Диссертация (1140388), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Показанное нами отсутствие в тканях окружающих катетер, CD34 ивиментина в первые двое суток эксперимента может быть связано с действиемварнерина как антибактериального фактора, которое, возможно, в качествеингибитора провоспалительных цитокинов, как это показано для другихантибактериальных пептидов [121, 128, 224].Стоит отметить, что отсутствие данного эффекта на третьи суткиэксперимента, скорее всего, связано со снижением содержания – «вымыванием»части варнерина с поверхности катетеров уже в первые сутки после имплантациии нивелированием его свойств в дальнейшем.Имплантация отрезков катетеров с предварительно выращеннымидвухсуточными биопленками стафилококков и с ежесуточным введениемварнерина (вторая подгруппа)В подгруппе без применения варнерина при имплантации стерильныхкатетеров с предварительно выращенными биопленками наблюдался ростскоплений микроорганизмов на наружной поверхности отрезка катетера в течениевсех трех суток эксперимента.
Отмечалось также повышение количествамакрофагов (CD68+) и тучных клеток с резким снижением количестванейтрофилов на третьи сутки.Ежесуточноеисчезновениювведениескопленийварнеринасомикроорганизмов,вторыхсутоквозрастаниюприводилоксодержания114нейтрофилов и дегранулирующих тучных клеток в инфильтрате, а такжедостоверному уменьшению количества фибробластов в инфильтрате зонлокализации отрезков катетеров.Иммуногистохимически на третьи сутки в прилегающих к отрезкамкатетеров зонах не выявлялись Т- и В-лимфоциты, отсутствовала реакция наCD34, а реакция на виментин была слабоположительной.Особенностью результатов изучения данной подгруппы животных являетсяустановление выраженного действия варнерина, расщепляющего бактериальныепленки.
Показано, что продукция антибактериальных пептидов наиболее выгоднав пространственно-структурированной окружающей среде по типу биопленки исоответственно наиболее эффективна [184, 201]. С этим же явлением связанобольшое количество нейтрофильных гранулоцитов в инфильтрате. Разрушеннаябиопленка теряет способность блокировать проникновение гранулоцитов, чтовкупе со свойствами самого варнерина, описанных выше, ведет к их увеличениюв составе инфильтрата [111, 110].Рядом исследователей показано, что в составе биопленок микроорганизмовприсутствуют вещества, блокирующие таксис и дифференцировку Т- и Влимфоцитов.
Возможно, что активное разрушение биопленок под действиемварнерина на третьи сутки приводит к высвобождению подобных соединений,способствующихудалениюизокружающихотрезоккатетератканейдифференцированных форм лимфоцитов, что и наблюдалось на третьи сутки вданной подгруппе [60, 83, 109].Действие варнерина как ингибитора провоспалительных цитокинов,которое было обсуждено выше, ведет к снижению экспрессии виментина и CD34,что способствует уменьшению количества фибробластов и синтеза имиколлагена.Учитывая способность разрушенных микроорганизмов привлекать большоеколичество цитокинов, и неустойчивость вводимого варнерина, есть основаниясделать заключение, о недостаточном ингибирующем действии варнерина в115отношении избытка провоспалительных цитокинов, что и наблюдается в данномслучае в виде слабоположительной реакции на виментин, а не полном ееотсутствии.Имплантация предварительно обработанного варнерином катетера иоднократное введение взвеси стафилококков (третья подгруппа).В подгруппе без использования варнерина при имплантации отрезкастерильного катетера с однократным введением взвеси стафилококка в тканиокружающие имплантат отмечался рост скоплений микроорганизмов в течениевсех трех суток эксперимента с выраженным увеличением тучных клеток вокружающих тканях.
При предварительной обработке отрезков катетеровварнерином отличия заключались в уменьшении МФ/ГФ первые двое суток засчет преобладания нейтрофилов в инфильтрате, окружающих имплант тканей, атакже с достоверным уменьшением количества макрофагов на вторые сутки (посравнению с подгруппой без применения варнерина).
Количество фибробластовна первые сутки резко возрастало, а на вторые-третьи сутки снижалось, чеготакже не наблюдалось в аналогичной подгруппе без введения варнерина, нонаблюдалось в предыдущей подгруппе. Рост скоплений микроорганизмов такжепродолжался в течение трех суток.Болеесвойствамивыраженнаясамогореакцияварнеринасостороны(остаткинейтрофиловмикроорганизмовобъясняетсяявляютсяхемоаттрактантами для нейтрофилов), а также связана со способностьюпривлечения антибактериальными пептидами тучных клеток, которые повышаютпроницаемость микроциркуляторного русла для различных гуморальных иклеточных факторов иммунного ответа.[110, 111].
Уменьшение количествамакрофагов, по-видимому, связано с ингибирующими свойствами самоговарнерина в отношении провоспалительных цитокинов, необходимых дляпривлечения макрофагов в очаг воспаления. Действие варнерина как ингибиторапровоспалительных цитокинов, которое было обсуждено выше, вкупе с116недостаточным содержанием макрофагов, способствует уменьшению количествафибробластов в инфильтрате на вторые-третьи сутки эксперимента.Учитываяпродолжающийсявэтихусловияхростскопленийстафилококков на поверхностях отрезков катетеров, можно сделать вывод онизком антибактериальном эффекте варнерина при предварительной обработкепептидом катетера.
По-видимому уже в первые сутки происходит десорбция(вымывание) части сорбировавшегося варнерина с поверхности катетера,приводящее к нивелированию его разрушающего действия на бактериальныепленки.Имплантация отрезков стерильных катетеров с ежесуточным введениемвзвесей стафилококков и варнерина (четвертая подгруппа)В подгруппе без использования варнерина при ежесуточном введениивзвеси стафилококков в область имплантации отрезков стерильных катетеровотмечался рост скоплений микроорганизмов снаружи и в просвете катетера,сопровождавшийся увеличением количества тучныхвведенииварнеринаприводилокизменениюклеток. Ежесуточноесостававоспалительногоинфильтрата с возрастанием количества нейтрофильных гранулоцитов, а такжесопровождалось тенденцией к уменьшению скоплений микроорганизмов.
Такжеимелась тенденция к уменьшению количества фибробластов в инфильтрате посравнению с подгруппой без применения варнерина. Эффект варнеринапроявлялся в уменьшении объема скоплений микроорганизмов. Причины данныхизменений укладываются в свойства варнерина как антибактериального пептида споправкой на массивное бактериальное обсеменение и подробно описаны выше.Стоит отметить, что использование варнерина приводит к смене паттернавоспалительной реакции в сторону большего количества нейтрофилов винфильтрате за счет свойств самого варнерина как антибактериального пептида.При этом происходит изменение МФ/ГФ коэффициента в сторону егоуменьшения.
Без использования варнерина МФ/ГФ коэффициент, наоборот117увеличивается преимущественно за счет небольшого количества нейтрофильныхгранулоцитов в клеточном инфильтрате (рис. 68).2,5МФ/ГФ коэффициент21,51Группа без варнеринаГруппа с варнерином0,50123Стерильныекатетеры123123Катетеры сбиопленками1ОднократноевведениестафилококкаСутки23ЕжесуточноевведениестафилококкаРис. 68. Макрофагально-гранулоцитарный коэффициент в группах без применения и сприменением варнеринаТаким образом, использование варнерина как в виде инъекций, так и припредварительной обработке им стерильных отрезков катетеров не оказываетзначительноговлияниянаклеточныйсоставокружающегоимплантатыинфильтрата в мягких тканях.
Ежесуточное введение варнерина в областьимплантации отрезков катетеров с биопленками, а также при одновременномвведении взвеси стафилококков с варнерином в область имплантации отрезковстерильныхкатетеровмикроорганизмовнаприводитповерхностяхантибактериальную активность.крезкомуимплантов,уменьшению,чтоскопленийподтверждаетего118ВЫВОДЫ1. Разработана модель катетер-ассоциированной инфекции, позволяющаяоценить морфологические проявления воспалительных реакций зоныимплантации отрезков катетера при различных условиях инфицированиякатетера.2. Ответная реакция окружающих тканей на предварительно инфицированныебиопленками катетеры протекает с наличием относительно небольшихскопленийстафилококков на поверхностях отрезков катетеров иформированием выраженного ограничительного вала, состоящего изфибрина и клеток воспалительного инфильтрата (нейтрофилы, макрофаги,лимфоциты,фибробласты).Скоплениябактериальныхклетоквинфильтратах окружающих тканей и на поверхностях отрезков катетеровнаиболее выражены при ежесуточном введении бактерий в областьлокализации импланта.3.
Нафонеиммуносупрессииприежесуточномвведениивзвесейстафилококков в зону имплантации стерильных отрезков катетеров ввоспалительном инфильтрате отмечается незначительное содержание всехосновных клеточных элементов – макрофагов, нейтрофилов и лимфоцитов.Скопления бактерий на имплантах и в окружающих их тканях наиболеевыражены при подавлении иммунных реакций циклофосфамидом сформированиемвоспалительныхинфильтратовископлениймикроорганизмов как снаружи, так и внутри просвета отрезков катетеров.4. Ежесуточное введение низкомолекулярного катионного пептида варнеринав область имплантации отрезков катетеров со сформированными на нихбактериальными пленками ведет к исчезновению скоплений стафилококков,а при одновременном ежесуточном введении взвеси стафилококков иварнеринавызываетуменьшениебактериальнойобсемененностиповерхности имплантов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
