Диссертация (1140276), страница 15
Текст из файла (страница 15)
Сложившаяся ситуациятребует проведения дополнительных исследований, во-первых, фиксирующихфакт нейропротекторного действия в динамике ИКГМ и, во-вторых, уточняющихмеханизм нейротропных эффектов ЛИ при ишемических поражениях ЦНС.Результаты исследования неврологического статуса при экспериментальнойИКГМ в условиях применения ЛИ представлены в таблице 17.87Таблица 17Влияние лазерного излучения на неврологический статус приэкспериментальной ИКГМ по шкале Garcia J. H. (Me [Q1-Q3], баллы)Группыживотных1. Ложнооперированные2. ИКГМ4. ИКГМ + ЛИРазличия(критерийМанна–Уитни)3 сутки7 сутки1818[17,00-18,00] [18,00-18,00]6[5,00-7,25]9[7,75-9,25]P1-2<0,001P1-4<0,001P2-4<0,0019[8,00-10,5]10,5[10,00-12,00]P1-2<0,001P1-4<0,00114 сутки30 сутки18[18,00-18,00]18[18,00-18,00]12[11,0-13,0]13,5[12,75-15,0]P1-2<0,001P1-4<0,00115[14,0-16,25]16[15,00-17,25]P1-2<0,001На 3 сутки эксперимента интегральный показатель по шкале Garcia J. H.
значимоувеличивается на 50% по медиане относительно группы животных с ИКГМ, на 7,14, 30 сутки эксперимента интегральный показатель статистически значимо неизменяется, фиксируется на правах тенденции его повышение. По сравнению сгруппойложнооперированныхживотныхинтегральныйпоказательневрологического статуса снижен на 3, 7, 14 сутки наблюдения, а на 30 сутки неотличается от группы ложнооперированных животных.Итак, в условиях применения ЛИ при экспериментальной ИКГМнаблюдается повышение интегрального показателя неврологического статуса на 3сутки наблюдения и его восстановление к 30 суткам наблюдения.При оценке этологического статуса крыс при ИКГМ в условиях примененияЛИ установлены следующие изменения (таблица 18). На 3 сутки экспериментагоризонтальная активность животных статистически значимо возрастает на 57%по медиане, другие показатели достоверно не изменяются, несмотря натенденцию к повышению исследовательской активности животных.
На 7 суткинаблюдения(на50%значимопоповышаетсямедианетолькоотносительновертикальнаягруппыактивностьживотныхскрысИКГМ).Таблица 18Влияние лазерного излучения на показатели теста «открытое поле» приэкспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3])Показатели3 сутки7 суткиГруппа 4.ИКГМ +ЛИ (n=10)13,5[12,75;14,25]6,0[5,75; 7,0] *14 сутки30 суткиГруппа 2.ИКГМ(n=10)10,5[8,75; 11,25]Группа 4.ИКГМ +ЛИ (n=10)15,5[14,0; 17,0] *3,0[2,75; 4,25]Группа 4.ИКГМ +ЛИ (n=10)12,0[10,0015,00] *7,0[5,0; 10,0] *5,0[4,75; 6,0]8,0[7,0; 8,25] *ГА,актовГруппа 2.ИКГМ(n=10)7,0[6,0; 8,0]ВА,актов4,0[3,0; 5,0]Группа 4. Группа 2.ИКГМИКГМ +(n=10)ЛИ (n=10)11,012,0[9,0;[11,5;10,5] *12,75]4,03,0[3,75; 4,25] [1,75; 4,0]Группа 2.ИКГМ(n=10)8,0[7,75; 8,75]ИА,актов2,0[2,0; 3,0]3,5[2,75; 4,0]4,0[3,75; 5,0]5,0[4,0; 5,25]3,0[3,0; 4,0]5,0[4,0; 6,0]4,0[3,0; 5,0]7,0[7,0; 8,0] *Гр,актов1,0[1,0; 2,0]2,0[1,0; 2,25]2,0[1,0; 2,0]2,0[1,75; 3,0]1,5[1,0; 2,0]2,0[1,0; 2,0]2,0[1,0; 2,25]3,0[2,75; 3,25]ФБ,кол-во1,0[1,0; 2,0]1,0[0,75; 1,25]1,0[1,0; 2,0]1,0[1,0; 2,0]2,0[1,0; 3,0]1,0[1,0; 2,0]1,0[1,0; 2,0]1,0[0,0; 1,0]Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 2; ГА – горизонтальная активность, ВА – вертикальнаяактивность, ИА – исследовательская активность, Гр – груминг, ФБ – фекальные болюсы.89На 14 суткиповышается горизонтальная активность (на 50% по медиане),вертикальная активность животных (на 133% по медиане).
Максимальнойвыраженности эффект ЛИ на этологический статус при ИКГМ зафиксирован на30 сутки эксперимента, когда повысились горизонтальная активность (на 52% помедиане), вертикальная активность (на 60% по медиане) и исследовательскаяактивность животных (на 75% по медиане).Следует отметить, что по сравнению с группой ложнооперированныхживотных изменения этологического статуса при экспериментальной ИКГМ вусловиях применения ЛИ включают на 3 сутки снижение (р<0,01) горизонтальнойактивности, вертикальной активности и исследовательской активности животных,на 7 и 14 сутки – снижение (р<0,01) горизонтальной активности и вертикальнойактивности, на 30 сутки – снижение (р<0,01) исследовательской активностиживотных.Таким образом, максимальный эффект ЛИ при экспериментальной ИКГМзафиксирован на 14 и 30 сутки наблюдения, в условиях воздействия ЛИвертикальная активность животных восстанавливается начиная с 7 суток,исследовательская активность восстанавливается на 30 сутки эксперимента.Полученные результаты позволяют констатировать ускорение восстановленияориентировочно-исследовательского поведения при экспериментальной ИКГМпосле однократного воздействия ЛИ.3.3.2 Влияние лазерного излучения на микроциркуляцию в очагеповреждения при экспериментальной ишемии коры головного мозгаПолагаем, что установленные выше эффекты ЛИ на неврологический статуси этологический статус при экспериментальной ИКГМ в определенной мереобусловлены эффектами лазерной терапии на микроциркуляцию в очагеишемического повреждения.
Ранее были продемонстрированы эффекты ЛИ нареваскуляризацию очага повреждения в миокарде, печени, коже и других тканях иорганах [16, 17, 18, 19, 20, 78, 79].90Результаты оценки показателя микроциркуляции в очаге ишемическогоповреждения представлены в таблице 19. Как видно, на 3 и 7 сутки экспериментанаблюдается только тенденция к увеличению показателя без статистическойзначимости отличий с группой животных с ИКГМ без терапевтическоговоздействия.На14суткинаблюдениястатистически значимо возрастаетнапоказатель38%(помикроциркуляциимедианеотносительногруппы животных с ИКГМ), на 30 сутки – на 38%.Таблица 19Влияние лазерного излучения на показатель микроциркуляции приэкспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3], пф.
ед.)Группы животных1. Ложнооперированные3 сутки5,19[4,54-6,95]7 сутки5,29[4,87-6,95]14 сутки5,19[4,57-6,95]30 сутки5,21[4,53-6,95]2. ИКГМ2,34[1,61-3,86]2,75[0,89-3,87]2,57[1,36-5,48]3,77[2,93-4,38]4. ИКГМ + ЛИ3,49[2,15-4,6]3,40[2,70-4,15]4,55[3,75-5,47]5,20[3,9-6,39]Различия (критерийМанна–Уитни)P1-2<0,001P1-4<0,01P1-2<0,001P1-4<0,01P1-2=0,016P2-4<0,01P1-2<0,001P2-4<0,01Примечательно, что по сравнению с группой ложнооперированных животных на3 и 7 сутки зафиксировано снижение показателя микроциркуляции, а на 14 и 30сутки – отсутствие значимых отличий.Таким образом, при экспериментальной ИКГМ эффект ЛИ зафиксирован на14 и 30 сутки наблюдения, а с 14 суток показатель микроциркуляции полностьювосстанавливается (не отличается от группы ложнооперированных животных).Безусловно,наибольшийнейропротекторногоинтересдействияЛИвприпланеИКГМобъяснениямеханизмапредставляютданныеморфологического исследования очага ишемического повреждения, в том числеэкспрессиивазоэндотелиальногофакторароста,атакжеизменения91количественного состава клеток в системном кровотоке, что и явилось предметомследующих разделов исследования.3.3.3 Влияние лазерного излучения на морфологию и экспрессиюVEGF в очаге повреждения при экспериментальнойишемии коры головного мозгаПримикроскопическомисследованиигистологическихпрепаратовголовного мозга в зоне коагуляции пиальных сосудов определялись признакинекроза эндотелия и стенки отдельных капилляров и артерий, сопровождавшиесямелкоочаговыми кровоизлияниями.
В окружающей ткани мозга отмечалисьдеструктивные изменения ядер и цитоплазмы отдельных нейронов, а такжеполнокровие сосудов, пролиферация глиоцитов, эндотелиоцитов кровеносныхсосудов (рисунок 7А). Данные морфологические изменения сохранялись до 14суток опыта. На этом сроке наблюдения в местах кровоизлияний сформировалиськистовидные полости, которые наблюдались вплоть до 30 суток эксперимента.
Вэто время регистрировалась лучшая сохранность нейронов, лишь отдельные изкоторых находились в состоянии набухания и сморщивания. Наблюдаласьпролиферация глиоцитов, а также эндотелиоцитов капилляров и артериол,полнокровие сосудов, ремиелинизация поврежденных нервных волокон (рисунок7Б).Результаты морфометрического анализа очага ишемического поврежденияпри экспериментальной ИКГМ в условиях применения ЛИ представлены втаблице 20. На 3 сутки эксперимента увеличивается количество интактныхнейронов (на 45% по медиане по сравнению с группой животных с ИКГМ безтерапевтического воздействия), снижается количество нейронов с хроматолизом(на 22% по медиане) и клеток-теней (на 68% по медиане); количество мелкихсосудов и площадь инфаркта достоверно не изменяются, отметим тенденцию кснижению площади инфаркта.92АБРисунок 7 – Морфологические изменения в очаге ишемическогоповреждения головного мозга в условиях применения лазерногоизлучения на 30 сутки эксперимента: А – пролиферация эндотелиоцитовс формированием капилляров на 7 сутки эксперимента (окраскагематоксилином и эозином, ув.
х200); Б – ремиелинизацияповрежденных нервных волокон на 30 сутки эксперимента(окраска по Шпильмейеру, ув. х400)7 сутки наблюдения характеризуются более выраженными изменениями вочаге повреждения: увеличением количества интактных нейронов (на 75% помедиане), снижением количества нейронов с хроматолизом (на 56% по медиане) иклеток-теней (на 76% по медиане); увеличением количества мелких кровеносныхсосудов (на 73% по медиане) и снижением площади инфаркта (на 20% помедиане), кроме этого, на правах тенденции увеличивалось количество глиоцитов.На 14 сутки экспериментальной ИКГМ в условиях применения ЛИ в очагеповреждения количество интактных нейронов возрастало в 1,4 раза, количествонейронов с хроматолизом снижалось на 72%, а количество клеток-теней – на 83%,Таблица 20Влияние лазерного излучения на морфометрические показатели в очаге поврежденияпри экспериментальной ИКГМ (Me [Q1-Q3])Показатели3 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=10)(n=10)7 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=10)(n=10)14 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=10)(n=10)30 суткиГруппа 2.Группа 4.ИКГМИКГМ+ЛИ(n=10)(n=10)63,3530,3871,8725,2182,11[23,08-36,39][61,47[69,09[15,96-32,29][80,1566,85] *74,00] *85,36] *11,9334,10НХр,9,6842,108,012[11,17[32,03-35,09]ед./мм[8,85[40,45-43,10][7,6113,08] *10,21] *9,05] *15,4070,75КТ,11,8676,357,512[14,10[67,04-72,68][70,77-78,01] [6,87-8,65] *ед./мм[10,4016,56] *12,81] *Гл,131,65133,53144,98120,03159,192[150,89ед./мм[126,91[130,48[142,41[117,96136,89]153,23]123,62]165,00]138,27]8,8415,1314,2612,32МС,20,122[11,63[7,73-10,14][13,95[11,93-16,01]ед./мм[18,1213,38]*17,73]*21,65] *604,06486,71734,66459,14994,65349,01ПИ,557,13495,862мкм[541,38[490,81[593,48[473,98[718,89[454,30[968,38[339,38582,23]508,65]625,80]494,20]*744,00]476,38]*995,85]362,90]*Примечание: * – значимые (р<0,01) различия с группой 2; ИН – интактные нейроны, НХр – нейроны с хроматолизом,КТ – клетки-тени, Гл – глиоциты, МС – мелкие сосуды, ПИ – площадь инфаркта.ИН,ед./мм240,47[37,2546,54]36,44[31,9638,11]56,74[51,6960,03]123,55[115,20138,16]5,27[4,43-5,55]58,13[55,4160,42] *28,51[27,5729,50] *18,51[17,5719,50] *129,10[122,89133,84]5,90[5,32-7,31]36,50[30,8742,77]25,94[25,2126,73]62,25[58,0866,84]119,45[115,54125,13]7,13[6,41-7,87]94количество мелких сосудов возрастало на 72%, а площадь инфаркта сокращаласьна 37% по сравнению с группой животных с ИКГМ без терапевтическоговоздействия.Наконец, на 30 сутки наблюдения в очаге ишемического поврежденияувеличивается количество интактных нейронов (в 2,3 раза по медиане), снижаетсяколичество нейронов с хроматолизом (на 81% по медиане) и клеток-теней (на91% по медиане); увеличивается количество мелких кровеносных сосудов (на43% по медиане) и значительно сокращается площадь инфаркта (на 65% помедиане), отметим также тенденцию к увеличению количества глиоцитов.Таким образом, при экспериментальной ИКГМ в условиях применения ЛИво все сроки наблюдения увеличивается количество интактных нейронов,снижается количество нейронов с хроматолизом и клеток-теней; кроме этого, на7, 14, 30 сутки наблюдения увеличивается количество мелких кровеносныхсосудов и сокращается площадь инфаркта, на правах тенденции увеличиваетсяколичество глиоцитов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
