Диссертация (1140388), страница 15
Текст из файла (страница 15)
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙМоделирование КАИ у животных чаще всего осуществляют путемпомещения отрезка катетера под кожу [74, 134, 173, 181]. При этом возникаюттипичные тканевые реакции на повреждение и инородное тело [33, 38, 37, 31,125].Нарушение целостности кожных покровов и реактивность тканей тесносвязана как с общими, так и местными проявлениями реакций организма.Важнейшее место в общей системной реактивности организма принадлежитсистеме крови, органам кроветворения и иммунной защиты [22, 42, 48, 51]Особенностью острой воспалительной реакции является локализация очагаинфекции и некробиотических изменений тканей [22].
Вокруг зоны некрозавозникает клеточная реакция в виде инфильтрации лейкоцитами, макрофагами итучными клетками. Клетки системы крови в очаге воспаления секретируютцитокины. Цитокины - небольшие пептидные информационные молекулы. Онирегулируютмежклеточныеимежсистемныевзаимодействия, определяютвыживаемость клеток, стимуляцию и подавления их роста, дифференциацию,функциональную активность и апоптоз.
Цитокины делятся по механизмудействия: 1) провоспалительные, 2) противовоспалительные, 3) регуляторыклеточного и гуморального иммунитета. Интерлейкин-1, 2, 6, 8, фактор некрозаопухоли альфа (TNF-альфа) относится к провоспалительным цитокинам. Ониобеспечивают мобилизацию воспалительного ответа [20, 214].Первая группа: моделирование катетер-ассоциированной инфекции у белыхмышей с интактной иммунной системойИмплантацияживотным отрезковстерильных катетеров(перваяподгруппа).На первые сутки наблюдений в окружающих отрезки катетеров тканяхотчетливо проявлялась лейкоцитарная фаза воспалительного процесса, котораяхарактеризовалась выраженной инфильтрацией зоны расположения имплантата102нейтрофильными гранулоцитами, макрофагами и клетками лимфоцитарного рядас единичными плазмоцитами (CD20+).
На вторые и третьи сутки, по сравнению спервыми сутками наблюдалось увеличение количества макрофагов срединейтрофилов и лимфоцитов (макрофагальная фаза). На третьи сутки в тканяхзоныкатетерарегистрировалосьгрануляционнойткани,образованиесостоящейиззначительноготонкостенныхколичествасосудовитонкихколлагеновых волокон, незначительного количества фибрина, фибробластов, атакже макрофагов и лимфоцитов. Все это свидетельствовало о наступлениифибропластической фазы воспаления.Данная патогистологическая картина и сроки смены фаз являютсяхарактерными для развития воспалительных реакций на инородные тела в мягкихтканях, в том числе и мышей, которые были детально описаны ранее [34, 42].
Вданной подгруппе отличия от результатов, полученных в вышеуказанной работе,заключалисьвнеравномерномраспределенииклеточныхэлементоввзависимости от суточных фаз воспаления, что может быть объяснено характероминородного материала, высоким метаболизмом в тканях и организме мышей, иособенностями эксперимента [177].Реакциянавведениеинородноготелапроявляетсязакономернымхарактером пролиферации, миграции и дифференцировки клеточных элементовсистемы крови, которые вместе с клетками фибробластического дифферонапоследовательно формируют клеточные кооперации, участвующие в развитииместноговоспаления,отграниченияочагаповреждения,рассасываниянекротических масс и активации пролиферативных процессов [31, 33, 37, 38].Имплантация животным катетеров с предварительно выращеннымистафилококковыми биопленками (вторая подгруппа)На поверхностях отрезков катетеров со вторых суток отмечались небольшиескопления микроорганизмов.
Кроме того, в отличие от первой подгруппывыраженность воспалительной реакции отмечалась за счет увеличения количестванейтрофилов, тучных клеток и фибропластической реакции тканей вокруг103катетеров, связанной с достоверным увеличением количества фибробластов(Vimentin +)и толщины ограничительного вала. Данные изменения, по-видимому, обусловлены особенностями иммунного ответа, индуцированногоналичием биопленок стафилококка в очаге воспаления, так как известно, чтоналичие биопленок микроорганизмов на поверхностях отрезков катетеровприводит к активации большего количества тучных клеток, чем при реакции настерильное инородное тело [65, 75].
Значительная концентрация медиатороввоспаления, выделяемых тучными клетками, привлекает, в свою очередь, большоеколичество нейтрофильных гранулоцитов [209]. В результате этого усиливаетсяпролиферация, миграция и дифференцировка клеточного пула инфильтрата сцелью локализации и очистки очага воспаления [31, 33, 37, 38].Имплантация стерильных отрезков катетеров с однократным введениемстафилококковой взвеси в окружающие катетер ткани (третья подгруппа)Скопления микроорганизмов на наружной поверхности отрезков катетеровнаблюдались в течение первых двух суток.
Воспалительная реакция в этихусловиях была представлена полиморфноклеточным инфильтратом, в составекоторого определялись: нейтрофилы, макрофаги, лимфоциты (CD20+, CD3+),свидетельствующимовыраженномвоспалительномответенавведениебактериальных взвесей.Имплантация стерильных катетеров с ежесуточным введением взвесейстафилококков в окружающие катетер ткани (четвертая подгруппа)Имплантация стерильных катетеров с ежесуточным введением взвесистафилококка в окружающие катетер ткани привела к отличиям от первойподгруппы, которые заключались в следующем. Формирование и увеличениескоплений микроорганизмов наблюдалось на наружных поверхностях отрезковкатетеров в течение всех трех суток экспериментов.
В клеточном инфильтратевокруг имплантов отмечалось выраженное возрастание количества макрофагов(CD68+) с незначительным изменением содержания нейтрофилов, в этих104условиях наблюдались также слабая фибропластическая реакция (Vimentin+), инебольшое количество тучных клеток.Данные изменения обусловлены тем, что избыточная бактериальнаянагрузка в виде ежесуточного введения взвеси стафилококка извне в окружающиеотрезок катетера ткани, по-видимому, способствует уменьшению количестватучных клеток.
Учитывая то, что бактериальные токсины обладают способностьюстимулировать синтез и секрецию макрофагами медиаторов воспаления (IL-1,TNF-альфа), то миграция нейтрофилов и новых макрофагов в очаг воспалениявозрастает [40, 160, 223].Возможная причина уменьшения толщины ограничительного вала вокругкатетераприоднократном инебольшоеколичествофибробластовпримногократном введении взвеси стафилококка в окружающие катетер тканизаключается в том, что в воспалительном инфильтрате значительно повышаетсяуровень медиаторов воспаления. Источником таких медиаторов (фактор некрозаопухоли альфа (TNF-альфа), IL-1, 2, 6, 8) часто являются макрофаги [20, 40, 214].Увеличение содержания фактора некроза опухоли, например, приводит к тому,чтоколлагенообразованиефибробластамигрануляционнойтканииихпролиферация задерживаются [44, 190].Таким образом, при подкожной имплантации отрезков стерильныхкатетеров патогистологическая картина и сроки смены фаз воспаления являютсяхарактерными для развития воспалительных реакций на инородное тело в мягкихтканяхмышейимеющихвысокийуровень регенераторногопотенциала.Неравномерное распределение элементов клеточного состава инфильтратов взависимости от сроков развития (суточных фаз) воспаления может бытьобусловлено характером инородного материала и особенностями постановкиэкспериментов.
В тоже время воспалительная реакция на имплантацию отрезковкатетеров, с предварительно выращенными на них бактериальными пленками,характеризовалась наличием выраженных особенностей ее проявлениязначительнымувеличениемвокружающемпространстве-количества105нейтрофильных гранулоцитов и тучных клеток, а также возрастанием толщиныограничительного вала (фибрин и грануляционная ткань) вокруг отрезковкатетеров, отличающих ее от реакции на однократное и многократное введениевзвесей бактерий в зоны имплантации отрезков катетеров.При этом ответная реакция окружающих тканей на предварительноинфицированные биопленками катетеры протекает с наличием относительнонебольших скопленийстафилококков на поверхностях отрезков катетеров.Скопления бактериальных клеток в инфильтратах окружающих тканей и наповерхностях отрезков катетеров наиболее выражены при ежесуточном введениибактерий в область локализации импланта.Учитываявышеизложенное,вособенностивысокуюскоростьрегенераторных процессов у мышей и нечеткую картину воспаления в течениетрех суток на введение отрезка катетера, а также имеющиеся данные обособенностяхразвитиякатетер-ассоциированныхинфекцииуиммунокомпрометированных больных [53, 56, 170], значительный интереспредставлялопроведениеисследованийсиспользованиемиммуносупрессированных животных.Наиболее изученным препаратом для иммуносупрессии у лабораторныхживотныхявляетсяциклофосфан.Циклофосфан-оксазафосфориновоепроизводное бис-(β-хлорэтил)-амина - применяется для лечения лимфом,лейкозов и некоторых солидных опухолей [54, 63].При воздействии на организм алкилирующих цитостатиков, к которымотносится циклофосфан, в молекулах ДНК активно делящихся клеток образуютсямежцепочечные сшивки.
В случае, если репаративной системе клетки не удаетсявосстановить все такие повреждения, клетка с неизбежностью вступает на путьапоптоза. Циклофосфан в первую очередь воздействует на лимфоциты на всехэтапах созревания. Лимфоциты для продолжения дифференцировки должнырепарировать возникшие двуцепочечные разрывы, которые появляются в106результате остановки репликативной вилки, наталкивающейся на препятствие ввиде сшивки цепей ДНК [63, 151, 155].Втораягруппаживотных:моделированиекатетер-ассоциированнойинфекции белых мышей с иммуносупрессиейИмплантацияживотным отрезковстерильных катетеров(перваяподгруппа).По сравнению с аналогичной подгруппой интактных животных, в образцахтканей мышей при развитии иммуносупрессии отмечалась выраженная клеточнаяреакция с преобладанием нейтрофилов и увеличением количества тучных клеток,но резким снижением содержания лимфоцитов (CD3-, CD20-) и фибробластов.Фазы воспаления в абсолютном соотношении клеточных элементов имели четковыраженные границы в отличие от группы животных не подвергнутыхиммуносупрессии.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
