литвинов, Л.М. Лемкина, М.Л. Кононова, Г.Г. Фрейнд,В.П. Коробов // Медицинский вестник Башкортостана. - 2014. – Том 9, №5.- С. 29-33.Публикации в других журналах и сборниках5. Морфологическая оценка состояния мягких тканей вокруг катетеров примоделировании катетер-ассоциированной инфекции / В.П. Коробов, Г.Г.Фрейнд, В.В.
Литвинов, Л.М. Лемкина, А.Р. Максимова // Четвертыенаучные чтения, посвященные памяти член-корр. РАМН, з.д.н. РФ,профессора О.К.Хмельницкого «Актуальные вопросы патологической13анатомии»: Сборник научных трудов Всероссийской конференции смеждународным участием. СПб. - 2011. – С. 116-118.6.
Морфологическая оценка модели катетер-ассоциированной инфекции нафоне иммуносупрессии / В.В. Литвинов, Л.М. Лемкина, Г.Г. Фрейнд, Э.В.Яковлева, В.П. Коробов, Н.М. Никонова // Материалы IV Всероссийскогосъездапатологоанатомов:СборникнаучныхтрудовВсероссийскойконференции с международным участием. Белгород. – 2013. – С. 77-79.7. Морфологическаякатионногохарактеристикапептидаварнеринадействиянизкомолекулярногона модели катетер-ассоциированнойинфекции в условиях иммуносупрессии / В.В. Литвинов, Л.М.
Лемкина, Г.Г.Фрейнд, В.П. Коробов // Современная медицина: актуальные вопросы:Сборникстатейпо материаламXXVIIмеждународнойнаучно-практической конференции. Издательство «СибАК». Новосибирск. – 2014. № 1 (27). – С. 114-120.8. Возможности применения низкомолекулярных катионных пептидов примоделировании катетер-ассоциированной инфекции / В.В. Литвинов, Л.М.Лемкина,Г.Г.Фрейнд,В.П.Коробов//Актуальныевопросыпатологической анатомии в мирное и военное время: Сборник научныхтрудов Всероссийской конференции посвященной 155-летию кафедрыпатологической анатомии Военно-медицинской академии им.
С.М.Кирова /ВМедА. СПб. - 2014. – С. 138-140.9. Морфологическая картина модели катетер-ассоциированной инфекции нафоне действия низкомолекулярного катионного пептида варенрина / В.В.Литвинов, Л.М. Лемкина, Г.Г. Фрейнд, В.П. Коробов //: Актуальныевопросыпатологоанатомическойпрактическойпосвященнойпрактики:патологоанатомической30-летиюпатологоанатомическогооснованиябюро.МатериалыконференцииЮжногоЧелябинскогоИздательствонаучноУралаобластногоЮжно-Уральского14государственного медицинского университета. Челябинск. – 2014. – С.
5254.10.Возможности морфологической оценки антибактериальной активностинизкомолекулярных катионных пептидов при катетер-ассоциированнойинфекции в эксперименте / В.В. Литвинов, Г.Г. Фрейнд, Л.М. Лемкина, В.П.Коробов // Здоровье, демография, экология финно-угорских народов. –2014. - №3. - С. 75-76.11.Влияние циклофосфамида на клеточный состав инфильтрата вокругкатетера при катетер-ассоциированной инфекции в эксперименте / В.В.Литвинов, Г.Г. Фрейнд, М.Л. Кононова, Л.М. Лемкина, В.П. Коробов //Аллергология и иммунология.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
